左歸丸組方分析及實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

姚 蕾，劉春慧，卓 拉

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué) 中醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010100)

左歸丸，育陰涵陽(yáng)，純補(bǔ)無(wú)瀉，水火交濟(jì)之方也。由熟地黃、山藥、山萸肉、枸杞、川牛膝、菟絲子、鹿膠和龜膠八味藥材組成，出自明代張景岳的《景岳全書(shū)》，用于真陰腎水不足、精髓內(nèi)虧、津液枯竭等證的治療。本文對(duì)左歸丸的方解和近年的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 左歸丸方劑源流

左歸丸是明代溫補(bǔ)醫(yī)家張景岳所創(chuàng)的補(bǔ)腎滋陰名方，記載于《景岳全書(shū)·新方八陣》卷51中，本方具有滋補(bǔ)腎陰、填精補(bǔ)髓之效，主治精髓虧虛等所致的真陰不足證。本方系張景岳在六味地黃丸、金匱腎氣丸的基礎(chǔ)之上化裁而來(lái)，滋補(bǔ)腎水之劑和益腎升陽(yáng)之方[1]共奏“六味之意”。其一只取六味地黃丸“三補(bǔ)”之地黃、山茱萸、山藥，提出補(bǔ)陰之法不宜滲的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)；其二溫陽(yáng)填精的“鹿角膠、菟絲子”等溫補(bǔ)之藥補(bǔ)陽(yáng)益陰；其三“龜角膠、鹿角膠”為龜鹿二膠合用，寓有一陰一陽(yáng)之意。加入枸杞子、龜角膠、牛膝以增滋補(bǔ)肝腎之力。本方是張景岳在繼承命門(mén)學(xué)說(shuō)、真陰論基礎(chǔ)上并對(duì)以往醫(yī)方分治水火的學(xué)術(shù)思想上根據(jù)個(gè)人總結(jié)與發(fā)展所創(chuàng)作，使之發(fā)揮養(yǎng)陰而不離扶陽(yáng)、陰陽(yáng)并生互補(bǔ)之功。

2 左歸丸組方分析

方中重用熟地為君，《本草從新》言“滋腎水，封填骨髓……為壯水之主藥”，故峻補(bǔ)腎陰，益精髓。用山茱萸補(bǔ)養(yǎng)肝腎，固秘精氣并有“益髓興陽(yáng)”之效；山藥健脾益陰，滋腎固精；龜鹿二膠都峻補(bǔ)精血，龜膠滋陰補(bǔ)髓，鹿膠溫壯腎陽(yáng)，配入補(bǔ)陰方中是取“陽(yáng)中求陰”之意，即張景岳所言“善補(bǔ)陰者，必于陽(yáng)中求陰，則陰得陽(yáng)升而源泉不竭”，皆為臣藥。枸杞補(bǔ)肝腎，益精血，有滋陰不致陰衰，助陽(yáng)而使陽(yáng)旺之功。菟絲子“助陽(yáng)固泄”，清代楊時(shí)泰認(rèn)為“川牛膝稟厚，固肥而長(zhǎng)，主補(bǔ)精髓”，俱為佐藥。全方肝脾腎三陰并補(bǔ)，尤以滋補(bǔ)腎陰為主，是以補(bǔ)陰為主且補(bǔ)陽(yáng)為運(yùn)的配伍特點(diǎn)，綜合諸藥之功，本方純用補(bǔ)腎填精之品，是典型的補(bǔ)腎益精代表方。

3 左歸丸實(shí)驗(yàn)研究

3.1 治療骨科疾病實(shí)驗(yàn)研究

中醫(yī)認(rèn)為“腎主骨生髓”，腎精盛衰與骨的強(qiáng)弱密切相關(guān)。腎精充盛，骨髓生化有源，骨骼便會(huì)強(qiáng)健有力，而腎精虧虛，骨髓生化無(wú)源，骨骼失去滋養(yǎng)，則易形成“骨萎”，西醫(yī)稱(chēng)為骨質(zhì)疏松癥。在小鼠去卵巢骨質(zhì)疏松模型中，李薇等[2]研究發(fā)現(xiàn)，左歸丸能使骨代謝指標(biāo)(ALP、Str ACP、OC)下降、緩解骨密度下降、改善骨組織形態(tài)。但并不會(huì)使雌激素水平增加，證實(shí)左歸丸通過(guò)滋陰補(bǔ)腎而達(dá)到壯骨目的。柴毅等[3]總結(jié)近幾年左歸丸治療骨質(zhì)疏松癥的相關(guān)機(jī)制，證明了左歸丸治療骨質(zhì)疏松癥具有多靶點(diǎn)、多途徑的干預(yù)特點(diǎn)，其機(jī)制：一是上調(diào)骨組織中BMP9的表達(dá)，經(jīng)GPR48介導(dǎo)的cAMP/PKA/CREB信號(hào)通路糾正骨代謝偶聯(lián)失衡的情況并促進(jìn)骨形成；二是左歸丸通過(guò)Notch信號(hào)通路途徑來(lái)治療骨質(zhì)疏松癥，其表現(xiàn)是上調(diào)該通路的相關(guān)因子BMP9、Notch1、Jagged1及HES的表達(dá)從而激活Notch信號(hào)通路，以此糾正OP的骨代謝異常治療；三是左歸丸治療骨質(zhì)疏松癥TGF-β1/Smads信號(hào)通路中的機(jī)制是從使骨組織TGF-β1，Smad3，p-Smad3和Smad4mRNA水平提高并增加RUNX2、CollagenⅠ和 CollagenⅡ的蛋白水平，腎組織則通過(guò)參與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)分化；四是左歸丸通過(guò)Wnt/β-鏈蛋白(β-catenin)信號(hào)通路途徑相關(guān)重要分子(如Wnt1、LRP和β-catenin)的調(diào)控，來(lái)使骨形成與骨吸收保持平衡，最終治療骨質(zhì)疏松癥；五是左歸丸可通過(guò)上調(diào)p-ERK1/2蛋白，增加Cbfα1、CollagenⅠmRNA及蛋白的分泌，提高鈣化結(jié)節(jié)，使BMSCs成骨分化加強(qiáng)。安方玉等[4]研究發(fā)現(xiàn)左歸丸可能對(duì)OPG/RANK/RANKL調(diào)節(jié)軸進(jìn)行調(diào)控進(jìn)而提高骨密度和骨生物力學(xué)參數(shù)并且還可以調(diào)節(jié)鈣磷代謝影響骨礦代謝，對(duì)骨質(zhì)疏松起到防治目的。王如然等[5]研究認(rèn)為，在去勢(shì)大鼠模型中左、右歸丸可增加OPG的表達(dá)，并同時(shí)顯著降低RANKL、Wnt1的表達(dá)；通過(guò)增強(qiáng)OPG與RANKL的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，以使破骨細(xì)胞活性降低，降低骨吸收功效；同時(shí)Wnt1的下調(diào)可能使成骨細(xì)胞的活性降低，以致骨形成減少，從而降低骨轉(zhuǎn)化率，最終使骨形成和骨吸收逐漸平衡。

3.2 治療婦科疾病實(shí)驗(yàn)研究

腎藏精，為天癸之源，《傅青主女科》[8]有“經(jīng)水出諸腎”之說(shuō)，亦云:“精滿(mǎn)則子宮易于攝精。”腎的生理功能正常，則所藏之精滿(mǎn)溢，所化之血充沛，胞宮得以充養(yǎng)，胞脈得以充盛，以致胚胎順利生長(zhǎng)，所以腎與女子月經(jīng)及胎孕關(guān)系極為密切。而腎陰虛損精氣虧虛則生殖功能異常，故腎陰不足、天癸虧耗、沖任二脈受損是女性生殖系統(tǒng)疾病發(fā)生的主要病機(jī)。左歸丸補(bǔ)腎益精、養(yǎng)血活血，使天癸充盈、任脈流通、沖脈盛滿(mǎn)，治療多種婦科疾病。譚惠予等[8]通過(guò)對(duì)277篇關(guān)于女性患者輔助生殖技術(shù)失敗的中醫(yī)證候文獻(xiàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得出中醫(yī)證候分布頻率最高的是腎虛。研究表明左歸丸可能是通過(guò)增加雌激素改善幼齡大鼠的卵巢卵泡、子宮發(fā)育。吳倩等[9]研究發(fā)現(xiàn)，左歸丸及干細(xì)胞治療可改善化療所致的卵巢功能損害，其能顯著提高E2含量，使FSH、LH含量降低，并能夠?qū)β殉差w粒細(xì)胞的凋亡起到抑制作用，且證明二者聯(lián)合應(yīng)用效果更佳。唐錦等[10]研究發(fā)現(xiàn)，左歸丸通過(guò)上調(diào) DDR2的表達(dá)促進(jìn)MMP-9活化，使MMP-9也呈高表達(dá)，從而增強(qiáng)纖維蛋白水解來(lái)抑制宮腔粘連纖維化的形成，有效改善宮腔粘連模型大鼠宮腔粘連程度，預(yù)防宮腔粘連形成。

3.3 治療男性生殖系統(tǒng)疾病實(shí)驗(yàn)研究

中醫(yī)理論中“腎主生殖”，且在《諸病源候論·虛勞精少候》中亦云:“腎主骨髓而藏于精，虛勞腎氣虛弱，故津液少也。”故臨床從補(bǔ)腎生精方面防治男性生殖疾病，左歸丸于補(bǔ)腎之中調(diào)節(jié)腎的陰陽(yáng)平衡，表現(xiàn)出了“育陰以涵陽(yáng)”的特點(diǎn)。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[11-12]，左歸丸能夠緩解雷公藤多苷造成大鼠生精細(xì)胞損傷，表現(xiàn)為上調(diào)Bcl-2的蛋白表達(dá)，亦上調(diào)Ki67蛋白及mRNA的表達(dá)，從而抑制生精細(xì)胞的凋亡，改善生精功能，這可能是中醫(yī)“補(bǔ)腎生精”法分子機(jī)制。孫松等[13]研究發(fā)現(xiàn)，左歸丸治療腎陰不足型不育少弱精子癥臨床療效確切，其具體作用機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)控c-kit、Oct4蛋白及mRNA的表達(dá)，從而抑制凋亡，促進(jìn)增殖。

3.4 調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)研究

付海爾等[14]以甲狀腺功能亢進(jìn)腎陰虛大鼠模型，通過(guò)檢測(cè)甲狀腺功能、腎上腺皮質(zhì)功能、免疫功能等來(lái)觀察左歸丸對(duì)大鼠的干預(yù)作用，結(jié)果表明左歸丸對(duì)甲狀腺功能亢進(jìn)的腎陰虛大鼠的下丘腦-垂體-腎上腺軸油有調(diào)節(jié)作用，可改善其免疫功能；左歸丸能減少血清中cAMP、 cGMP、17-OHCS水平，升高cAMP/cGMP，說(shuō)明左歸丸能調(diào)節(jié)cAMP-AVP系統(tǒng)，從而發(fā)揮滋陰作用。龔張斌等[15]研究表明，對(duì)大鼠自然衰老“腎虛”模型灌以左歸丸后，發(fā)現(xiàn)可對(duì)白細(xì)胞介素IL-2基因啟動(dòng)子區(qū)域Cp G位點(diǎn)甲基化水平有影響，使其DNMTs活性減弱，Set1區(qū)CpG位點(diǎn)甲基化程度降低，最后導(dǎo)致IL-2轉(zhuǎn)錄增高，使細(xì)胞免疫功能退化進(jìn)程減緩，左歸丸對(duì)調(diào)節(jié)衰老機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境平衡具有一定優(yōu)勢(shì)。

3.5 治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病實(shí)驗(yàn)研究

《靈樞·海論》曰：“髓海有余，則輕勁多力，自過(guò)其度。髓海不足，則腦轉(zhuǎn)耳鳴，脛酸眩冒，目無(wú)所見(jiàn)，懈怠安臥。”腎之精氣充足，則髓海充盈，腦功能正常；若腎精不足，髓海充盈不足，導(dǎo)致腦功能衰退繼而出現(xiàn)衰老征象。左歸丸培壯腎命真水方可使陰精得壯，精化為氣，陰生陽(yáng)長(zhǎng)，重振生機(jī)，延年益壽。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，其可改善中樞神經(jīng)細(xì)胞再生，提高抗氧化能力，延緩衰老，起到保護(hù)腦、血管的作用。有研究報(bào)道去卵巢大鼠能夠?qū)е聶C(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化水平增加[16]，左歸丸對(duì)去卵巢大鼠模型肝臟有抗氧化能力，進(jìn)一步觀察其相關(guān)指標(biāo)LPO(氧化應(yīng)激狀態(tài))、MDA(脂質(zhì)過(guò)氧化程度)和 T-SOD、GSH-PX、CAT(重要抗氧化酶)的影響。通過(guò)比較左歸丸組大鼠與模型組大鼠得出：左歸丸組LPO、MDA降低，而T-SOD、GSH-PX、CAT活性均升高[17]，提示左歸丸中的大豆異黃酮具有類(lèi)雌激素樣作用，可以提高肝臟的抗氧化能力。王璐等[18]研究表明，左歸丸與益氣聰明湯可通過(guò)改善衰老大鼠過(guò)度亢進(jìn)的HPA軸，影響突觸受體表達(dá)與腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子/酪氨酸激酶B信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)鏈活性，延緩學(xué)習(xí)記憶退化。

3.6 其他實(shí)驗(yàn)研究

相關(guān)研究結(jié)果顯示，腸穩(wěn)態(tài)與中醫(yī)的衛(wèi)氣有相通之處[19]，補(bǔ)腎法可重建免疫衰老和炎性衰老穩(wěn)態(tài)[20]。劉世琦等[21]基于中醫(yī)學(xué)“二陽(yáng)為衛(wèi)”探討補(bǔ)腎填精方左歸丸對(duì)衰老所致腸穩(wěn)態(tài)失衡的防治作用，改善腸道菌群多樣性，修復(fù)腸道黏膜屏障的形質(zhì)損傷，恢復(fù)腸穩(wěn)態(tài)，進(jìn)而逆轉(zhuǎn)衰老所致腸穩(wěn)態(tài)失衡引起的一系列慢性疾病的發(fā)生和發(fā)展。鄒樂(lè)蘭等[22]研究發(fā)現(xiàn)，左歸丸抗腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制：體內(nèi)抑制模型(乳腺癌細(xì)胞股骨注射)誘導(dǎo)的骨轉(zhuǎn)移灶形成，左歸丸含藥血清可以抑制腫瘤細(xì)胞PTHr P和CXCR4的表達(dá)；體外左歸丸含藥血清抑制細(xì)胞骨架F-actin聚合。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，左歸丸是培左腎之元陰而精血自充的壯水之劑，通過(guò)運(yùn)用中醫(yī)“腎主精生髓”理論將其與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中骨骼、神經(jīng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)聯(lián)系起來(lái)，通過(guò)培補(bǔ)腎陰，充其精血，發(fā)揮改善骨轉(zhuǎn)換率、減少骨量丟失、促進(jìn)中樞神經(jīng)細(xì)胞再生、增強(qiáng)抗氧化能力、改善生殖系統(tǒng)紊亂等功效，治療腎陰真水不足之精髓內(nèi)虧諸證。致力于實(shí)現(xiàn)左歸丸多途徑、多靶點(diǎn)、多系統(tǒng)的調(diào)節(jié)機(jī)制，并可以從分子生物和基因蛋白水平方面進(jìn)一步深入探討，以便在臨床試驗(yàn)中，對(duì)已形成結(jié)論的實(shí)驗(yàn)研究加以應(yīng)用，以提高其臨床應(yīng)用價(jià)值。綜合上文實(shí)驗(yàn)研究得知，左歸丸具有類(lèi)雌激素作用，而非提高雌激素治療骨質(zhì)疏松癥，所以是否能對(duì)乳腺癌內(nèi)分泌治療產(chǎn)生的繼發(fā)性骨質(zhì)疏松有很好的防治作用需要進(jìn)一步研究。