紫癜性腎炎患者HP感染與Th17/Treg失衡臨床分析

王文龍，郭漂漂，陳夢潔，陳 疊，程勇軍

(溫嶺市第一人民醫(yī)院 ,浙江 溫嶺 317500)

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,HP)感染后機體免疫應(yīng)答處于失衡狀態(tài)[1]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，Thl7及其效應(yīng)因子IL-17在HP感染的免疫應(yīng)答中主要發(fā)揮促炎作用，而調(diào)節(jié)性T細胞(Regulatory T cells，Treg)主要發(fā)揮免疫抑制作用，Thl7/Treg比例失衡可能是HP導(dǎo)致機體免疫應(yīng)答失衡的重要原因[2]。過敏性紫癜性腎炎(henoch schonlein purpura nephritis，HSPN)患者HP感染率明顯升高[3]，HP感染與HSPN的關(guān)系是近年來研究的熱點。據(jù)報道，HSPN患者也存在Thl7/Treg比例失衡[4]，HP感染是否是HSPN患者Thl7/Treg比例失衡的原因，目前尚不清楚。本研究探討HSPN患者HP感染與Th17/Treg失衡的關(guān)系，為進一步解釋HP感染與HSPN的關(guān)系提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2013年2月至2017年12月在我院就診經(jīng)腎臟病理活檢確診的HSPN患者為研究對象。納入標準：(1)經(jīng)光鏡、免疫熒光及電鏡確診為HSPN；(2)尚未經(jīng)過治療；(3)簽署知情同意書并積極配合試驗。排除標準：(1)合并消化性潰瘍；(2)合并高血壓、糖尿病、臟器功能不全、惡性腫瘤、自身免疫性疾病及感染性疾病；(3)已經(jīng)藥物治療；(4)妊娠或哺乳婦女。

1.2 方法

1.2.1 標本采集及指標檢測 清晨空腹采靜脈血10mL，其中5mL3000r/min 離心15min，分離血清，置于-80℃冰箱保存，用于檢測血白蛋白和血肌酐；3mL加入肝素鈉抗凝試管A，采用流式細胞術(shù)的三色熒光標記法檢測Thl7細胞、Treg細胞(試劑盒由美國BD公司提供)；2mL加入試管B，采用ELISA法檢測IL-17、TGF-β1表達(試劑盒由上海博湖生物科技發(fā)展有限公司提供)。24h尿蛋白定量采用磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法檢測。

1.2.2 13C-尿素呼氣試驗(13C-urea breath test，13C-UBT) (1)患者空腹10h以上留取第1次呼氣樣本；(2)飲入含有75mg 13C-尿素的溶液100mL，并開始計時；(3)至30 min漱口后留取第2次呼氣樣本；(4)患者在30 min間歇期內(nèi)需左側(cè)臥位平躺于檢查床上；(5)2次呼氣樣本采集時體位均保持端坐位；(6)呼氣樣本及時置于同位素質(zhì)譜儀進行檢測分析。13C-UBT監(jiān)測值≥分界值定義為HP感染，反之，定義為非HP感染。

1.2.3 分組 根據(jù)是否存在HP感染，分為HP感染組和非HP感染組。根據(jù)《紫癜性腎炎診治循證指南》[5]，結(jié)合病理類型、理化檢查等給予激素、免疫抑制劑等治療，若血壓耐受，均給予血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)或血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑(ARB)輔助治療，根據(jù)病情，給予利尿等對癥治療。HP感染組給予2周標準四聯(lián)HP根治治療(質(zhì)子泵抑制劑+克拉霉素+阿莫西林+枸椽酸鉍)。比較2組治療前后1個月 Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1的變化。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 15.0 統(tǒng)計學(xué)軟件，計量資料組間比較采用配對t檢驗；計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 紫癜性腎炎患者HP感染情況

65例HSPN患者中43例存在HP感染，感染率為66.15%。

2.2 HP感染組和非HP感染組一般情況比較

2組年齡、性別、病程、病理分期、24h尿蛋白定量、血白蛋白和血肌酐比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 HP感染組和非HP感染組一般情況比較

2.3 治療前HP感染組和非HP感染組Th17/Treg及IL-17、TGFβ1比較

HP感染組Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1顯著高于非HP感染組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；HP感染組Treg顯著低于非HP感染組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 治療前HP感染組和非HP感染組Th17/Treg失衡及IL-17、TGFβ1比較

2.4 2組治療前后Th17/Treg失衡及IL-17、TGFβ1比較

經(jīng)配對t檢驗，HP感染組治療后Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1顯著低于同組治療前，HP感染組治療后Treg顯著高于同組治療前，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；非HP感染組治療前后Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1、Treg比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 2組治療前后Th17/Treg失衡及IL-17、TGFβ1比較

nIL-17(ng/L)tPTGFβ1(μg/L)tPHP感染組治療前治療后434327.78±9.9423.42±8.142.2250.0312.11±0.762.52±0.88-2.3120.026非HP感染組治療前治療后222220.44±8.5719.56±8.240.3470.7322.68±0.962.58±0.890.3580.724

3 討論

雖然目前研究提示HP感染可能參與了HSPN的發(fā)病，但具體機制尚不清楚。研究[6]發(fā)現(xiàn)，HP感染參與了機體免疫損傷。近年來研究發(fā)現(xiàn)，Thl7及其效應(yīng)因子IL-17在HP感染的免疫應(yīng)答中主要發(fā)揮促炎作用，而Treg主要發(fā)揮免疫抑制作用，Thl7/Treg比例失衡可能是HP導(dǎo)致機體免疫應(yīng)答失衡的重要原因[2，6]。本研究發(fā)現(xiàn)，在HSPN患者中，HP感染組Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1顯著高于非HP感染組，Treg顯著高于非HP感染組，提示HP感染在HSPN患者中同樣可以導(dǎo)致免疫紊亂，表現(xiàn)為Th17/Treg比例失衡。

HSPN發(fā)病機制尚不完全明確，免疫紊亂為其原因之一。文獻報道Th17和Treg及其相關(guān)因子的免疫失衡與多種免疫性疾病及腎臟疾病有關(guān)[7]。張建江等[8]研究發(fā)現(xiàn)，兒童過敏性紫癜患者，尤其是兒童HSPN患者存在明顯的Th17/Treg失衡，提示Th17/Treg失衡與HSPN具有顯著相關(guān)性。既然HSPN患者存在Th17/Treg比例失衡，而HP感染可以導(dǎo)致Th17/Treg比例失衡，那么，HP感染是否通過誘發(fā)Th17/Treg比例失衡而導(dǎo)致HSPN呢？目前尚不清楚。本研究通過抗HP治療，發(fā)現(xiàn)HP感染組治療后Th17、Th17/Treg、IL-17、TGFβ1顯著低于同組治療前，HP感染組治療后Treg顯著高于同組治療前，但非HP感染組Th17/Treg無顯著變化，故本研究提示HP感染參與了Th17/Treg比例失衡，這可能為其導(dǎo)致HSPN的重要原因之一。

綜上所述，HSPN患者具有較高的HP感染率，HP感染可能通過導(dǎo)致Th17/Treg失衡而成為引發(fā)HSPN的誘因之一。抗HP治療有助于改善HSPN患者Th17/Treg失衡。然而，本研究為單中心研究，病例數(shù)不多，尚需進行多中心、大樣本研究加以證實。