張 衛,劉春艷,謝 宇,周 雯,胡欣悅,馬子力,楊 潤,張麗艷*
(1.貴州中醫藥大學,貴州 貴陽 550025;2.貴州廣濟堂藥業有限公司,貴州 貴陽 550014)
天麻為蘭科植物天麻GastrodiaelataBl.的干燥塊莖,是一味常用而較名貴的中藥,味甘,平,無毒,其潤而不燥,主入肝經,具有熄風止痙、平抑肝陽、祛風通絡等功效,主要用于小兒麻痹、癲癇抽搐、破傷風、頭痛眩暈、手足不遂、肢體麻木、風濕痹痛等癥[1-2]。主要分布于中國的華中及華南地區,冬、春季節采集,冬季莖枯時采挖的名叫“冬麻”,質量優良;春季發芽時采挖的為“春麻”,質量較差[3]。天麻最早以“赤箭”之名始載于《神農本草經》,并被列為上品[4],明代李時珍在《本草綱目》中對歷代書籍中關于天麻功效的論述作了總結歸納,并稱天麻是“治風之神藥”[5]。
天麻是貴州的特色道地藥材,已被列入中國地理標志保護產品目錄,但是已有的研究均未能解決貴州天麻質優價不優的現狀?,F代研究表明天麻不僅僅作為一味中藥,用于神經保護、增強免疫、預防心血管疾病、抗遺忘以及防止衰老等,也可做成保健藥膳,供人們直接食用,比如天麻豆渣蛋糕[6]、天麻鮮濕面條[7]、天麻酒[8]等,因此,需要對貴州天麻質量進行全面的研究,明確貴州天麻固有的優勢,同時解決天麻原料藥材的選擇和確定問題,以及為從根本上解決“貴天麻”質優價不優的現狀提供研究支撐。本研究采用TLC法、水分測定法、浸出物測定法、二氧化硫測定法對收集的貴州天麻進行多方面的綜合質量評價,包括水分、浸出物、二氧化硫殘留量等,明確貴州天麻的品質優劣,為貴州天麻的開發利用提供有力依據。
04-010型超聲波清洗儀(昆明市超聲儀器有限公司),40-061型電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司),DK-99-ⅡA型水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司),微孔濾膜,色譜柱(Agilent ZORBAX SB-Aq C18柱(5 μm,4.6 mm×250 mm)),硅膠G板(自制)。
天麻素對照品(批號:110807-201608,)、對羥基苯甲醇對照品(批號:111970-201501)由中國食品藥品檢定研究院提供,乙腈為色譜純,水為娃哈哈純凈水,其余均為分析純。
15批樣品分別為貴州大方(12批)、貴州德江(3批),天麻藥材均為自采集,以上所有樣品經貴州中醫藥大學植物栽培教研室魏升華教授鑒定為蘭科植物天麻GastrodiaelataBl.的干燥塊莖。采收人情況見表1。

表1 15批天麻采收情況
按照2015年版《中國藥典》“天麻”項下質量標準進行質量對比研究。分別采用TLC法、水分測定法、浸出物物測定法、二氧化硫測定法對收集的天麻進行多方面的綜合質量評價研究,包括水分、浸出及二氧化硫殘留量等,明確貴州天麻品質優勢。
按照2015年版《中國藥典》天麻項下【鑒別】進行薄層色譜驗證分析。
2.1.1 天麻素的薄層色譜鑒別 (1)供試品溶液的制備。取天麻樣品粉末0.5 g,加70%甲醇5 mL,超聲處理30 min,濾過,取濾液作為供試品溶液。
(2)天麻對照藥材溶液的制備。取天麻對照藥材0.5 g,同法制成對照藥材溶液。
(3)天麻素對照品溶液的制備。取天麻素對照品,加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作為對照品溶液。
(4)薄層色譜鑒別。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取供試品溶液10 μL、對照藥材溶液及對照品溶液各5 μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯-甲醇-水(9∶1∶0.2)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。結果見圖1、圖2、圖3。

注:1-5為貴州天麻樣品(大方批號01-05),6為天麻素對照品,7為天麻對照藥材
圖1 天麻素的薄層色譜鑒別1

注:1-5為貴州天麻樣品(大方批號06-10),6為天麻素對照品,7為天麻對照藥材
圖2 天麻素的薄層色譜鑒別2

注:1-5為貴州天麻樣品(大方批號11-15),6為天麻素對照品,7為天麻對照藥材
圖3 天麻素的薄層色譜鑒別3
2.1.2 對羥基苯甲醇的薄層色譜鑒別 (1)對羥基苯甲醇對照品溶液的制備。取對羥基苯甲醇對照品,加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作為對照品溶液。
(2)薄層色譜鑒別。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取“2.1.2項”下供試品溶液10 μL、對照藥材溶液及“2.1.3項”下對照品溶液各5 μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以石油醚(60~90 ℃)-乙酸乙酯(1∶1)為展開劑,以下操作同“2.1.5項”。結果見圖4、圖5、圖6。

注:1-5為貴州天麻樣品(大方01-05),6為對羥基苯甲醇對照品,7為天麻對照藥材
圖4 對羥基苯甲醇的薄層色譜鑒別1

注:1-5為貴州天麻樣品(大方06-10),6為對羥基苯甲醇對照品,7為天麻對照藥材
圖5 對羥基苯甲醇的薄層色譜鑒別2

注:1-5為貴州天麻樣品(大方11-15),6為對羥基苯甲醇對照品,7為天麻對照藥材
圖6 對羥基苯甲醇的薄層色譜鑒別3
照2015版《中國藥典》第四部(通則0832)第二法(烘干法),稱取貴州產15批天麻藥材進行水分測定。結果見表2。
照2015版《中國藥典》第四部(通則2331)第一法(滴定法)。結果見表2。
照2015版《中國藥典》第四部(通則2201)醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法測定,用稀乙醇作溶劑,檢查其醇溶性浸出物。結果見表2。

表2 天麻水分、浸出物、二氧化硫殘留量測定結果 (%)
注:水分含量藥典規定不得超過15.0%;浸出物含量藥典規定不得少于15.0%;二氧化硫殘留量藥典規定不得超過400mg/kg。
由薄層鑒別結果圖1、圖2、圖3可看出,15批貴州天麻樣品中天麻素和對羥基苯甲醇的斑點清晰,穩定性較強。由表2可知,15批天麻樣品的水分含量、二氧化硫殘留量、浸出物均符合 2015版《中國藥典》一部“天麻”藥材項下的規定,即水分檢測不得過15.0%,貴州天麻水分平均值為7.889 7%;二氧化硫殘留不得過400 mg/kg,貴州天麻二氧化硫殘留量平均值為0.000%;浸出物不得少于15.0%,貴州天麻浸出物平均值為55.551 1%,遠遠高于藥典標準。說明貴州天麻的品質較好,各項檢測指標都符合藥典標準,具有一定的市場競爭優勢。
中藥本身就是一個復雜系統,成分多樣,具有多成分多靶點的特點,單以某中藥中所含的某一特定成分的含量去評價其藥的質量是遠遠不夠的,但是可以作為一種評定的依據和手段。貴州省是全國中藥資源最豐富的省區之一,其奇特的地理地形地貌,多樣的氣候類型,為貴州省中藥資源的發展提供了先決條件,使其擁有獨特的優勢。天麻作為貴州省的特色道地藥材,其質量優劣問題最為關鍵,天麻含有豐富的化學成分,文獻研究發現,多以天麻素和對羥基苯甲醇的含量作為主要化學成分分析的對象,故本實驗選用天麻素和對羥基苯甲醇為天麻中的指標成分,采用TLC法對其進行定性鑒別,用于評價貴州天麻質量的穩定性。
本研究均采用2015版《中國藥典》測定方法對貴州天麻的主要化學成分進行薄層鑒別,測定其水分、浸出物及二氧化硫殘留量的含量,各項測定結果均達到藥典規定的標準,其結果可作為一種參考依據,為貴州天麻的進一步開發利用提供實驗支撐。