高危型HPV感染與宮頸癌前病變及宮頸癌的相關性研究

方 莉,韓 瑜,許 媛，陳 瑩，鄭 陽

(1.川北醫學院附屬醫院 檢驗科，四川 南充637000；2.川北醫學院 醫學檢驗系，四川 南充637000)

宮頸癌嚴重威脅人類的健康，至今仍是全球女性生殖系統最常見的惡性腫瘤，發病率僅次于乳腺癌，全球每年約有9%的女性新發癌癥病例為宮頸癌，約有8%的女性癌癥患者死于該病[1]。人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一種具有高度宿主特異性噬上皮細胞的病毒，人類是其唯一宿主。目前已經發現了100多種HPV基因型，其中至少有40多種基因型主要侵襲生殖道。根據其導致的病變程度，可將其分為高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82等)和低危型(HPV6，11，42，43，44，53，61等)[2]。據Tommasion M等人研究顯示[3]：高危型人乳頭瘤病毒持續侵襲宮頸上皮細胞是引起宮頸病變的必要條件，其中HPV16是最常見的型別。本研究通過分析高危型HPV-DNA在宮頸上皮內瘤變(CINI、CINII、CINIII)及宮頸癌中的分布情況，來探討高危型HPV持續感染與宮頸癌的關系。

1 資料與方法

1.1 研究對象

收集2015年6月至2016年3月來我院婦科就診的313名宮頸病變患者的標本，患者年齡在22-79歲，平均年齡為40.15±8.95 歲 ，均有性生活史，均無相關手術史。按宮頸病變程度分為4組，其中CINI 66例、CINII 53例、CINIII 76例、宮頸癌118例。

1.2 實驗方法

1.2.1宮頸脫落細胞采集 用宮頸取樣器刷取宮頸病灶處脫落細胞，置于無菌玻璃管，密封送檢。

1.2.2檢驗方法

檢測型別：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、82型。

檢測儀器：SLAN-96P熒光定量PCR檢測系統。

核酸提取：按高危型人乳頭瘤病毒分型核酸測定試劑盒(上海之江生物科技股份有限公司)說明書操作要求進行HPV-DNA提取。

PCR反應體系見表1。

表1 PCR反應體系

PCR反應條件：94 ℃×2 min；93 ℃×10 sec→62 ℃×31 sec,循環40次；單點熒光檢測在62 ℃。

結果判斷：若待檢樣本Ct≤38,且擴增曲線呈典型的S型，則結果判斷為陽性；若為非典型S型曲線，則判為陰性。

1.3 統計學方法

采用SPSS 17.0統計軟件進行分析，數值變量資料使用“均數±標準差”來表示，采用單因素方差分析進行假設檢驗，檢驗水準P<0.05時，差異有統計學意義。

分類變量資料使用“率，構成比”來表示，采用卡方檢驗進行假設檢驗，檢驗水準P<0.05時，差異有統計學意義。

2 結果

2.1 高危型HPV的感染情況

將受檢標本按宮頸病變程度分為4組，其中CINI組66例，CINⅡ組53例，CINⅢ組76例，宮頸癌組118例。各組陽性感染情況見表2。

表2 高危型HPV感染情況

由表2可知CINI組、CINⅡ組、CINⅢ組、宮頸癌組陽性感染率分別為16.67%，60.38%，69.74%，75.42%，χ2=65.77，P<0.01，差異有統計學意義。

2.2 宮頸病變程度與年齡的關系

按年齡區間將受檢者分為21-40歲，41-60歲，61-80歲3組，各年齡組宮頸病變的陽性感染率情況見表3。

表3 宮頸病變的年齡分布情況

由表3可知 CINII,CINIII和宮頸癌組的感染高峰年齡均為41-60歲。根據統計學方法可知:CIN I組P>0.05，差異無統計學意義。CINII、CINIII和宮頸癌組P<0.01，差異有統計學意義。

2.3 宮頸病變患者高危型HPV亞型分布

由表4可知，CINI組共檢出7種HPV高危型，分別為HPV16、18、35、39、52、56、58；癌前病變組(CINII-CINIII)和宮頸癌組共檢出了12種HPV高危型別，分別為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59；CINI組感染率較高的亞型為HPV16(4.55%)、HPV35(3.03%)、HPV58(3.03%),χ2=0.3,P>0.05，差異無統計學意義；癌前病變組感染率較高的亞型為HPV16(31.01%)、HPV58(14.73%)、HPV52(10.85%)，χ2=7.62，P<0.05，差異有統計學意義；宮頸癌組感染率高的亞型為HPV16(47.46%)、HPV18(16.95%)、HPV58(11.86%)、HPV52(5.93%)，χ2=74.16，P<0.05，差異有統計學意義。

表4 宮頸病變高危型HPV分布情況

3 討論

3.1 HPV高危型別在宮頸病變中的感染情況

目前已有足夠研究表明，高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)的持續性感染，是導致宮頸上皮內瘤變及宮頸癌的主要因素[4]。

女性感染HPV 后，絕大多數(80%以上)靠機體免疫力在1-2 年內可自動清除， 只有極少數婦女最終會發展為子宮頸癌。由感染HR-HPV 發展到子宮頸浸潤癌，通常需要8-15 年時間，期間要經過漫長的癌前病變過程[5]，完全可以通過篩查來早期發現和診治宮頸癌。本實驗主要通過分析宮頸病變各階段高危型HPV感染率的情況，來探討高危型HPV與宮頸病變的相關性。由上述結果可知宮頸癌的陽性感染率最高，達到75.42%。從CINI、癌前病變(CINⅡ、CINⅢ)到宮頸癌，隨著宮頸病變的加重，陽性率依次遞增。據劉金鳳等人的調查發現[6]，中國相關文獻Meta分析中調整后宮頸癌HPV感染率82.7%，相比本研究宮頸癌感染率較高。 HPV是最常見的宮頸癌致病因子，大多數的宮頸癌由其造成，其致病力的高低將宮頸癌劃分為高危型和低危型兩大類[7]。而本研究只討論HPV高危型的陽性率，未涉及HPV低危型別的討論。這可能是與相關文獻數據存在出入的原因。

3.2 宮頸病變的年齡分布情況

近年宮頸癌的發病率呈上升且年輕化的趨勢[8]本實驗主要分析年齡因素對宮頸病變的陽性率的影響。由上述結果可知CINI組的檢驗水準P>0.05,差異無統計學意義，即年齡并不是CINI陽性率的影響因素。CINⅡ、CINⅢ和宮頸癌的檢驗水準P<0.01,差異有統計學意義，感染陽性率與年齡有關，感染高峰年齡為41-60歲。分析原因，可能與該年齡段婦女性行為習慣和機體免疫功能等因素有關[9]。

3.3 宮頸病變患者HPV高危型的亞型分布情況

分析表4結果可知：CINI組數據差異無統計學意義，癌前病變組主要感染亞型為HPV16、58、52；宮頸癌組主要感染亞型為HPV16、18、58、52。范潔琳通過研究發現[10]：CINⅡ-CINⅢ患者高危型HPV感染率前三位依次是HPV16(50.94%),HPV58(18.87%),HPV52(13.21%)。與本研究結果基本相符。據烏恩奇等人研究顯示[11]：2013年在我國四川地區的調查顯示，宮頸癌患者中最主要的感染亞型為HPV16 (34.9%),HPV58 (8.3%),HPV 18(4.9%),HPV 52(2.8%)。與本實驗研究結果基本符合，只是58型和18型的比例差別明顯，可能與本實驗中樣本量數據過少有關。

通過研究分析可知：宮頸病變的發生與高危型HPV病毒的感染存在相關性。因此，高危型HPV病毒的篩查對于早期宮頸癌的防治具有重要的意義。