氟對體外培養LS8細胞增殖、氧化應激與凋亡的作用研究

李玨丹 崔敏

[摘要]目的：觀察氟化物對小鼠成釉細胞樣細胞（LS8細胞）增殖、氧化應激以及凋亡的影響。方法：取對數生長期的LS8細胞，在培養液中分別加入終濃度為0、0.5、1、2、4和8mM的氟化鈉（NaF）溶液，培養24h和48h后，CCK-8檢測細胞增殖;倒置顯微鏡觀察細胞形態;生化方法檢測細胞丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;qRT-PCR檢測過氧化氫酶（Cat）、谷胱甘肽過氧化物酶1（Gpx-1）和谷胱甘肽S轉移酶（Gst）mRNA水平;流式細胞術檢測細胞凋亡;Western blotting檢測caspase-9和caspase-3蛋白表達改變。結果：過量氟抑制LS8細胞增殖，且隨著NaF濃度增加，細胞增殖呈下降趨勢;過量氟顯著增加LS8細胞內MDA含量，降低SOD活性及Gpx-1、Gst mRNA表達水平;過量氟引起LS8細胞形態改變和細胞凋亡，且伴隨著caspase-9，caspase-3表達的顯著增加。結論：過量氟抑制LS8細胞增殖，擾亂細胞的氧化與抗氧化平衡并誘發氧化應激，持續的氧化應激最終導致細胞凋亡。

[關鍵詞]氟化物;LS8細胞;增殖;氧化應激;凋亡

[中圖分類號]R329.2+8? ? [文獻標志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2019）09-0089-04

牙釉質發育期，機體長期攝入過量氟可導致氟牙癥發生，引起牙釉質白堊色條紋或斑塊，重者伴釉質缺損，嚴重影響患者的咀嚼功能和顏面美觀[1-2]。然而氟牙癥缺乏有效治療手段，因而探究氟牙癥發病機制，對于有效控制氟牙癥發生具有重要現實意義。釉原蛋白在釉質形成后期未得到充分降解而滯留于釉基質中，影響釉質礦化，導致氟牙癥發生[3-4]。釉原蛋白滯留的機制主要包括過量氟對釉基質蛋白、釉基質蛋白酶及成釉細胞的影響等，多數學者認為過量氟可下調成熟成釉細胞中釉基質蛋白酶KLK4表達[3，5-6]，對釉基質蛋白酶MMP20及釉基質蛋白的表達無明顯影響[3，5，7-8]。……