梁宛楠,李 倩
(哈藥集團生物疫苗有限公司,哈爾濱 150069)
1.1.1 疫苗
NDV、IB、EDS76三聯滅活疫苗為實驗室制備,批號為201601、201602、201603。
1.1.2 試驗用雞
SPF雞來自哈藥集團生物疫苗有限公司五常SPF雞場。
1.1.3 ND、IB(M41)和EDS76的HA抗原
ND的HA抗原、EDS76的HA抗原由本實驗室自制,IB(M41)的HA抗原購自荷蘭GD公司。
將上述3批三聯滅活苗分別存放于2~8℃冰箱和室溫兩種不同溫度條件下。
1.2.1 物理性狀
觀察在不同間隔時間內取不同保存條件下(2~8℃和室溫)的疫苗,觀察其穩定性、黏度及有無分層和沉淀現象。
1.2.2 安全性試驗
分別取2~8℃保存了3、6、9、12、15個月的疫苗和室溫保存了3、6、9個月的疫苗免疫28日齡的SPF雛雞,每羽1.0 mL,每批疫苗每次免疫10只,每次設對照5只,觀察15 d,每天觀察注射疫苗的雞只有無全身反應和注射部位有無異常變化。
1.2.3 免疫效力試驗
取14日齡SPF雞,免疫IBH120弱毒疫苗,每只1羽份,到35日齡,采血,分離血清,測IB的HI抗體,然后再分別取2~8℃保存3、6、9、12、15月的疫苗和室溫保存3、6、9月的疫苗進行接種,第1組0.02 mL·只-1,第2組每只0.5 mL·只-1,每批疫苗每次接種10只,每次設對照5只,免疫28 d采血檢測抗NDV、IBV、EDS76的HI抗體。第1組測抗NDV的HI抗體,第2組測抗IBV、EDS76的HI抗體。分別統計HI抗體平均水平。
疫苗在2~8℃保存15個月或在室溫保存9個月,無分層和破乳現象,其黏度和穩定性均符合標準。
疫苗在2~8℃保存15個月或在室溫保存9個月,其安全性完全符合標準,接種雞只以后,采食和飲水正常,沒有出現全身不良反應,與對照相比沒有明顯區別;注射部位沒有發生腫脹和充血等癥狀,表明三批疫苗安全性全部合格。
疫苗在2~8℃免疫效力結果見表1和表2。疫苗在室溫保存免疫效力結果見表3和表4。

表1 2~8℃保存不同時間三聯滅活疫苗ND和EDS76的免疫效力

表2 2~8℃保存不同時間三聯滅活疫苗IB的免疫效力

表3 室溫保存不同時間三聯滅活疫苗ND和EDS的免疫效力

表4 室溫保存不同時間三聯滅活疫苗IB的免疫效力
結果表明,3批疫苗在2~8℃保存15個月或在室溫保存9個月對雛雞的免疫效力沒有明顯變化,但在臨床應用中考慮到疫苗的免疫效力可能會受到其他不良因素的影響,所以,將滅活疫苗的保存期暫定為2~8℃保存12個月,在室溫保存6個月。在臨床應用中,特別是在不具備保存條件的地方,將滅活疫苗放置在陰涼通風的條件下6個月不會影響滅活疫苗的免疫效果。
本試驗結果表明,該疫苗在2~8℃保存12個月或在室溫保存6個月其物理性狀、安全性、免疫效力檢驗均合格。