五味消毒飲提取物對(duì)脊柱感染大鼠模型的作用價(jià)值探討*

張四清 張觀輝 林 鵬 王世鑫 楊家林 鄒厚輝

脊柱感染為機(jī)體全身性骨髓炎病癥的一種，臨床表現(xiàn)上以腰背痛為主，屬于骨科臨床難治性問(wèn)題之一[1]，對(duì)骨科醫(yī)生提出較大挑戰(zhàn)。脊柱感染已經(jīng)困擾人類(lèi)幾千年，早在古埃及時(shí)期，木乃伊標(biāo)本中即存在脊柱感染病灶[2]。臨床上針對(duì)脊柱感染所累及的脊柱部位及椎旁組織不同，分為脊椎骨髓炎、椎間盤(pán)感染、椎間隙炎癥以及硬膜然后膿腫形成等。傳統(tǒng)西藥治療難以透過(guò)脊、脊髓屏障而到達(dá)脊柱病灶部位。五味消毒飲是中醫(yī)學(xué)治療瘡瘍腫毒的最主要方劑，是清熱解毒，消腫散結(jié)之良藥，具有明顯的抗炎、止痛之功效[3]。為更好的提高脊柱感染的臨床治療效果，本研究通過(guò)建立脊柱感染大鼠模型，并使用五味消毒飲提取物進(jìn)行治療，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1一般材料選擇本院試驗(yàn)動(dòng)物中心試驗(yàn)blister大鼠90只(動(dòng)物許可證號(hào):SCXK2017-001)為研究對(duì)象，入組時(shí)進(jìn)行統(tǒng)一喂養(yǎng)，控制體質(zhì)量為(250±10) g，金黃色葡萄球菌菌株由本省疾病預(yù)防控制中心提供。

1.2方法將90只試驗(yàn)大鼠建立金黃色葡萄球均感染脊柱模型[4],隨機(jī)分為3組，分別給予五味消毒飲提取物(試驗(yàn)組)口服、生理鹽水(空白組)及阿莫西林(國(guó)藥準(zhǔn)字H13021516 神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司)(對(duì)照組)20 mg/kg，溶于生理鹽水后口服，在建模當(dāng)天及建模后12周對(duì)大鼠進(jìn)行稱(chēng)重。

1.3觀察指標(biāo)及評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)比較干預(yù)前后各組大鼠體質(zhì)量變化，統(tǒng)計(jì)干預(yù)后炎性相關(guān)因子(降鈣素原及C反應(yīng)蛋白)水平及血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化，統(tǒng)計(jì)各組局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果。飼養(yǎng)12周后處死試驗(yàn)大鼠，并留取脊柱感染局部病灶。其中降鈣素原正常參考值為低于0.5 ng/ml；C反應(yīng)蛋白正常參考值為低于10 ng/ml。其中五味消毒飲提取物獲取：主要以金銀花、紫花地丁、紫背天葵、蒲公英、野菊花、葛根、丹參為原材料，先實(shí)施碾磨壓碎制成粗粉后，加以10倍量生理鹽水進(jìn)行浸泡、后煎煮并過(guò)濾，在放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)進(jìn)行濾液濃縮，然后行醫(yī)用酒精沉淀、并除去雜質(zhì)，從而得到五味消毒飲提取物。

2 結(jié)果

2.1各組大鼠干預(yù)前后體質(zhì)量變化干預(yù)前各組大鼠體質(zhì)量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),干預(yù)后試驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠體質(zhì)量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),同時(shí)干預(yù)后試驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠體質(zhì)量顯著大于空白組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠干預(yù)前后體質(zhì)量變化比較 (只，

注:t’及P’為試驗(yàn)組與對(duì)照組比較結(jié)果，t及P為3組間檢驗(yàn)結(jié)果

2.2各組大鼠干預(yù)后炎性相關(guān)因子及血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較干預(yù)前各組炎性相關(guān)因子(降鈣素原及C反應(yīng)蛋白)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),干預(yù)后試驗(yàn)組與對(duì)照組炎性相關(guān)因子(降鈣素原及C反應(yīng)蛋白)、血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),同時(shí)干預(yù)后試驗(yàn)組及對(duì)照組炎性相關(guān)因子(降鈣素原及C反應(yīng)蛋白)、血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著低于空白組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3各組大鼠局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果比較試驗(yàn)組局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性只數(shù)為3只(10.0%)，對(duì)照組局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性只數(shù)為1只(3.3%)，空白組局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性只數(shù)為30只(100.0%)，試驗(yàn)組與對(duì)照組局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.000，P=1.000>0.05),且均顯著低于空白組(P<0.05)。

表2 各組干預(yù)后炎性相關(guān)因子及血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較 (只，

注:t’及P’為試驗(yàn)組與對(duì)照組比較結(jié)果，t及P為3組間檢驗(yàn)結(jié)果

3 討論

隨著人們生活方式及飲食習(xí)慣等的變化，脊柱感染由以往的少見(jiàn)病轉(zhuǎn)而成為多發(fā)病。以往研究證實(shí)，其約占全身骨髓炎發(fā)病率的5%[5]。同時(shí)隨著我國(guó)老齡化進(jìn)展、人們對(duì)機(jī)體健康及生活質(zhì)量的要求提高，加之脊柱相關(guān)性侵襲操作如脊柱內(nèi)置物植入、抗菌藥物的濫用等，脊柱感染發(fā)生率有明顯升高趨勢(shì)[6]。雖然通過(guò)及時(shí)的抗菌藥物治療，脊柱感染得到有效控制，但因其發(fā)病較為隱匿，多在患者出現(xiàn)畸形甚至神經(jīng)功能損傷后得以重視。以往治療上多以西藥抗菌藥物干預(yù)，但因耐藥性等原因，治療效果有待提高。

本研究主要建立大鼠脊柱感染模型，并探討中藥五味消毒飲提取物對(duì)脊柱感染的治療價(jià)值。針對(duì)干預(yù)前后各組大鼠體質(zhì)量變化比較發(fā)現(xiàn)，干預(yù)后試驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠體質(zhì)量顯著大于空白組。證明實(shí)施中藥五味消毒飲提取物，其臨床效果與使用萬(wàn)古霉素相近，能有效的確保試驗(yàn)大鼠體質(zhì)量，避免因疾病因素導(dǎo)致的體質(zhì)量降低。另外針對(duì)各組干預(yù)后炎性相關(guān)因子及血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較發(fā)現(xiàn)，干預(yù)后試驗(yàn)組及對(duì)照組炎性相關(guān)因子(降鈣素原及C反應(yīng)蛋白)及血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)，其均顯著低于空白組。提示實(shí)施中藥五味消毒飲提取物，其臨床效果與使用萬(wàn)古霉素相近，可顯著降低機(jī)體炎癥反應(yīng)物質(zhì)。最后針對(duì)各組局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組與對(duì)照組局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且均顯著低于空白組。進(jìn)一步證實(shí)實(shí)施中藥五味消毒飲提取物，其臨床效果與使用萬(wàn)古霉素相近，能顯著降低局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率。

五味消毒飲屬于臨床最為常用的清熱解毒方[7]，金銀花乃君藥，具有清熱解毒，散癰消腫之功效。紫花地丁及紫背天葵均是瀉火燥濕，清熱解毒之實(shí)藥，聯(lián)用丹參則可活血化瘀，涼血除癰。以上三藥為臣藥。另外所用蒲公英、野菊花與葛根則為佐藥，聯(lián)用后具有清熱解毒，涼血散結(jié)之能效。多藥聯(lián)用具有輕揚(yáng)升發(fā)，解肌退熱，生津止渴之臨床總用，針對(duì)脊柱感染，通過(guò)全身作用而針對(duì)脊柱感染病灶進(jìn)行干預(yù)，從而起到提高機(jī)體免疫能力、加強(qiáng)機(jī)體代謝、減輕炎癥反應(yīng)、消炎止痛等作用。

綜上所述，針對(duì)脊柱感染大鼠，使用五味消毒飲提取物治療，能確保干預(yù)期間大鼠體質(zhì)量，降低機(jī)體炎癥反應(yīng)，減少局部組織細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率。