徐求文,金妙仁2,樓偉杰2,夏天風,陳 波,樓玲玲
(1.杭州百瑞特飼料科技有限公司,浙江 杭州 311255; 2.杭州海爾希畜牧科技有限公司)
腸道是營養物質消化吸收的主要場所,腸道的生長發育和健康狀況影響動物的生長發育,抵抗力和免疫力等。因此,維持腸道結構和功能就顯得非常重要。仔豬斷奶往往會出現腸道微生物菌群紊亂,腸道粘膜形態受損,消化功能紊亂等現象,導致食欲降低,腹瀉,飼料利用率低,生長緩慢,對養豬生產帶來巨大損失。谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽富含谷氨酰胺,谷氨酰胺二肽,動物活性小肽和益生菌等,是一種能調節腸道功能的活性肽。本研究在斷奶仔豬日糧中添加谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽,研究其對斷奶仔豬黏膜形態、腸道菌群和生產性能的影響,為生產應用提供理論依據。
1.1試驗材料 谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽由杭州百瑞特飼料科技有限公司研制,谷朊粉和蠶蛹經合理配伍酶解,發酵制成的復合肽,含谷氨酰胺,谷氨酰胺二肽,動物活性小肽和益生菌。
1.2試驗設計 選取28日齡斷奶杜大長仔豬60頭,按胎次,體重相近和公母基本一致原則,分成2組,分別飼養于條件一致的密閉式保育豬舍內。對照組飼喂基礎日糧(表1),試驗組用1%酶解發酵復合肽替代基礎飼糧中1%魚粉,每組三個重復,每個重復10頭,試驗仔豬均采用干濕飼喂器飼喂,相鄰兩欄合用一個干濕飼喂器,一個飼喂器為一個重復,斷奶仔豬均飼養于保育舍豬舍,至49日齡結束,試驗期21 d。

表1 試驗基礎日糧組成及營養水平
1.3生產性能 在42日齡和49日齡清晨空腹稱重統計飼料消耗量,計算日增重和料重比。
1.4腸道菌群數量 試驗結束時,每組每個重復選2頭接近平均體重的仔豬屠宰,分別無菌操作采集盲腸和結腸內容物,在滅菌生理鹽水中搖勻,用平板培養計數法計數腸道乳酸桿菌和大腸桿菌數量,菌群數量以每克腸道內容物所含細菌群落總數的對數[lg CFU/g]表示。 在無菌操作臺中稱取1 g內容物于99 mL帶有玻璃珠的生理鹽水中搖勻滅菌,然后取 1 mL于試管中,加入無菌生理鹽水9 mL,振蕩混勻,依次按10倍等比稀釋至10-7。其中乳酸桿菌接種于乳酸菌選擇性培養基(LBS)上培養,在 37 ℃生化培養箱中厭氧培養48 h 后進行菌落計數;大腸桿菌則接種于伊紅美蘭瓊脂培養基上培養,在37 ℃生化培養箱中有氧培養24 h后進行菌落計數。
1.5小腸黏膜結構測定 試驗結束時,每組每個重復選2頭接近平均體重的仔豬屠宰,截取十二指腸、空腸和回腸中段各 4 cm腸段,置于含3.8%甲醛的福爾馬林固定液中,經脫水、包蠟、切片、HE染色后,顯微鏡拍照,測量絨毛高度和隱窩深度。
1.6試驗數據處理 采用SPSS 10.0統計分析。試驗數據以“平均值±標準差”表示。
2.1谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬生產性能的影響 谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬生長性能的影響見表2。

表2 谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬生產性能的影響
注:小寫字母不同表示各試驗組之間差異顯著(P<0.05),下同。
谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽能顯著提高斷奶仔豬日增重,與對照組相比,28~42日齡和28~49日齡的日增重,試驗組比對照組分別提高了10.86%(P<0.05)和12.26%(P<0.05)。28~42日齡和28~49日齡的料重比試驗組比對照組降低了8.28%(P>0.05)和5.52%(P>0.05)。
2.2谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬腸道內容物菌群的影響 谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬腸道內容物菌群的影響見表3。
日糧中谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽能顯著影響斷奶仔豬腸道內容物菌群,試驗組盲腸和結腸的大腸桿菌數量比對照組分別降低5.77%(P<0.05)和4.39% (P>0.05)。試驗組盲腸和結腸的乳酸桿菌數量比對照組分別提高8.65%(P<0.05)和6.25%(P<0.05)。

表3 谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬腸道內容物菌群的影響(lg CFU/g)
2.3谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬黏膜形態的影響 谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬黏膜形態的影響見表4。

表4 谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽對斷奶仔豬黏膜形態的影響(μm)
由表4可見,日糧中添加谷朊粉蠶蛹酶解發酵復合肽能顯著影響斷奶仔豬黏膜形態,試驗組十二指腸、空腸和回腸絨毛高度分別比對照組提高7.34%(P<0.05),7.48%(P<0.05)和10.98%(P<0.05)。試驗組十二指腸、空腸和回腸隱窩深度分別比對照組降低9.36%(P<0.05),2.18%(P>0.05)和10.19%(P<0.05)。
3.1對生產性能的影響 仔豬斷奶應激引起小腸組織學上的顯著變化(如絨毛萎縮和隱窩增生)造成了消化和吸收能力的下降,并最終導致腹瀉,造成生長速度下降。黃冠慶等[1]就甘氨酸-L-谷氨酰胺對斷奶仔豬的生長性能影響進行研究,結果表明,在21日齡斷奶仔豬日糧中添加0.25%甘氨酸-L-谷氨酰胺可顯著提高仔豬體重、采食量和飼料轉化率,能降低斷奶仔豬腹瀉率。肖英平等[2]研究表明谷氨酰胺能顯著提高斷奶仔豬生長性能和營養物質表觀消化率。本次研究表明,谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽能顯著提高斷奶仔豬日增重,降低料重比,與上述研究者的結果具有一致性。酶解發酵肽富含谷氨酰胺、谷氨酰胺二肽,以及其他活性小肽和益生菌,這有利于提高斷奶仔豬的生產性能。
3.2對腸道內容物菌群的影響 谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽是經酶解和多種微生物發酵,經低溫干燥而成,富含乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢桿菌,有利于調控動物腸道有益微生物菌群。乳酸桿菌是腸道中重要的優勢有益菌,具有維持腸道微生態平衡、拮抗腸道條件致病菌(如大腸桿菌)、提供營養、增強機體免疫功能,尤其當機體處于應激狀態時(如斷奶等),對機體有明顯的防御和保護作用[3]。研究表明,在仔豬斷奶階段添加益生菌能夠調控腸道菌群,糾正腸道微生態失衡,促進其生長發育[4-5]。Dong 等[6]以及謝全喜等[7-8]研究也發現,飼喂益生菌可以顯著降低斷奶仔豬糞便中大腸桿菌的數量,提高生產性能。本試驗結果表明,谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽可以顯著提高盲腸和結腸乳酸桿菌數量,對有益菌增殖具有較好效果。與對照組相比,谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽可顯著降低盲腸和結腸中大腸桿菌數量,具明顯抑制病原菌效果。
3.3對小腸黏膜形態的影響 腸黏膜結構和形態的完整是保證機體營養物質消化吸收的基礎,斷奶應激對仔豬腸黏膜形態有很大影響, 導致仔豬小腸絨毛萎縮和隱窩加深,使腸黏膜結構遭到破壞[9]。研究表明,飼料添加谷氨酰胺能夠改善幼齡哺乳動物的腸道生理功能[10]。谷氨酰胺是機體中含量最豐富的游離氨基酸,在斷奶、受傷和疾病感染等應激條件下被認為是一種條件性必需氨基酸[11],腸道是利用谷氨酰胺和谷氨酸最多的器官,而G1n 和G1u也是腸道主要的能源物質[12-13]。肖英平等[2]和劉濤等[14]的試驗結果表明,日糧中的谷氨酰胺對仔豬小腸細胞增殖和維持腸道正常形態具有重要作用。谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽富含G1n和G1u,本研究結果與上述結果一致,日糧添加谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽能顯著提高斷奶仔豬十二指腸、空腸和回腸絨毛高度降低十二指腸、空腸和回腸隱窩深度。
日糧中添加谷朊粉蠶蛹酶解發酵肽能顯著影響斷奶仔豬黏膜形態和腸道菌群,提高斷奶仔豬的生產性能,能明顯緩解仔豬的斷奶應激。