CA125、HE4、β-HCG和AMH聯(lián)合檢測在卵巢癌早期診斷中的應(yīng)用價(jià)值*

林麗淑,任 溪,陳 睿,龍韻洪,王革非

(1.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室,廣東汕頭 515041；2.深圳市福田區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東深圳 518049；3.深圳市婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣東深圳 518017)

卵巢惡性腫瘤是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌，位列第3位，但卵巢上皮癌病死率卻占各類婦科腫瘤首位[1]。晚期卵巢癌生存率小于30%，早期卵巢癌通過傳統(tǒng)治療手段化療5年生存率達(dá)90%[2-3]，但早期卵巢癌沒有明顯的臨床癥狀及有效的早期篩查手段，只有25%的卵巢癌能夠被早期診斷[4]。因此，提高卵巢癌的早期診斷效能是改善患者生存質(zhì)量重要且有效的措施。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年1月至2018年2月深圳市福田區(qū)第二人民醫(yī)院收治的確診卵巢癌患者43例為惡性組，年齡25～70歲，平均46.8歲；良性卵巢腫瘤患者33例為良性組，年齡24～63歲，平均43.0歲；同期選取體檢健康女性47例為對照組，年齡22～74歲，平均43.6歲。3組年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 所有研究對象均排除服用影響糖類抗原125(CA125)、人附睪蛋白4(HE4)、β-人絨毛膜促性腺激素(β-HCG)、人類抗繆勒氏管激素(AMH)檢測的含異嗜性抗體藥物，空腹抽血3 mL于未加抗凝劑的干燥管中，室溫靜置30 min后，3 000 r/min離心5 min后上機(jī)檢測，抽血后8 h內(nèi)未能及時(shí)上機(jī)檢測的血清標(biāo)本置-80 ℃冰箱保存。

1.2.2儀器與試劑 CA125、β-HCG和AMH檢測系統(tǒng)為貝克曼DXI800全自動化學(xué)發(fā)光儀，使用貝克曼公司原裝標(biāo)準(zhǔn)品及試劑；HE4檢測系統(tǒng)為羅氏Cobas8000全自動生化分析儀，使用羅氏公司原裝標(biāo)準(zhǔn)品及試劑。

1.2.3標(biāo)本檢測 使用美國伯樂公司提供的CA125、β-HCG質(zhì)控品,羅氏公司提供的HE4質(zhì)控品,美國貝克曼公司提供的AMH質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，在室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下，嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程及試劑說明書檢測CA125、HE4、β-HCG和AMH水平。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，資料為偏態(tài)分布，各項(xiàng)指標(biāo)用中位數(shù)與四分位數(shù)描述[M(P25～P75)]，組間比較采用非參數(shù)Mann-Whitney檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.13組各項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)比較 與對照組相比，良性組CA125、HE4水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，AMH和β-HCG水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，惡性組CA125、HE4、β-HCG水平均明顯升高，AMH明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；良性組與惡性組相比，CA125、HE4、AMH和β-HCG水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組各項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)比較[M(P25～P75)]

注：Z1、P1表示對照組與良性組比較；Z2、P2表示對照組與惡性組比較；Z3、P3表示良性組與惡性組比較

2.2各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測在卵巢癌診斷中的診斷性能分析 診斷卵巢癌,HE4單獨(dú)檢測的受試者工作特征曲線(ROC曲線)下面積(AUC)最高(0.91)，其次依次為CA125(0.80)、AMH(0.77)、β-HCG(0.74)。 CA125、HE4、AMH 3個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測的AUC與CA125、HE4、AMH、β-HCG 4個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測一致(0.95)，CA125、HE4聯(lián)合檢測的AUC同CA125、 HE4、β-HCG聯(lián)合診斷一致(0.91)。見表2和圖1。診斷卵巢癌,β-HCG單獨(dú)檢測的靈敏度最高(86.0%)，其次依次為HE4(83.7%)、CA125(69.8%)、AMH(57.4%)。 CA125單獨(dú)檢測的特異度最高(91.5%)，其次依次為AMH(88.4%)、HE4(83.0%)、β-HCG(66.0%)。陽性預(yù)測值CA125最高(88.2%)。陰性預(yù)測值CA125、HE4、AMH聯(lián)合檢測最高(97.5%)，同CA125、HE4、AMH、β-HCG聯(lián)合檢測一致。見表3。

表2 單獨(dú)和聯(lián)合檢測診斷卵巢癌的價(jià)值

圖1 單項(xiàng)和聯(lián)合檢測診斷卵巢癌的ROC曲線

檢測方法靈敏度特異度陽性預(yù)測值陰性預(yù)測值CA12569.891.588.276.8HE483.783.081.884.8β-HCG86.066.069.883.8AMH57.488.481.969.4CA125、HE486.085.184.187.0CA125、HE4、β-HCG86.085.184.187.0CA125、HE4、AMH97.783.084.097.5CA125、HE4、AMH、β-HCG97.783.084.097.5

3 討 論

CA125是卵巢上皮類癌的相關(guān)抗原，作為最廣泛應(yīng)用于卵巢癌診斷的血清標(biāo)志物，升高見于80%卵巢上皮癌[5]，對早期卵巢癌有較高特異度，已證實(shí)其血清檢測水平與治療效果和是否復(fù)發(fā)有相關(guān)性[6]。本研究顯示，CA125在惡性卵巢腫瘤中診斷靈敏度為69.8%，特異度為91.5%。與KATHERINA等[6]報(bào)道的靈敏度為64%相近,單項(xiàng)特異度與陽性預(yù)測值最高，與BASTANI等[5]的研究一致，驗(yàn)證了CA125在卵巢癌診斷中的價(jià)值。但只有50%～60%卵巢癌于早期階段升高，CA125升高還見于子宮肌瘤、中內(nèi)膜異位、卵巢囊腫及盆腔相關(guān)炎癥等[6]。卵巢癌早期鑒別診斷還需要借助其他檢測指標(biāo)。

HE4是附睪分泌蛋白E4的前體物質(zhì)，相對分子質(zhì)量為11×103，少量表達(dá)于正常卵巢組織，過度表達(dá)于卵巢癌[7]。本研究顯示，HE4對卵巢癌的靈敏度及特異度分別為83.7%與83.0%，與HELLSTR?M等[8]及MOORE等[9]的報(bào)道較一致。血清學(xué)HE4單獨(dú)檢測卵巢癌診斷效能最優(yōu)(AUC=0.91)，綜合診斷效能同CA125、HE4聯(lián)合診斷，說明HE4單獨(dú)檢測診斷卵巢癌較CA125優(yōu),且可區(qū)分良、惡性卵巢腫瘤，診斷卵巢癌更有效益，與BAKRANI等[10]和楊曉燕等[11]的研究一致。HE4血清學(xué)檢測挑戰(zhàn)了CA125診斷卵巢癌的傳統(tǒng)，但其應(yīng)用在大多綜合醫(yī)院并未像CA125那樣普及，值得進(jìn)一步推廣應(yīng)用于早期卵巢癌。CHUDECKA-GLAZ等[12]研究還提出，HE4檢測能應(yīng)用于預(yù)測卵巢癌一線治療的效果，可見HE4在卵巢癌診療中的地位正進(jìn)一步提高。

β-HCG由237個(gè)氨基酸組成，為妊娠時(shí)滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的糖蛋白激素，由含92個(gè)氨基酸的α亞單位及145個(gè)氨基酸的β亞單位組成，β亞單位分泌于某些腫瘤細(xì)胞，可作為腫瘤標(biāo)志物[13]。本研究中β-HCG單獨(dú)檢測診斷惡性卵巢癌的靈敏度和特異度分別為86.0%與66.0%，單項(xiàng)靈敏度最高，特異度較差，與萬貞元等[14]報(bào)道的80.0%與73.5%接近。對照組與惡性組β-HCG水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，β-HCG單獨(dú)檢測診斷卵巢癌的AUC為0.74，BASTANI等[13]的研究顯示，β-HCG單獨(dú)檢測的AUC為0.64，但加入CA125、HE4聯(lián)合檢測未提高診斷卵巢癌診斷效能(AUC=0.91)。β-HCG在惡性腫瘤如結(jié)腸癌、乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、卵巢原發(fā)性絨癌、胚胎性卵巢腫瘤及部分上皮卵巢癌中表現(xiàn)異常升高[5]，基于研究未對卵巢癌行病理學(xué)分組獨(dú)立出卵巢上皮細(xì)胞癌，其對卵巢上皮細(xì)胞癌診斷價(jià)值有待進(jìn)一步研究。

AMH是由2個(gè)相同的70×103亞基組成的二聚體糖蛋白，屬轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)超家庭成員[15]，參與胚胎早期性器官定向分化，誘導(dǎo)男性繆氏管退化，烏爾夫管發(fā)育成男性生殖系統(tǒng)，繆氏管發(fā)育成子宮、輸卵管和陰道的上部分[16]。女性AMH由卵巢顆粒細(xì)胞分泌，抑制優(yōu)勢卵泡募集，參與女性卵泡規(guī)律生成[17]。LA MARCA等[18]指出，AMH可作為診斷卵巢癌的重要標(biāo)志物，NAKAMURA等[19]體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，AMH作為抑癌基因或其產(chǎn)物抑制卵巢癌細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移、耐藥性。有研究表明，相對于對照組，加入人重組AMH的OVCAR3和OVCAR8細(xì)胞系凋亡明顯降低[20]。有研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，抑癌蛋白在胰腺癌中經(jīng)常會出現(xiàn)功能異常，而該蛋白的功能異常會促進(jìn)胰腺癌的生長，抑癌基因在抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡及改變腫瘤細(xì)胞能量代謝等方面起重要作用，若抑癌基因發(fā)生了突變或缺失，有可能發(fā)生惡性腫瘤，可以說抑癌基因的表達(dá)與惡性腫瘤的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)[21]。本研究顯示，設(shè)想AMH作為抑癌基因或其產(chǎn)物存在，其降低可能增加發(fā)生卵巢癌的概率，或卵巢癌發(fā)生時(shí)AMH水平下降，另一機(jī)制可能為卵巢癌發(fā)生時(shí)，卵巢生理功能減弱導(dǎo)致AMH分泌減少。本研究AMH血清學(xué)水平與卵巢癌呈負(fù)相關(guān)，而與卵巢良性腫瘤無相關(guān)性，驗(yàn)證了研究設(shè)想。AMH單獨(dú)檢測診斷卵巢癌的AUC為0.77，特異度(88.4%)僅次于CA125，CA125與HE4聯(lián)合診斷卵巢癌的AUC最高(0.95)，陰性預(yù)測值達(dá)97.5%，支持AMH、CA125與HE4聯(lián)合診斷可提高卵巢癌診斷價(jià)值的設(shè)想。此外，考慮年齡等因素的影響，AMH作為卵巢癌的爭議標(biāo)志物，其機(jī)制還需要更進(jìn)一步的臨床研究數(shù)據(jù)支持。

4 結(jié) 論

AMH、CA125、HE4 3個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測優(yōu)于各單項(xiàng)指標(biāo)和其他指標(biāo)多項(xiàng)聯(lián)合檢測，具有較高的診斷價(jià)值，可以降低卵巢癌的病死率，值得進(jìn)一步臨床研究以便更好地推廣使用。