卵巢癌患者SOD、Hcy和CA125的變化及與臨床病理參數的相關性研究

曹修娥，欒 芳，劉義慶，高 華，張炳昌△,趙躍然

(山東大學附屬省立醫院：1.臨床醫學檢驗部；2.中心實驗室，山東濟南 250021)

卵巢癌在所有婦科惡性腫瘤中病死率最高，90%是上皮細胞癌，在我國的發病率逐年上升，成為危害女性健康的三大婦科腫瘤之一，在我國預計2015年卵巢癌的發病數達52 100例，死亡22 500例[1]。由于早期卵巢癌一般不具備典型的癥狀和體征，因此不會被患者覺察，多數患者發覺腫塊就診經影像學檢查確診時已處于晚期，往往延誤了早期診斷和最佳治療時期，所以，惡性腫瘤的早發現、早治療是臨床腫瘤防治的關鍵環節。眾所周知，傳統的腫瘤標志物腫瘤相關抗原125(CA125)在卵巢癌的診斷中發揮了極其重要的作用，但存在很多局限性，如在早期診斷的靈敏度、特異度也較低等[2]，另外CA125還受排卵、子宮內膜異位癥等因素影響而導致假陽性。超氧化物歧化酶(SOD)是一類廣泛存在于生物體內的金屬酶，是清除超氧陰離子自由基對細胞膜損害的一種重要的抗氧化酶，對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用，保護細胞免受損傷，并維持機體自由基產生和消除間的動態平衡。已有文獻報道，氧自由基產生過多或抗氧體系失衡時，會導致多種疾病的發生[3-4]。當發生腫瘤時，細胞產生超氧陰離子的速度增快，過度消耗SOD，使有活性的SOD比例降低[5-6]。同型半胱氨酸(Hcy)是甲硫氨酸的中間代謝產物，為非蛋白質氨基酸，本身不參與蛋白質的合成。大量研究表明，Hcy參與動脈粥樣硬化的發生和發展，其水平升高是冠心病、腦卒中、深靜脈血栓和阿爾茨海默病的獨立危險因素[7-9]。近年來，有報道顯示，部分腫瘤性疾病患者血清Hcy水平異常，認為其可能參與腫瘤的發生和發展[10]。由于單項標志物特異度和靈敏度較低，不能滿足臨床需要，多標志物聯合檢測可以提高診斷的靈敏度和特異度，有利于臨床醫生對疾病的早期診斷和治療。本文選擇了SOD、Hcy、CA125，聯合用于對卵巢癌術前、術后及不同病理分期中血清水平的變化進行分析，為卵巢癌的術前診斷及術后監測提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取山東大學附屬省立醫院2017年10月至2018年5月診斷的住院卵巢癌患者，所有病例均經手術后組織病理確診，共計180例(卵巢癌組)，22～83 歲，平均(54.8±11.2)歲；卵巢良性疾病患者184例(卵巢良性疾病組)，23～80 歲，平均(50.6±11.5)歲；選擇同期本院體檢中心的155例體檢健康人員作為健康對照組，25～87歲，平均(52.7±13.8)歲；年齡、性別與疾病組相匹配，并進行病史詢問和體格檢查排除腫瘤疾病史。本研究經過山東大學附屬山東省立醫院倫理委員會審核，所有患者或家屬均簽署了知情同意書。

1.2儀器與試劑 Beckman AU5800全自動生化分析儀；羅氏Cobas 8000電化學發光分析儀。SOD檢測試劑盒為福建福緣生物科技有限公司生產的SOD試劑盒；Hcy為浙江東歐生物技術有限公司生產的Hcy試劑盒。

1.3方法

1.3.1標本采集 清晨采集受試者空腹靜脈血3 mL，室溫自然凝固后3 200 r/min離心12 min，分離并吸取上層血清，立即上機檢測或于-20 ℃冰箱中保存待測。

1.3.2檢測步驟 校準：SOD試劑盒配套的校準品，Hcy試劑盒配套的校準品，CA125試劑盒配套的校準品，每開啟一批新的試劑都進行校準；質控：昆淶復合質控品，每天檢測兩個濃度的質控品，采用13s、22s和R4s質控規則。質控在控，進行樣品檢測。樣品檢測：SOD、Hcy采用酶法在AU5800全自動生化分析儀上檢測；CA125采用電化學發光法在羅氏Cobas 8000電化學發光分析儀上檢測。

1.4統計學處理 采用SPSS17.0統計軟件進行數據分析。計量數據因不滿足正態性，用M(P25，P75)表示，多組間比較采用Kruskal-Wsllis 非參數檢驗，兩組間比較采用Mann-Whitney 秩和檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1SOD、Hcy、CA125檢測結果在各組中的分布 3組SOD、Hcy、CA125比較差異均有統計學意義(χ2=235.10、48.56、306.98，P<0.05)。進一步兩兩比較，卵巢癌患者血清SOD水平顯著低于卵巢良性疾病組和健康對照組，差異有統計學意義(Z值分別為-12.11、-13.68、-4.16，P<0.05)；Hcy和CA125水平顯著高于良性疾病組和健康對照組，差異有統計學意義(Z值分別為-4.63、-6.61、-2.53、-14.12、-7.22、-14.36，P<0.05)。見表1。

2.2卵巢癌患者術前、術后血清SOD、Hcy、CA125變化 卵巢癌術后患者SOD、Hcy、CA125水平顯著低于術前，差異有統計學意義(Z值分別為-6.92、-6.22、-9.01，P<0.05)。見表2。

2.3卵巢癌不同病理分期血清SOD、Hcy、CA125變化 血清SOD水平在不同病理分期間比較差異有統計學意義(χ2=13.48，P=0.004)，進一步兩兩比較發現，Ⅰ期與Ⅲ期、Ⅳ期SOD水平比較差異有統計學意義(Z=-3.45、-3.04，P=0.001、0.002)；血清CA125水平在不同分期間比較差異有統計學意義(χ2=25.69，P<0.05)，進一步兩兩比較顯示，Ⅰ期與Ⅲ期、Ⅳ期及Ⅱ期與Ⅲ期、Ⅳ期間CA125水平比較差異有統計學意義(Z值分別為-4.42、-3.33、-2.76、-2.21，P=0.001、0.001、0.006、0.027)；血清Hcy水平在不同分期間比較差異有統計學意義(χ2=29.17，P<0.05)，進一步兩兩比較后發現，Ⅰ期與Ⅳ期及Ⅲ期與Ⅳ期間Hcy水平比較差異有統計學意義(Z值分別為-2.34、-2.13，P=0.019、0.033)。見表3。

表1 各組血清SOD、Hcy、CA125檢測結果比較[M(P25，P75)]

注：*P<0.05，與健康對照組比較；#P<0.05，與卵巢良性疾病組比較

表2 血清SOD、Hcy、CA125在卵巢癌術前、術后結果比較[M(P25，P75)]

注：*P<0.05，與健康對照組比較；#P<0.05，與術前比較

表3 血清SOD、Hcy、CA125在卵巢癌不同病理分期結果比較[M(P25，P75)]

注：*P<0.05，與健康對照組比較；#P<0.05，與Ⅳ期比較；△P<0.05，與Ⅲ期比較

3 討 論

近年來，科技突飛猛進的同時也隨之出現很多不良因素，環境嚴重污染、個人不健康的生活方式等因素再加上中國老齡化進程的加快，使中國癌癥總體發病率和病死率呈現上升趨勢[11]。卵巢癌是女性生殖系統惡性腫瘤中病死率最高的疾病，且早期癥狀不明顯，又缺乏特異度和靈敏度均較高的早期診斷方法。可溶性標志物指存在于體液中的生物標志物，因其具有創傷小、檢測快速簡便、花費低等優點，因此在腫瘤的早期診斷、檢測治療效果等方面具有潛在的價值。

SOD是一種源于生命體的活性物質，能消除生物體在新陳代謝過程中產生的有害物質。超氧陰離子自由基具有細胞毒性，可使脂質過氧化，損傷細胞膜，引起炎癥、腫瘤和自身免疫病等多種疾病，SOD是氧自由基的清除劑，催化體內超氧陰離子的歧化反應，清除超氧陰離子、對抗細胞的氧化損傷，從而保護機體免受氧自由基侵害，避免疾病的發生[12]。當機體處于病理狀態時，體內需消耗較多的SOD來清除產生的過量的氧自由基，來保護細胞及組織免受損傷。近年來，關于SOD與腫瘤的關系國內外已有報道，腫瘤患者存在血清SOD水平降低或活性下降[13-14]。本文研究了SOD與卵巢癌的關系，結果表明，卵巢癌患者血清SOD水平顯著低于卵巢良性疾病組和健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，其降低的機制可能就是在癌細胞中，產生超氧陰離子的速度增快，使得機體需要消耗更多的SOD來對抗、清除超氧陰離子。另外，本研究通過檢測不同分期的卵巢癌血清SOD水平來分析其與卵巢癌病理分期的關系。本研究顯示，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期卵巢癌患者血清中SOD水平均顯著低于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅲ期、Ⅳ期血清SOD水平顯著低于Ⅰ期，差異有統計學意義(P=0.001、0.002)，且分期越高，SOD水平越低，可能是由于分期越高，腫瘤細胞產生的超氧陰離子越多，對細胞損傷越嚴重，從而機體需要消耗更多的SOD清除超氧陰離子自由基對細胞膜的損害。因此，SOD在一定程度上反映了卵巢癌患者的分期。

Hcy是蛋氨酸代謝過程中的中間產物，有細胞內的蛋氨酸脫甲基而成，代謝過程需要葉酸、維生素B12輔酶的參與，它含有的自由巰基可以發揮重要的生理作用[15]。Hcy的生物學功能主要有：(1)必需氨基酸蛋氨酸的儲存形式；(2)形成半胱氨酸的前體；(3)與機體的甲基化反應密切相關。目前關于Hcy研究較多的是，Hcy參與動脈粥樣硬化的發生和發展，其水平升高是冠心病、腦卒中、深靜脈血栓和阿爾茨海默病的獨立危險因素，亦有報道顯示，部分腫瘤性疾病患者血清Hcy水平異常[10]，但是，關于卵巢癌患者不同病理分期及術前、術后血清Hcy水平變化的報道罕見，因此，本文研究了卵巢癌患者血清中的Hcy變化來分析其在卵巢癌診斷中的價值。本文發現，卵巢癌患者血清中Hcy水平顯著高于卵巢良性疾病組和健康對照組,差異有統計學意義(P<0.05)，其升高的機制可能與葉酸、維生素B12的缺乏有關，另一方面可能是Hcy代謝中間產物S-腺苷蛋氨酸通過水平變化抑制5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶和促進胱硫醚β合成酶來調節細胞內Hcy水平。另外，本文還發現，卵巢癌術后患者血清Hcy水平顯著低于術前和健康對照組,差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期卵巢癌血清中Hcy水平顯著高于健康對照組,差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅰ期、Ⅲ期Hcy水平顯著低于Ⅳ期，差異有統計學意義(P=0.019、0.033)，由不同分期中Hcy的檢測結果看出，分期越高其水平越高，這可能是由Hcy代謝中相關酶的缺陷引起的，具體的機制有待進一步研究。由本研究發現，Hcy不僅可以作為卵巢良惡性腫瘤的鑒別指標及術后的監測指標，其還與腫瘤分期密切相關，可以反應卵巢癌患者的分期情況。

CA125作為診斷卵巢癌的傳統腫瘤標志物，仍然是較為常用的指標。通過檢測，本文也發現了，卵巢癌患者血清中CA125水平顯著高于卵巢良性疾病組和健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；術后患者血清CA125水平顯著低于術前和健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期卵巢癌患者血清中CA125水平顯著高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅲ期卵巢癌患者血清CA125水平顯著高于Ⅰ期和Ⅱ期，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅳ期卵巢癌患者血清水平顯著高于Ⅰ期、Ⅱ期，差異有統計學意義(P=0.001、0.027)，分期越高，血清CA125水平越高。

4 結 論

血清SOD、Hcy與傳統的腫瘤標志物CA125相結合用于卵巢癌的術前診斷和術后監測，由于二者與CA125相比具有實驗操作自動化程度高、靈敏度高、試劑費用低廉、簡便易行等優點，因此作為高危人群卵巢癌篩查和卵巢癌患者病情監測的又一種新選擇。另外，聯合檢測3個指標在不同病理分期間水平的變化能彌補單個指標的不足，可以更全面的了解病情、反應患者的疾病狀況，為臨床診斷和治療提供重要的參考價值。