抗生素中聚合物檢測方法研究

張玉格

（華北制藥股份有限公司，河北 石家莊 050000）

引言

青霉素類藥物是抗生素藥物的重要組成部分，是β-內酰胺類抗生素的藥物總稱，包括阿莫西林膠囊、注射用氟氯西林鈉、注射用青霉素鈉以及注射用氨芐西林鈉等藥物，其中注射用氟氯西林鈉為半合成的耐青霉素酶青霉素。其作用機制與青霉素G相似。臨床中，根據患者的體質不同，很多患者在應用青霉素類藥物時，身體會出現不同程度的過敏反應，如過敏性休克、皮疹、藥物熱等，其中，過敏性休克可能會危及患者的生命，是最為嚴重的一種過敏反應。通過大量的研究驗證，發現容易引發患者產生青霉素類藥物過敏反應的源頭其實是再來自身細胞在其生產和儲存過程中產生的一種“雜質”，這種雜質就是高分子聚合物，為此，解決這些雜質，不斷的加強對青霉素類藥物聚合物的檢測準確性，實現對其含量的嚴格控制，需要一個具有高度準確性和可靠性的測定方法。聚合物是2000版藥典新增項目，2010年版藥典聚合物控制品種增加到37個，2015年版藥典中聚合物控制延續并延伸至新品注冊研究領域，而注射用氟氯西林鈉聚合物檢測并未在2015年藥典中收載。基于此，對注射用氟氯西林鈉聚合物檢測方法進行探析，并深入研究具有重要的現實意義。

一、試驗的基礎儀器和試劑

（一）基本檢測的試驗儀器

①Waters E2695高效液相色譜儀器；②葡聚糖凝膠色譜柱Sep-hadexTMG-10；③電子天平AX205DR。

（二）試驗的主要試劑與主要的對照品

主要的試劑：1.0g/支的注射用氟氯西林鈉；藍色葡萄糖溶液2000ml；磷酸氫二鈉溶液；磷酸二氫鈉溶液；無水碳酸鈉溶液。

主要實驗對照品：氟氯西林。

二、試驗方法與結果

（一）開展試驗的基礎條件

利用高效液色譜法中的分子排阻方法作為整個實驗的主要方法，葡聚糖凝膠色譜柱為親水性：Sep-hadexTMG-10（300*10mm），流動相A為pH7.0的0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.01mol/L磷酸二氫鈉溶液（61：39），流動相B為水，流速為每分鐘0.8ml，檢測的波長為254nm，柱體溫度為30℃，進樣量為100ul。

（二）精密度的測定

重復性：取注射用氟氯林鈉約400mg，精密稱定六份，用純化水溶解至10ml容量瓶中，定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液，在以上系統條件下測定，記錄色譜圖，以外標法計算測定的色譜圖中氟氯西林聚合物含量。計算六次測定所得的氟氯西林聚合物含量的相對標準偏差，詳細情況請見下表1和表2。

中間精密度：取三批注射用氟氯林鈉約400mg，精密稱定各一份，分別用純化水溶解至10ml容量瓶中，定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液，由兩名分析員采用不同儀器分別在以上色譜系統條件下測定，記錄色譜圖，以外標法計算測定的色譜圖中聚合物含量。計算此三批樣品每兩人測定所得的氟氯西林聚合物含量的相對偏差。

表1 重復性測量結果

重復性四 0.028重復性五 0.027重復性六 0.028

表2 中間精密度測定結果

（三）定量限測定

精密稱取氟氯西林對照品19.99mg，加純化水溶解并稀釋至200ml，搖勻。精密吸取上溶液6.0ml，用純化水稀釋至100ml，進樣100μl，以流動相B為流動相，于（1）色譜系統條件下測定，記錄色譜圖，計算主峰的信噪比為10.1，此時樣品濃度為5.5532×10-3mg/ml，以此濃度的樣品再連續測定5次，計算五次主峰峰面積的相對標準偏差為0.7%，此方法的定量限為5.5532×10-3mg/ml。詳細情況見下表3：

表3

（四）耐用性測定

精密稱取注射用氟氯林鈉約412mg，用純化水溶解至10ml容量瓶中，定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液，放置于5℃低溫箱中，分別在0h、7h、11h、14h、17h時于（1）色譜系統條件下測定，記錄色譜圖，以外標法計算不同時間測定的色譜圖中聚合物含量，經計算不同時間測定的聚合物含量和與0時的變化值均為0.0%，證明供試品溶液在5℃低溫箱中中17h內穩定。詳見表4。

表4

三、討論

文章通過對注射用氟氯西林鈉中的聚合物測定方法進行實驗分析，從實驗數據中了解到其測定方法具有良好的重現性，并且準確性與可靠性較高，能夠準確測定注射用氟氯西林鈉中高分子聚合物含量。基于此，可以確認出其對于青霉素類藥物抗生素中注射用氟氯西林鈉的高分子聚合物含量測定可以得出準確度、可靠度較高的結果，注射用氟氯西林鈉中聚合物含量在0.03%左右，存在致敏風險，建議進行聚合物控制。