豬支原體肺炎的診斷及防制

段茜 石國林 陳張華 李福泉

摘要：豬肺炎支原體（Mhp）是引起豬支氣管肺炎的主要病原，嚴重危害著養豬事業的發展。對豬支原體肺炎的病原學特征、診斷、疫苗及綜合防制等進行了介紹，以期避免或減少該病發生，保障養豬業健康發展。

關鍵詞：豬肺炎支原體;診斷;防制

中圖分類號：S858.28? ? ? ? 文獻標識碼：B? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2019）01-0021-02

豬支原體肺炎又稱豬霉形體肺炎，是由豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae，MHP）引起的一種以感染豬表現咳嗽、喘氣、生長不良等癥狀為特征的接觸性、慢性傳染病。

豬支原體肺炎多為地方流行性，世界各地均有發生，對養豬業的健康發展造成了嚴重的影響。由于豬感染MhP后，其呼吸道纖毛的清除能力被損壞，致病微生物很容易定植和侵襲;同時MhP的感染會降低巨噬細胞的吞噬力，損害機體免疫功能，從而使MhP持續存在，導致二次感染，引起豬呼吸系統疾病綜合征的發生，增大了當前豬病診斷、預防控制的難度[1]。MhP一旦感染豬群，傳播速度快，如不及時采取措施很難將其根除，被喻為全球養豬業的“隱形殺手”。

1? 病原學特征

MhP屬柔膜體綱支原體目支原體科支原體屬，呈高度多形性，如環狀、球狀、點狀等。革蘭氏染色陰性，但不易著色;姬姆薩染色或瑞氏染色為淡紫色，著色良好。MhP對外界環境的抵抗力較弱，存活不超過24 h。由于缺乏細胞壁，MhP的耐藥性廣泛，對青霉素、鏈霉素和磺胺類等藥物均不敏感。

2? 診斷

2.1? 病原分離培養鑒定

分離培養常用于檢測和鑒定大多數細菌性微生物，而分離培養被認為是檢測MhP的“金標準”。由于MhP的培養需要特殊的培養基且生長十分緩慢，通常需要4～8周的生長才能被檢測到，在分離培養過程中也容易被其他支原體或細菌覆蓋生長，因此要成功分離培養MhP比較困難。

2.2? 血清學檢測

血清學試驗是檢測豬群是否感染MhP最常用的方法，現有凝集試驗（AT）、間接血凝反應試驗（IHA）、補體結合試驗（CF）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）等技術已用于MhP抗體的檢測。其中，ELISA是相對敏感且使用較多的檢測方法，其測定的抗體效價比IHA和CF的結果高10～20倍。即使在感染后期，ELISA法的敏感性仍很高，可檢測到感染后1年的抗體[2]。

2.3? 分子檢測

2.3.1? 聚合酶鏈式反應（PCR）檢測? PCR檢測方法具有敏感性高、特異性好、檢測速度快、操作簡單和重復性好等優點，同時克服了分離培養困難、血清學檢測時易發生交叉反應等缺點。因此PCR檢測技術在MhP的檢測中發展迅速。隨著科技的發展，科學家們相繼建立了多重PCR、巢氏PCR、熒光定量PCR等技術。

2.3.2? 原位雜交技術? 原位雜交技術（ISH）可用于檢測福爾馬林固定、石蠟包埋的肺組織以及試驗感染豬肺組織中MhP DNA，其缺點是操作繁瑣、費時，在生產上的應用受到很大限制。Ruiz等[3]采用原位雜交技術對福爾馬林固定組織切片中的豬肺炎支原體、豬滑液支原體和豬鼻支原體進行了鑒定，發現該方法能將3種支原體很好地區分開來。

3? 豬支原體肺炎疫苗

由于MhP沒有細胞壁，對常規抗生素不敏感，以及耐藥性和MhP免疫保護的特殊性等問題，使得科學家們致力于尋求通過免疫來對MhP進行預防和控制。目前國內外用于預防MhP感染常用的商品化疫苗有常規滅活疫苗、弱毒疫苗及佐劑全細胞苗，一些新型的疫苗如活載體疫苗、DNA疫苗、亞單位疫苗及口服微球苗等正處于實驗室研發階段。

3.1? 滅活疫苗

目前國內使用的滅活苗主要依賴于進口，如法國的“豬克喘”滅活疫苗、美國的“瑞倍適”滅活疫苗、德國的“茵格發”滅活疫苗，以及西班牙的“喜可舒”滅活疫苗等。以往研究認為在疫苗免疫過程中，細胞免疫和黏膜免疫起主要作用。最新研究發現滅活疫苗主要激發機體的體液免疫應答，幾乎不會激發細胞免疫應答，因此滅活疫苗抵抗MhP感染的能力要比活疫苗低[4]。

3.2? 弱毒疫苗

弱毒疫苗能激發機體產生較強的細胞免疫及黏膜免疫，免疫效果較滅活疫苗好。中國獸藥監察所將MhP菌株在乳兔體內連續傳代700多次，獲得了一株保持較好免疫原性的兔化弱毒株，用該弱毒株制備的疫苗安全有效，對豬無副作用[5]。但該疫苗采用胸腔注射的免疫途徑，且產量低、成本高，使其在基層動物防疫中難以廣泛應用。

3.3? 新型疫苗

一些新型疫苗如活載體疫苗、DNA疫苗、亞單位疫苗以及口服微球苗等正處于實驗室研發階段。蘇國東等[6]制備了MhP重組P42蛋白的亞單位疫苗，采用油性佐劑免疫感染豬，結果表明該亞單位疫苗能激發機體產生強烈的細胞免疫反應和體液免疫反應。

4? 綜合防制

僅僅通過疫苗防控豬支原體肺炎效果不佳，因此需加強綜合防制措施。第一，注意引種，采取全進全出制度;第二，對仔豬進行早期免疫，合理用藥;第三，加強生產管理，有計劃地進行衛生消毒;第四，避免懷孕母豬的隱性感染，及時檢疫、隔離發病豬。

為控制豬支原體肺炎的發生，全世界已投入大量的人力物力。但由于MhP培養難度大、對抗生素不敏感等因素，使豬支原體肺炎的發病率仍較高。因此需要采取一系列綜合措施控制該病的發生，包括引種、優化管理、監測發病范圍、應用分離株的分子分型等技術以分析感染的傳播模式以及研制有效的疫苗和設計合適的免疫接種方案。

參考文獻：

[1] 陳溥言.家畜傳染病學（第五版）[M].北京：中國農業出版社，2006.

[2] SHEN Y，HU W，WEI Y，et al. Effects of mycoplasma hyopneumoniae on porcine nasal cavity dendritic cells[J].Vet Microbiol，2017，198：1-8.

[3] RUIZ A，GALINA L，PIJOAN C. Mycoplasma hyopneumoniae colonization of pigs sired by different boars[J].Can J Vet Res， 2002，66（2）：79-85.

[4] 張? 旭，白方方，武昱孜，等.PCR技術檢測豬肺炎支原體的研究進展[J].生物技術通報，2012（5）：54-60.

[5] 肖國生，曹三杰，黃小波，等.豬肺炎支原體檢測芯片的研制及初步應用[J].中國預防獸醫學報，2008（1）：57-63.

[6] 蘇國東，劉茂軍，周勇岐，等.豬支原體肺炎活疫苗（168株）的免疫效力研究[J].中國獸藥雜志，2012，46（9）：4-6，14.