E-鈣黏素和D2-40在腦膜瘤中的表達及病理診斷中的意義

陳 萍 張欽華

(江門市中心醫院病理科 江門 529000)

目前認為腦膜瘤的發生和發展是一個多基因、多因素參與的復雜過程[1～4]。我們通過分析E-鈣黏素和D2-40兩種抗體在不同類型和WHO級別的腦膜來源腫瘤的表達差異，探討其在腦膜來源腫瘤鑒別診斷中的應用價值。

1 材料和方法

1.1 一般資料

收集江門市中心醫院病理科2017年1月～2017年12月手術切除的且病理標本經HE染色確診為腦膜瘤58例患者的石蠟切片和蠟塊。其中，男16例，女42例，年齡10～70歲，平均51歲。對切除的腫瘤組織病理標本行HE染色，按照2016年WHO標準進行診斷、組織學分型和分級，其中良性腦膜瘤(WHO I級)52例，不典型腦膜瘤(WHOII級)4例，惡性腦膜瘤(WHOⅢ級)2例。另取非腫瘤性腦組織10例作對照組。

1.2 免疫組織化學染色

采用EnVision二步法。所用的抗體針對以下抗原：podoplanin(D2-40，北京中杉金橋生物技術有限公司，工作液)，E-鈣黏素抗體為單克隆鼠抗人抗體(I∶50) ，Ki-67(MAB-0129，福州邁新生物技術有限公司，工作液)。

1.3 染色結果判定標準

E-鈣黏素和D2-40的表達均主要定位于腦膜瘤細胞的胞膜或胞質。染色標準如下[5]：(1)染色強度：在高倍鏡下對細胞染色評分，其中無著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；(2)陽性范圍：隨機觀察至少5個具代表性的中倍視野(×200)，將各視野中陽性細胞數的平均百分數作為該切片的陽性細胞百分數，其中<5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分；將上述兩項結果相乘，0分記為(-)，1～2分記為(+)，3～6分記為(++)，>6分記為(+++)。

1.4 統計學分析

SPSS16.0統計軟件，兩項指標比較秩和檢驗，病理分級陽性率比較采用χ2檢驗,相關分析采用等級相關分析，P<0.05表示有統計學意義。

2 結果

2.1 E-鈣黏素和D2-40在不同WHO分級腦膜瘤中的表達情況

從表1可見， WHO I級腦膜瘤92.3%(48/52)，WHOⅡ級25%(1/4)，Ⅲ級0(0/2)，三者的差異有統計學意義(χ2=24.114，P<0.05)；D2-40表達陽性率在WHOI級腦膜瘤中為76.92%(40/52)，Ⅱ級者為0(0/4)，Ⅲ級者為0(0/2)，三者的差異有統計學意義(χ2=14.872，P<0.05)。

表1 不同WHO分級腦膜瘤中E-鈣黏素和D2-40的表達結果

WHO分級例數E-鈣黏素D2-40-++++++陽性例數-++++++陽性例數Ⅰ級5241821948122413340Ⅱ級43100140000Ⅲ級22000020000

2.2 腦膜瘤中E-鈣黏素和D2-40標記程度與Ki-67陽性指數的相關性分析

Ki-67陽性指數(%)在WHOⅠ級腦膜瘤為3.27±1.85，WHOⅡ級腦膜瘤為9.50±1.92，WHOⅢ腦膜瘤為20.00±0.00；E-鈣黏素標記陽性等級與Ki-67陽性指數之間有相關性,(r=- 0.809，P<0.05)，為負相關關系；D2-40標記與Ki-67陽性指數之間存在負相關關系(r=- 0.725，P<0.05)。

2.3 E-鈣黏素和D2-40在腦膜瘤中表達間的相關性分析

采用Spearman等級相關分析發現，E-鈣黏素和D2-40在腦膜瘤中的表達呈正相關關系(r=0.900，P<0.05)。

3 討論

E-鈣黏素是胞外細胞骨架信號傳導通路上的關鍵分子，其結構或數量的改變均會影響到細胞分化和組織形態，E-鈣黏素被認為是腦膜瘤中主要的鈣黏蛋白，調節細胞黏附性在腦膜瘤的發生發展中起重要作用，E-鈣黏素的基因表達及基因多態性都在腦膜瘤中有所改變[6]。D2-40 是一種間充質標記物，見于人類大腦中的胎兒發育，包括腦膜和淋巴管內皮[7]。在高級別腦膜瘤中，D2-40不參與介導轉錄因子導致的E-鈣黏素表達水平的下降[8]。

研究發現E-鈣黏素、D2-40在不同病理類型腦膜瘤中存在差異表達，隨著腦膜瘤病理分級的增加，E-鈣黏素和D2-40的陽性率均有所下降，在惡性腦膜瘤(WHOⅢ級)中E-鈣黏素和D2-40的表達甚至呈陰性，提示E-鈣黏素和D2-40的表達水平下降甚至缺失與高級別腦膜瘤發生存在密切聯系。同時研究發現E-鈣黏素和D2-40在腦膜瘤中的表達呈正相關關系，提示E-鈣黏素和D2-40可能共同參與介導腦膜瘤發生發展進程，因此E-鈣黏素和D2-40聯合檢測在指導腦膜瘤的病理診斷中具有十分重要的意義。

綜上所述，研究證實E-鈣黏素和D2-40兩種抗體在腦膜瘤診斷方面顯示了很好的應用價值，希望為病理科醫師的臨床診斷工作提供一些幫助。