膽囊腺癌中VEGF和Ki67的表達及意義

李雙標 李勝水 田甜

【摘要】目的：對VEGF和Ki67在膽囊腺癌中的表達和意義進行分析和討論。方法：對我院切除膽囊腺的患者進行研究，利用SP法研究45例患者VEGF和Ki67在膽囊腺癌中的表達與臨床關系。結果：VEGF在膽囊腺癌中的表達率為53.3%（24/45），Ki67在膽囊腺癌中的表達率為60%（27/45）。通過研究分析可以發現淋巴結轉移和浸潤深度使得VEGF和Ki67在膽囊腺癌中呈現正相關的表達特點。P<0.05。結論：對于膽囊腺癌的轉移和浸潤，VEGF和Ki67有著重要的影響，其在膽囊腺癌中表達的越高作用越大，通過對VEGF和Ki67進行檢測能夠對膽囊腺癌的預后進行判斷。

【關鍵詞】膽囊腺癌;VEGF;Ki67

【中圖分類號】R174+.6 ? ? ?【文獻標識碼】A ? ? 【文章編號】2095-6851（2019）08-045-01

引言

膽囊結石、膽管異常以及膽囊炎對于膽囊腺有著重要影響，常無臨床表現。在膽囊癌組織中，膽囊腺癌是一種比較常見的組織類型，在早期就容易發生轉移，而且預后較差。本文通過SP法對VEGF和Ki67在膽囊腺癌中的表達和意義進行研究和分析。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取時間為2012年12月至2018年12月的45例在我院進行手術切除患者的膽囊腺癌病理存檔蠟塊。所有患者都被確診是膽囊腺癌，共有26例男性患者和19例女性患者，所有患者的年齡都小于68歲，大于28歲。在膽囊腺癌中有18例一級患者，有23例二級患者，其中共有22例無漿膜侵犯患者;在所有患者中，在膽囊頸和膽總管周圍淋巴結發生轉移的患者一共18例，此外還有27例患者在研究時沒有發生膽總管周圍淋巴結的轉移。在根據腺癌分級時，能夠分為兩大組，一組是高分化組，共有32例患者，一組是低分化組，共有13例患者。在進行手術之前，所有的患者都沒有經過化療、放療、生物治療等，所以在其它方面沒有明顯差距。在選用抗體時，即用型鼠抗人Ki67單克隆抗體、，即用型鼠抗人VEGF單克隆抗體、超敏免疫組織化學SP檢測試劑以及即用型DAB顯色劑。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化染色方法

對腫瘤細胞中的抗原進行檢測時利用的是免疫組織化學SP方法進行免疫組織化學染色。對于研究的組織手術標本必須經過離體三十分鐘后再在濃度為10%的福爾馬林緩沖液中進行固定，對于時間上也有一定的要求，必須要達到二十四小時以上，但不能超過四十八小時。之后在包埋時利用石蠟的方式來進行，將切片的厚度保持在4μm，再對切片進行脫蠟、水化處理，之后可以利用抗原修復法進行修復。所謂的抗原修復法，主要是指EDTA抗原修復液需要煮沸，在煮沸時應該采用直接煮沸的方式來進行。一抗室溫下六十分鐘或者在溫度為四度的冰箱中進行過夜處理，DBA顯色、蘇木精復染、封片。

1.2.2 陽性結果判定

觀察VEGF在細胞質中的表達時，主要通過細胞質的顏色來判定，一般情況下會發現顏色呈現棕黃色或者黃色。在進行評分時，主要根據大多數細胞呈現的顏色來進行判斷，并且要根據染色體的強度來進行評分：當細胞沒有著色時為0分;當細胞的顏色為淡黃色時為1分;2分對應的是呈現棕黃色的細胞;如果是呈現棕褐色的細胞那么就是3分。細胞顏色越深，評分結果越高。之后為了計算在癌細胞當中陽性細胞的占比，需要在高倍視野下觀察癌細胞，選取的癌細胞至少應該超過500個，并采用隨機計數的方式：0分對應的是癌細胞中陽性細胞占比為0～5%的;1分對應的是癌細胞中陽性細胞占比為6%～25%的;2分對應的是癌細胞中陽性細胞占比為26%～50%的;3分對應的是癌細胞中陽性細胞占比為51%～75%的;4分對應的是癌細胞中陽性細胞占比超過75%的。將上述兩種得分相加，如果總和小于三分，那么結果就為陰性;相反的，如果兩個結果的總和大于或者等于三分，那么結果就為陽性;Ki67定位于細胞核，觀察細胞核的顏色，陽性表達對應的顏色是棕黃色或者黃色。利用高倍視野觀察癌細胞時，數量選取500個以上，并采用隨機計數的方式進行觀察。陽性病例的判定結果應該依賴于陽性細胞的比例等于或者超過百分之十五這一條件。

1.3 數據統計

在膽囊腺癌中，VEGF呈現陽性的表達為53.3%，Ki67呈現陽性的表達為60%，研究的病例分別為24例和27例。

2 結果

3 討論

根據上述表格可以發現，對于膽囊腺癌患者而言，轉移和復發是引起這種病癥的主要原因。在腫瘤間質內，新生血管的生成能力是引起惡性腫瘤增殖和復發的主要基礎。通過研究可以發現，VEGF是腫瘤細胞分泌的，對腫瘤血管會起到刺激性作用，而且在一定程度上還能夠對腫瘤基質的形成起到促進作用，在惡性腫瘤的轉移和侵襲上讓其產生更嚴重的惡化。人類的染色體有很多條，其中Ki67基因在全部染色體中位于第10號的位置。Ki67基因的組成中有分子量較大的蛋白質，還有兩條肽鏈，其中大分子蛋白質的分子量分別為345000和395000。在DNA的合成當中，Ki67基因也發揮著重要的作用，在醫學研究中，經常用來當做指標檢測惡性腫瘤細胞增殖活性。

參考文獻：

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