MTHFR C677T基因檢測指導(dǎo)高血壓精準(zhǔn)治療

葉叔安 張安平 許藝璇 肖培玲

【摘要】 目的：研究MTHFR C677T基因檢測指導(dǎo)高血壓精準(zhǔn)治療。方法：選擇2016年10月-2018年10月在本院進(jìn)行治療的44例H型高血壓患者，根據(jù)干預(yù)方式不同分為對照組和研究組，每組22例。其中對照組采取常規(guī)血壓干預(yù)，研究組實施生活與葉酸干預(yù)。觀察兩組的日常生活、Hcy、生化指標(biāo)、BMI，并分析MTHFR基因型及不同基因型的Hcy水平。結(jié)果：干預(yù)后，研究組吸煙、飲酒、高動物蛋白飲食比例均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。干預(yù)后，研究組的Hcy、總膽固醇、甘油三酯均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。兩組干預(yù)前后的空腹血糖、尿素氮、BMI比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。兩組的C/C比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;研究組的C/T、T/T均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。T/T的Hcy水平高于C/T，且C/T的Hcy水平高于C/C，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：H型高血壓患者Hcy水平明顯較高，在建議該人群應(yīng)該盡早做相關(guān)檢測以檢查是否發(fā)生高同型半胱氨酸血癥，并早期葉酸干預(yù)。

【關(guān)鍵詞】 高血壓 MTHFR C677T 同型半胱氨酸 葉酸

[Abstract] Objective： To study MTHFR C677T gene detection to guide precise treatment of hypertension. Method： Forty-four patients with H-type hypertension treated in our hospital from October 2016 to October 2018 were selected. According to different intervention methods， the patients were divided into control group and study group， 22 cases in each group. The control group received routine blood pressure intervention， the study group received life and Folic Acid intervention. The daily life， Hcy， biochemical indicators and BMI were observed， and MTHFR genotypes and Hcy levels of different genotypes were analyzed. Result： After intervention， smoking， drinking and high animal protein diet in the study group were lower than those in the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. After intervention， Hcy， total cholesterol and triglyceride in the study group were all lower than those in the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. There were no significant differences in fasting blood glucose， urea nitrogen and BMI between the two groups before and after intervention （P>0.05）. There was no significant difference in C/C between the two groups （P>0.05）， C/T and T/T in the study group were lower than those in the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. The Hcy level of T/T was higher than that of C/T， and the Hcy level of C/T was higher than that of C/C， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion： The level of Hcy in patients with H-type hypertension is obviously higher， it is suggested that the population should be detected as soon as possible to check whether hyperhomocysteinemia occurs and early Folic Acid intervention.

高血壓是導(dǎo)致腦卒中、冠心病、腎臟損害的重要危險因素，大部分腦卒中與心肌梗死均與高血壓存在一定聯(lián)系[1]。在我國高血壓患者中，伴有血漿同型半胱氨酸（Hcy）增高的原發(fā)性高血壓，成為H型高血壓，在成年患者中占75%[2]。血漿Hcy與患者年齡、葉酸水平、生活方式存在一定聯(lián)系，但決定Hcy代謝的關(guān)鍵酶的多個位點的突變在遺傳中占據(jù)了關(guān)鍵作用。Hcy水平升高與原發(fā)性高血壓患者在心血管時間上存在協(xié)同作用，Hcy升高會使得高血壓心血管風(fēng)險升高[3]。且高Hcy會對血管內(nèi)皮造成損傷，不同程度上增加動脈僵硬度，并降低順應(yīng)性，最終導(dǎo)致患者血壓升高，加重對血管的損害，引起心、腦、腎并發(fā)癥[4]。本文通過將MTHFR C677T基因檢測納入研究，積極控制病情，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年10月-2018年10月在本院治療的H型高血壓。納入標(biāo)準(zhǔn)：均為原發(fā)性高血壓。排除標(biāo)準(zhǔn)：惡性腫瘤及血液疾病;明確感染灶的急慢性感染;研究近半年服用影響血清Hcy的藥物。根據(jù)干預(yù)措施分為對照組和研究組，每組22例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有納入對象均簽署知情同意，自愿參加。

1.2 方法

1.2.1 血壓測定 按照我國高血壓防治指南，取患者3次坐位血壓均值，并按照指南血壓高低水平進(jìn)行分期[5]。

1.2.2 血漿Hcy測定 患者空腹靜脈采血，樣本均為新鮮血清，樣本采集后需冷藏并迅速離心，檢測延遲需要冷藏血清，樣本-20 ℃凍存，1周內(nèi)進(jìn)入-80 ℃凍存。血漿Hcy由中心試驗室采用高效相色譜法測定。試驗條件如下：Agilent1200液相色譜議，色譜柱Agilent ZORBAX SB C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）;流動相為40 mM醋酸緩沖液（含3%甲醇），流速0.8 mL/min;進(jìn)行量30 μL;柱度：25 ℃。分析時間15 min;熒光檢測條件：激光波長：382 nm，發(fā)射波長：510 nm。Hcy正常值設(shè)定在10 μmol/L，≥10 μmol/L定義為高同型半胱血癥（HHcy）。

1.2.3 MTHFR基因型測定 EDTA抗凝外周血1～2? mL，使用天隆全血DNA提取試劑盒、配套自動化提取儀，將外周血、相應(yīng)試劑加入96深孔板中，選擇運行程序，結(jié)束后將提取好的DNA吸出保存[6]。使用NANODROP 2000檢測DNA濃度（需大于10 ng/μL），260/280純度在1.8～2.0合格。熒光PCR：使用武漢友芝友人類MTHFR 677基因多態(tài)性檢測試劑盒，將配套試劑配好加入8聯(lián)管或96孔板中，最后加入相應(yīng)樣本的DNA。且每一批檢測中還需同時檢測陰性對照、陽性對照。儀器運行：加好后瞬時離心上機-Themofisher ABI 7500熒光定量PCR儀。分析結(jié)果：CC、CT、TT。一般生化檢查均由全自動生化分析儀。

1.2.4 干預(yù)方式 對照組采取常規(guī)血壓干預(yù)，研究組實施生活與葉酸干預(yù)。兩組患者均進(jìn)行飲食與行為生活方式調(diào)查，并了解患者喝酒與飲食結(jié)構(gòu);并對研究組進(jìn)行相關(guān)知識教育，對兩組患者進(jìn)行追蹤。

1.3 觀察指標(biāo)與評價標(biāo)準(zhǔn) 比較兩組干預(yù)前后的日常生活情況，包括吸煙、飲酒、高動物蛋白飲食，并記錄干預(yù)前后Hcy、總膽固醇、甘油三酯、空腹血糖、尿素氮、BMI。比較兩組的MTHFR基因型以及MTHFR不同基因型的Hcy水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 19.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 對照組22例患者，男11例，女11例;年齡55～83歲，平均（66.54±4.54）歲。研究組22例患者，男12例，女10例;年齡52～83歲，平均（66.23±4.34）歲。兩組性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組日常生活情況比較 兩組干預(yù)前吸煙、飲酒、高動物蛋白飲食比例比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;干預(yù)后，研究組吸煙、飲酒、高動物蛋白飲食比例均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.3 兩組干預(yù)前后Hcy、總膽固醇、甘油三酯水平比較 兩組干預(yù)前Hcy、總膽固醇、甘油三酯比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;干預(yù)后，研究組的Hcy、總膽固醇、甘油三酯均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.4 兩組干預(yù)前后空腹血糖、尿素氮、BMI比較 兩組干預(yù)前后的空腹血糖、尿素氮、BMI比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表3。

2.5 兩組MTHFR基因型比較 兩組患者的C/C比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;研究組的C/T、T/T均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

2.6 MTHFR不同基因型Hcy水平比較 10例T/T患者的Hcy水平為（21.54±4.58）μmol/L，高于17例C/T的（18.45±3.85）μmol/L，且C/T的Hcy水平高于17例C/C患者的（15.54±3.25）μmol/L，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

高血壓是心腦血管等疾病的重要危險因素，血漿中Hcy水平升高會使得血壓出現(xiàn)升高，出現(xiàn)動脈粥樣硬化，而H型高血壓血管疾病明顯升高[7]。但其發(fā)病機制并不明確，可能是由于氧化應(yīng)激，使得平滑肌細(xì)胞增殖，促進(jìn)血小板與粒細(xì)胞激活。而Hcy產(chǎn)生的氧化刺激血管平滑肌，使得細(xì)胞增殖，造成血管內(nèi)膠原成分增加，增厚血管壁，破壞了血管順應(yīng)性[8-9]。目前認(rèn)為Hcy的是心腦血管疾病的獨立危險因素，而高血壓與Hcy同時存在情況下會誘發(fā)心血管疾病，因此需要有效控制H型高血壓[10]。

MTHFR是Hcy代謝中的關(guān)鍵酶之一，會影響Hcy的濃度，在出現(xiàn)突變后，Hcy會直接出現(xiàn)升高[11]。而本研究中，干預(yù)前，兩組吸煙、飲酒、高動物蛋白飲食比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。兩組干預(yù)前Hcy、總膽固醇、甘油三酯、空腹血糖、尿素氮、BMI比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;研究組干預(yù)后吸煙、飲酒、高動物蛋白飲食均低于對照組，各生化指標(biāo)水平均優(yōu)于對照組（P<0.05）。兩組患者的C/C比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;研究組的C/T、T/T均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。T/T的Hcy水平高于C/T，且C/T的Hcy水平高于C/C，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。能夠發(fā)現(xiàn)補充葉酸可有效降低Hcy水平，因此可根據(jù)高血壓患者情況，及時補充不同劑量的葉酸，對控制H型高血壓具有中意義，為我國防治提供了重要的方向[12-13]。經(jīng)過臨床干預(yù)，改善患者生活方式，減少相關(guān)危險因素。而吸煙與飲酒均會對Hcy水平造成一定影響[14-15]。但原發(fā)性高血壓患者血漿Hcy，隨著血壓等級升高而出現(xiàn)增加。目前我國高血壓發(fā)病率也在不斷上升，本文結(jié)果也證實了其與MTHFR C677T基因存在一定聯(lián)系，而及時補充葉酸可降低Hcy水平[16-17]。其中T/T的Hcy水平最高，可能是由于Hcy升高引起的內(nèi)皮功能異常、平滑肌細(xì)胞增殖等作用[18-19]。因此能夠推測MTHFR C677T等位基因可能是H型高血壓易感基因，也是H型高血壓的危險因素之一[20]。

綜上所述，通過社區(qū)干預(yù)改善患者生活方式，可有效降低Hcy水平，MTHFR C677T與H型高血壓之間存在一定相關(guān)性，進(jìn)行檢測有助于早期預(yù)防心血管疾病，并發(fā)現(xiàn)危險因素，值得應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1] Wang Yu，Xu Xin，Huo Yong，et al.Predicting Hyperhomocysteinemia by Methylenetetrahydrofolate Reductase C677T Polymorphism in Chinese Patients with Hypertension[J].Clinical and Applied Thrombosis/Hemostasis，2015，21（7）：661-666.

[2]魏守超，劉志輝，劉君玲，等.亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T多態(tài)性與中國山東地區(qū)漢族人群缺血性卒中、高尿酸血癥的相關(guān)性[J].國際腦血管病雜志，2016，24（11）：1004-1009.

[3]趙艷梅，王東旭，許為炎，等.血漿同型半胱氨酸及5，10-亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性與老年原發(fā)性高血壓合并冠心病的關(guān)系[J].中國循證心血管醫(yī)學(xué)雜志，2016，8（10）：1191-1194.

[4]鄒宏麗，宋玉強，李培媛，等.亞甲基四氫葉酸還原酶C677T基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓患者頸動脈粥樣斑塊形成的相關(guān)性研究[J/OL].中華臨床醫(yī)師雜志（電子版），2016，10（13）：1858-1861.

[5]朱武，張坤.亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T多態(tài)性與高血壓患者動脈粥樣斑塊形成的相關(guān)性[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2016，13（13）：1783-1785.

[6]趙春麗，張先位，韋永強，等.廣西黑衣壯族高血壓人群同型半胱氨酸及其代謝酶MTHFR C677T多態(tài)性研究[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2019，36（4）：570-573.

[7]錢凈，施茜，翟秀偉，等.昆明地區(qū)漢族H型高血壓MTHFR基因C677T多態(tài)性及其相關(guān)危險因素的分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2018，33（6）：476-480.

[8]隋小芳，徐男，費秀斌，等.原發(fā)性高血壓并發(fā)2型糖尿病患者與MTHFR C677T基因的相關(guān)性研究[J].中國實驗診斷學(xué)，2019，23（3）：392-394.

[9]陳良余，毛雨，周揚，等.H型高血壓患者M(jìn)THFR基因C677T多態(tài)性與頸動脈內(nèi)膜中層厚度的相關(guān)性研究[J].中國循證心血管醫(yī)學(xué)雜志，2018，10（6）：690-693.

[10]劉鵬，鐘萍，孫學(xué)春，等.H型高血壓患者M(jìn)THFR基因多態(tài)性及葉酸補充對同型半胱氨酸濃度的影響[J].嶺南心血管病雜志，2018，24（3）：311-313.

[11]楊紅玲，孫焱，洪云飛，等.不同年齡段H型高血壓合并慢性心力衰竭患者血清Hcy合成相關(guān)酶MTHFR、CBS及MTR表達(dá)研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2016，13（11）：60-63.

[12]張翠，司君增，鄭立峰，等.亞甲基四氫葉酸還原酶C677T位點基因多態(tài)性對采用葉酸聯(lián)合維生素B12治療的老年H型高血壓患者的影響研究[J].實用心腦肺血管病雜志，2018，26（6）：27-30.

[13]劉宇，隋小芳，王鳳玲，等.MTHFR C677T基因多態(tài)性及血漿同型半胱氨酸與高血壓合并缺血性腦卒中的相關(guān)性研究[J].中國實驗診斷學(xué)，2017，21（12）：2056-2061.

[14] Xi B，Shen Y，Zhao X，et al.Association of common variants in/near six genes（ATP2B1，CSK，MTHFR，CYP17A1，STK39 and FGF5） with blood pressure/hypertension risk in Chinese children[J].Journal of Human Hypertension，2014，28（1）：32-36.

[15]李丹丹，葉阿里，甘勇，等.北京地區(qū)漢族人群MTHFR C677 T基因多態(tài)性分析[J].臨床檢驗雜志，2019，37（2）：156-160.

[16]郭曉玲，魯衍強，楊興坤，等.佛山市漢族人群葉酸代謝通路關(guān)鍵酶基因MTHFR C677T多態(tài)性分布特征調(diào)查[J].實用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2019，26（3）：290-292.

[17]李艾帆，張華，范玉佳，等.Hcy及MTHFR C677T基因多態(tài)性與河南漢族腦更死的關(guān)系[J].中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2014，31（6）：510-513.

[18]付龍，孫溢晗，張月蘭，等.MTHFR基因C677T多態(tài)性與H型高血壓合并冠心病患者HCY、冠狀動脈病變的關(guān)系[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2015，44（4）：351-356.

[19]羅秀莉，魯衍強，郭文竹，等.湖北松滋市漢族女性MTHFR與MTRR基因多態(tài)性分布[J].公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)，2014，25（2）：29-32.

[20]方玉蓮，馬世坤，石鷗燕，等.MTHFR基因C677T多態(tài)性與神經(jīng)管缺陷相關(guān)性的Meta分析[J].天津醫(yī)藥，2015，43（5）：552-558.

（收稿日期：2019-08-12） （本文編輯：程旭然）