楊金華
摘 ? 要:SRAP標(biāo)記技術(shù)是現(xiàn)階段植物研究中應(yīng)用的新型分子標(biāo)記技術(shù)。SRAP與其他分子標(biāo)記技術(shù)相比具有操作便捷、數(shù)據(jù)精準(zhǔn)以及高效率等優(yōu)點(diǎn)。也正因如此,SRAP分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中迅速普及,其在植物育種品質(zhì)資源以及植物遺傳育種研究中起到了非常重要的作用。為此,對(duì)SRAP分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行了分析,并對(duì)其在植物研究中的應(yīng)用進(jìn)行了研究。
關(guān)鍵詞:SRAP標(biāo)記;植物研究;實(shí)際應(yīng)用
進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái),高新科學(xué)技術(shù)得到了快速發(fā)展,分子標(biāo)記技術(shù)也有了一定的進(jìn)步。特別是SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的提出與應(yīng)用,對(duì)植物的研究起到了非常重要的作用,如植物基因定位與標(biāo)記、連鎖圖譜搭建、植物種群遺傳以及植物種子品質(zhì)鑒別等方面[1]。正因此,要對(duì)SRAP分子標(biāo)記技術(shù)實(shí)現(xiàn)進(jìn)一步的分析和研究,從而發(fā)揮出SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的作用,推動(dòng)對(duì)于植物的研究。
1 ? SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的原理以及特點(diǎn)分析
1.1 ? SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的原理
SRAP分子標(biāo)記技術(shù)即序列擴(kuò)增多態(tài)性SRAP技術(shù),是一種以PCR標(biāo)記技術(shù)為基礎(chǔ)的新型技術(shù),其最早是在21世紀(jì)初由美國(guó)學(xué)者提出的。SRAP分子標(biāo)記技術(shù)主要是以引物設(shè)計(jì)為核心,以O(shè)RFS的序列擴(kuò)增為基礎(chǔ)。在SRAP分子標(biāo)記應(yīng)用中,長(zhǎng)度為17bp的是上游引物,其中前10bp是由填充序列構(gòu)建成的5端,其余的便是由CCGG構(gòu)成的核心序列以及選擇堿基。長(zhǎng)18bp的則是下游引物,其中前約11bp是前5端的填充序列,剩下的則是由AATT構(gòu)成的核心序列以及選擇堿基。其主要是利用不同物種或個(gè)體中內(nèi)含、間隔及啟動(dòng)等因素不同而產(chǎn)生的序列擴(kuò)增多態(tài)性進(jìn)行標(biāo)記。
1.2 ? SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的特點(diǎn)
SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的操作非常便捷,只需要利用50℃的退火溫度以及17bp或18bp的引物就能確保擴(kuò)增結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。另外,SRAP分子標(biāo)記技術(shù)可以利用對(duì)選擇堿基的改變,獲取多種引物。而且由于其上下游的引物擁有多種組合方式,既能提升引物的利用率又能降低投入成本。在進(jìn)行標(biāo)記測(cè)序時(shí),因SRAP技術(shù)的引物比較長(zhǎng),其也比其他標(biāo)記技術(shù)更容易測(cè)序。所以,SRAP分子標(biāo)記技術(shù)除了操作便捷、穩(wěn)定性高以外,其還具有效率高、共顯性標(biāo)記明顯以及易測(cè)序、易分離條帶等特點(diǎn)。
2 ? SRAP分子標(biāo)記技術(shù)在植物研究中的應(yīng)用
2.1 ? 構(gòu)建精準(zhǔn)的植物遺傳基因圖譜
在進(jìn)行植物研究時(shí),植物遺傳基因圖譜是非常重要的,其能夠?yàn)橹参锘蜓芯?、科學(xué)育種、種質(zhì)提升等提供科學(xué)依據(jù)。其詳細(xì)來(lái)說(shuō)就是以植物遺傳基因分析研究得出的數(shù)據(jù)為基礎(chǔ),將植物遺傳基因在染色體的位置進(jìn)行準(zhǔn)確排列的圖譜。而SRAP標(biāo)記技術(shù)不僅能對(duì)RI系進(jìn)行圖譜構(gòu)建,還能將其中共線性分離狀態(tài)的標(biāo)記區(qū)分出來(lái)。另外,在用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建的遺傳基因圖譜與其他標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建的圖譜對(duì)比時(shí),可發(fā)現(xiàn)在引物多態(tài)性條帶數(shù)量及多態(tài)性引物比例上,SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用效果要高于其他標(biāo)記技術(shù)。
2.2 ? 分析植物遺傳的多樣性
對(duì)于植物而言,其遺傳與其他物種一樣都是具有多樣性的。所謂遺傳多樣性,就是指同物種不同群體或同群體不同個(gè)體間產(chǎn)生的基因突變。加強(qiáng)對(duì)于植物遺傳多樣化的研究,不僅能夠使人們更好地了解植物的基因結(jié)構(gòu)以及品種差異,還能促進(jìn)對(duì)于植物的保護(hù)以及對(duì)植物基因突變的研究?,F(xiàn)階段,常用的遺傳多樣性標(biāo)記技術(shù)主要就是AFLP以及SRAP技術(shù),但就實(shí)際效果而言,SRAP分子標(biāo)記技術(shù)在進(jìn)行遺傳多樣性研究時(shí)所提供的信息可靠性以及精準(zhǔn)性要明顯高于AFLP標(biāo)記技術(shù),而且利用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)能夠?qū)χ参锏倪M(jìn)化歷史進(jìn)行更加全面的體現(xiàn)。
2.3 ? 協(xié)助進(jìn)行基因比較的研究
在進(jìn)行基因的比較時(shí),首先就得利用SRAP分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)植物內(nèi)的DNA標(biāo)記、利用,然后再對(duì)植物進(jìn)行遺傳試驗(yàn),最后通過(guò)對(duì)分子標(biāo)記在不同植物基因中的比較,實(shí)現(xiàn)對(duì)植物基因排列特點(diǎn)的比較和研究。SRAP技術(shù)能夠使分子標(biāo)記在植物基因中清晰、準(zhǔn)確地標(biāo)出,協(xié)助其更好地完成對(duì)于基因比較的研究。
2.4 ? 協(xié)助構(gòu)建基因轉(zhuǎn)錄圖譜
基因轉(zhuǎn)錄圖譜作為現(xiàn)階段基因?qū)W研究的重要工具,其主要是利用PCR技術(shù)對(duì)編碼區(qū)的序列進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)的。而SRAP標(biāo)記技術(shù)則可以通過(guò)對(duì)引物的不同組合,對(duì)植物基因序列進(jìn)行檢測(cè),利用其共顯性準(zhǔn)確、快速的特點(diǎn),實(shí)現(xiàn)對(duì)基因轉(zhuǎn)錄圖譜的科學(xué)、高效化構(gòu)建。
總之,SRAP分子標(biāo)記技術(shù)因其本身的優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn),對(duì)植物的研究起到了非常重要的作用。但對(duì)于SRAP分子標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用不能僅限于此,要對(duì)其進(jìn)行深入的了解和研究,使其能夠在未來(lái)為植物研究提供技術(shù)保障?,F(xiàn)階段要把SRAP分子標(biāo)記技術(shù)與其他分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行有效結(jié)合,通過(guò)各項(xiàng)技術(shù)的配合應(yīng)用,進(jìn)一步優(yōu)化對(duì)植物的研究和發(fā)展。
參考文獻(xiàn):
[ 1 ] 詹海仙,裴香萍,劉計(jì)權(quán),等.分子標(biāo)記在豆科藥食兼用植物研究中的應(yīng)用[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué),2018,4(6):1049-1052.
(收稿日期:2019-05-28)