干擾素-γ和白細胞介素-22聯合檢測在原發性免疫性血小板減少性紫癜中的臨床意義

田勇 高鵬 韓梅 王雪野 肖中平 陳晶 弓長麗 封韜 李凌君 王雪梅 孔令環 王新梅 付堃

(1長春中醫藥大學，吉林 長春 1301172;2吉林省人民醫院)

原發性免疫性血小板減少性紫癜(ITP)是一種由多種機制共同參與的自身免疫介導的血小板減少綜合征，其發病機制尚未清楚，是臨床上最為常見的自身免疫出血性疾病。多數學者認為 ITP是由于體液免疫機制發生異常，而出現血小板表面特異性抗體，從而使血小板在降解過程中暴露隱匿性表位，隱匿性表位的 T細胞被抗原提呈細胞所識別產生了血小板抗體，引起 ITP患者血小板破壞〔1〕。研究發現〔2〕，有些患者體內雖然存在血小板自身抗體，但疾病仍可以緩解，而有些患者體內檢測不到血小板自身抗體，進而表明 ITP的發病可能存在其他相關因素，細胞免疫在 ITP的發病中占主導地位。本文擬探討干擾素(IFN)-γ和白細胞介素(IL)-22在 ITP中的表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 吉林省人民醫院2017年12月至2019年6月診療的 ITP患者30例為觀察組，男11例，女19例，年齡54～74歲，中位年齡為(58.34±14.25)歲，其中達到完全反應(CR)標準28例，有效(R)標準2例，均符合血液病診斷及療效標準〔3〕。該院體檢健康者20例為對照組，男11例，女9例，年齡55～72歲，中位年齡為(58.43±13.78)歲，兩組年齡、性別構成差異均無統計學意義(P>0.05)。均簽署知情同意書。

1.2 標本采集 分別抽取對照組及觀察組治療前后的肘靜脈血4 ml，采用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，3 000 r/min離心20 min后，分離其血漿，分裝后保存在-20℃冰箱準備測量。

1.3 檢測方法 分別檢測治療前后血漿中IFN-γ和IL-22水平，選用依科賽酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒(批號：211099)，按照試劑盒的說明書進行操作，將標本及試劑盒常溫放置達室溫，標準品稀釋，配置生物素化抗體的工作液及酶結合物工作液。進行加樣、孵育、洗板，加入 IFN-γ和 IL-22抗體，洗板、避光孵育15 min顯色，加終止液終止反應，上酶標儀讀板，最后選用450 nm波長讀數，實驗重復3次。

1.4 統計學處理 采用 SPSS17.0統計軟件，符合正態分布的均數間比較采用單因素方差分析；不符合正態分布的均數間比較采用非參數檢驗。

2 結 果

觀察組治療前、后血漿中IFN-γ濃度、IL-22濃度明顯高于對照組(P<0.001、P<0.05)。觀察組治療前、后血漿中IFN-γ、IL-22濃度差異有統計學意義(P<0.05)；見表1。

表1 兩組治療前后血漿IFN-γ和IL-22水平比較

3 討 論

ITP是由于血小板過多破壞而發生的自身免疫性出血性疾病〔4〕。臨床上關于ITP的診斷缺乏特異性標志，并且 ITP發病機制至今尚未清楚，最近研究表明，ITP發病可能與細胞免疫相關，并且眾多細胞因子參與ITP發病〔5〕。IFN-γ屬于IL-1家族中的成員，是近幾年發現的一種固有炎癥、免疫應答的抑制劑〔6〕。研究〔7〕表明，保持Th1/Th2細胞的平衡在自身免疫性疾病的發生發展過程中是至關重要的因素。Th細胞的分化失衡是導致ITP患者免疫功能紊亂的主要因素。 根據Th分泌細胞因子的不同分為Th1和Th2。IFN-γ主要由Th1細胞分泌，IL-4主要由Th2細胞分泌。IFN-γ可以通過抑制Th2類細胞因子的產生，進而促進Th1類細胞因子的產生。本研究結果提示，ITP患者存在Th1細胞免疫功能的紊亂，表明IFN-γ可能參與ITP發病，這一結論與之前的結果基本相同〔8〕。 IL-22最早是用 IL-9刺激一株 T淋巴瘤細胞系所發現〔9〕，主要由Th1、Th17、Th22細胞分泌，且CD8+T細胞、自然殺傷(NK)22細胞及內生淋巴細胞也可以分泌IL-22。 Wolk等〔10〕研究表明，克隆恩病患者血漿中 IL-22水平高于健康對照組，與疾病的嚴重程度呈正相關，從而表明了 IL-22可能參與克隆恩病的發病過程。相反，有學者證實，銀屑病患者血清中IL-22水平顯著低于正常人〔11〕。所以IL-22可能參與了自身免疫性疾病的發生發展，并且起著致病性或保護性的作用。本研究結果與以往的研究結果基本一致〔12～14〕。IL-22與IFN-γ在ITP的發生發展中可能發揮著協同致病作用，兩種因子可能共同參與ITP發病。

綜上，ITP作為一種自身免疫性疾病，存在著多種細胞因子的異常，臨床上聯合檢測 ITP患者血漿中 IFN-γ和 IL-22細胞因子水平，對于判斷其病情的變化、治療效果及其預后都具有重要的臨床意義。