長期高頻血小板獻血者凝血功能及健康狀況變化研究

張玉忠，欒 鹢

(1.內鄉縣人民醫院血庫,河南南陽 474350；2.南陽市中心血站,河南南陽 473000)

血小板輸注是目前預防和治療因血小板數量減少或者功能異常所致出血的重要手段，臨床對單采血小板需求量較大[1]。2011年，原衛生部頒布《獻血者健康檢查要求》[2]將單采血小板最短間隔時間縮短為2周，不大于24次/年，不少固定獻血者長期以最大頻率捐獻血小板。枸櫞酸鹽在人體內代謝快，大量應用于尿毒癥終末期患者血液透析，安全性已得到證實[3]，而單采血小板枸櫞酸鹽抗凝劑(ACD)回輸量遠低于血液透析，故長期血小板捐獻者健康狀況研究應注重血小板、造血生長因子及血漿蛋白能否穩定再升[4]。但國內相關研究較少，國家相關規定中對單采后凝血狀態的監測亦幾乎為零。為此，筆者研究了南陽市中心血站60位長期以2周/次頻率進行血小板捐獻者的凝血功能及健康狀況，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年2月至2018年6月在南陽市中心血站以最高頻率(2周/次)連續捐獻血小板≥24次的捐獻者60例作為研究對象。其中男53例，女7例，中位年齡是27.5歲(21～45歲)。所有血小板捐獻者均簽署知情同意書。納入標準：(1)符合《獻血者健康檢查要求》(GB18467-2011)；(2)每兩周進行1次單采血小板捐獻，且每次捐獻量為2 U。排除標準：(1)中途因任何原因中斷捐獻3周以上者；(2)因任何疾病不滿足獻血者健康要求者。

1.2檢測指標方法 所有捐獻者首次捐獻血小板后(第1次檢測)及連續單采血小板(Amicus血細胞分離機-德國Fresenius Kabi公司生產)達6次(第2次檢測)、12次(第3次檢測)、24次(第4次檢測)后休息10 min，于對側手臂采集乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血2 mL和枸櫞酸鈉抗凝血2 mL，于血小板采集24 h后采集生化促凝血2 mL，血樣采集后1 h內上機檢測，所有檢測均嚴格按照相應操作規程進行。

1.2.1血常規和生化檢測 血常規使用日本希森美康血細胞計數儀(KX-21)進行檢測，主要統計血紅蛋白(Hb)、血細胞壓積(Hct)、紅細胞(RBC)、平均紅細胞容積(MCV)、紅細胞分布寬度(RDW)、血小板(Plt)、平均血小板容積(MPV)及血小板分布寬度(PDW)。生化檢測指標為促血小板生成素(TPO)、葉酸及清蛋白(Alb)，其中Alb使用AU-400全自動生化分析儀檢測，TPO和葉酸使用瑞士FAME全自動酶聯免疫分析系統檢測，試劑購自上海酶聯生物科技有限公司。

1.2.2血栓彈力圖(TEG) TEG使用重慶鼎潤公司生產的血栓彈力圖儀及其配套試劑檢測。取枸櫞酸鈉抗凝血1 mL與高嶺土混勻，室溫孵育4 min后，取340 μL血樣與20 μL CaCl2在檢測杯中混勻，上機檢測，記錄TEG圖像和參考值。主要分析凝血反應時間(R)、K值、α角、最大振幅(MA)和綜合凝血指數(CI)等5個參數。

2 結 果

2.1血常規 4次血小板采集后Hct、MPV及PDW指標比較，差異有統計學意義(P<0.05)，其中第3次Hct、MPV及PDW和第4次MPV顯著低于第1次，差異有統計學意義(P<0.05)；而4次檢測Hb、RBC、MCV、RDW和Plt指標間比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2生化指標 4次血小板采集后TPO指標比較差異有統計學意義(P<0.05)，其中第3次和第4次顯著低于第1次，差異有統計學意義(P<0.05)；而4次檢測葉酸和Alb指標間比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表1 4次血小板捐獻后血常規指標比較±s)

注：與第1次比較,*P<0.05

表2 4次血小板捐獻后生化指標比較±s)

注：與第1次比較，*P<0.05

表3 4次血小板捐獻后TEG指標比較±s)

注：與第1次比較，*P<0.05

2.3TEG指標 4次血小板采集后K值、α角及MA指標比較差異有統計學意義(P<0.05)，其中第3次K值、α角及MA均顯著低于第1次，差異有統計學意義(P<0.05)；而4次檢測R和CI指標間比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

3 討 論

《獻血者健康檢查要求》定義：歷史獻血3次以上，且1年內有獻血經歷者為固定獻血者[2]。國內外統計資料顯示[5-6]，固定獻血者是各血站血液資源的主要來源，占比可達90%以上。ACD在體內代謝時間小于15 min，已經廣泛應用于尿毒癥終末期患者血液透析，被證明是安全可靠的[7]。由于血液透析需處理全身血液，而每次單采血小板血液處理量僅400～1 000 mL[8]，且尿毒癥患者透析頻率遠高于2周/次，故單采血小板ACD回輸量遠小于血液透析。所以，筆者認為長期血小板捐獻者主要危害不在于ACD回輸，而在于血小板及血漿蛋白的丟失，在于血小板、造血生長因子及血漿蛋白能否持續再升并維持穩定。

戴宇東等[9]報道長期固定血小板捐獻會造成骨髓巨核細胞顯著增加、血小板生成能力增強。自規定獻血頻率提高以來，雖未出現如高凝狀態腦血管栓塞等單采血小板相關的嚴重不良事件，但國內在長期固定獻血者凝血及健康狀況變化研究仍不夠全面[10]。相關研究多從歷史血小板捐獻次數進行分析，未考慮近期捐獻頻率[11-12]。本文所有研究對象均以2周/次的最高頻率捐獻血小板，血常規結果顯示，第3次Hct、MPV及PDW和第4次MPV顯著低于第1次，差異有統計學意義(P<0.05)，提示高頻捐獻血小板對血小板形態影響較大，在堅持半年左右的捐獻者中尤為顯著。第4次除MPV值外，其余指標與第1次間比較差異均無統計學意義(P>0.05)，提示血細胞數量、形態在堅持高頻血小板捐獻1年后基本耐受而恢復正常。這與AKAY等[13]的結論類似。

研究指出，長期單采血小板捐獻者血清鐵隨著血小板捐獻次數的增多而減少[14]。葉酸是合成血細胞的原料，Alb是血漿營養蛋白，TPO可促進血小板生成，3種物質均為消耗性原料，即隨著合成物質增多而減少，故本研究將樣本采集時間定為血小板捐獻后24 h。結果顯示，4次檢測葉酸和Alb指標間比較差異無統計學意義(P>0.05)，而第3次和第4次TPO指標顯著低于第1次，差異有統計學意義(P<0.05)，但均在正常范圍內，與CABLE等[15]研究結果類似。提示，持續高頻血小板捐獻半年以上者，TPO可顯著降低。第4次TPO高于第3次，但差異無統計學意義(P>0.05)。可能由于是1年以上捐獻者機體耐受，TPO逐漸恢復至初次捐獻水平；或長期捐獻者TPO將穩定維持在更低水平，但這有待進一步研究驗證[16]。

K值延長提示纖維蛋白原缺乏，α角減小提示纖維蛋白原缺乏，MA值降低提示PLT聚集功能不足或數量降低[17]。TEG結果顯示，單采血小板12次后K值、α角及MA均顯著低于第1次，差異有統計學意義(P<0.05)，但仍在正常參考范圍內。提示高頻血小板捐獻半年以上者凝血功能有所減弱，但尚無出血或血栓風險，是安全可控的。這與馮晴等[11]的研究結論一致。

綜上所述，1年內未觀察到每兩周單采血小板2 U的捐獻者出血或血栓風險，健康狀況良好，但捐獻者TPO水平仍需進一步研究。