李娟娟 陳晨 張利偉 李妍
缺血-再灌注損傷(ischemia reperfusion injury,IRI)發生于多種視網膜血管性疾病,對其研究一直是眼底病領域的熱點及難點。近年來發現IRI主要經歷以下過程:急性缺血后的組織損傷出現大量細胞壞死,之后進入延遲損傷期,這個損傷階段可以持續數天甚至數周,以典型的微循環損傷帶來的組織水腫和炎癥反應為特征[1]。因此,減少后期血管損傷是治療IRI性疾病的關鍵環節。小膠質細胞在IRI微循環損傷中發揮了重要的作用,Ebneter等[2]研究發現,在采用激光誘導視網膜靜脈阻塞的動物模型中,阻塞血管周圍活化小膠質細胞的密度明顯增加。Jolivel等[3]在腦部IRI模型中觀察到活化的小膠質細胞可以直接吞噬血管內皮細胞,而造成血管結構的直接損傷。但在視網膜缺血再灌注損傷(retinal ischemia reperfusion injury,RIRI)的動物模型中,活化的小膠質細胞是否對視網膜微循環產生破壞作用,目前報道尚少。本研究建立小鼠RIRI動物模型,檢測不同時相活化小膠質細胞的數量、形態、分布情況的變化,探討活化小膠質細胞在RIRI中與微循環的關系及作用機制。
1.1 實驗動物及分組健康C57BL/6雄性小鼠160只,周齡4~5周,體質量25~28 g,實驗前排除眼部異常。實驗動物由昆明醫科大學動物科提供,實驗動物及實驗條件均符合《實驗動物管理條例》。實驗前檢查雙眼前節和眼底均正常。小鼠左眼不作處理作為正常對照組;右眼建立RIRI模型為RIRI組,RIRI組再分為RIRI后24 h組、48 h組及72 h組,進行RIRI組與正常對照組、RIRI不同時間點組之間比較。
1.2 主要試劑和儀器胎牛血清(美國Gibco公司);……