多頻次機(jī)采對(duì)血小板計(jì)數(shù)的影響

單玉 單曉麗 白雪蓮

【摘 ?要】目的：臨床檢驗(yàn)應(yīng)用血細(xì)胞分析儀對(duì)血小板計(jì)數(shù)，對(duì)影響血小板計(jì)數(shù)的相關(guān)因素進(jìn)行分析。方法：選取2018年3月～2018年12月期間進(jìn)行健康體檢者60例，采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，同時(shí)采用手工計(jì)數(shù)法進(jìn)行檢測(cè)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果：全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板，放置10分鐘血小板數(shù)明顯高于立刻檢測(cè)血小板數(shù)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），之后1、2、4小時(shí)血小板數(shù)無顯著性差異（P>0.05），放置8小時(shí)后血小板數(shù)明顯低于放置10分鐘血小板數(shù)（P<0.05）。應(yīng)用手工法測(cè)定血小板，血小板數(shù)在立刻檢測(cè)和放置 10分鐘、1、2、4小時(shí)時(shí)血小板數(shù)差異不明顯（P>0.05），放置8小時(shí)后血小板數(shù)明顯降低，低于其它時(shí)間的血小板數(shù)（P<0.05）。MCV大于70fl時(shí)，兩種檢測(cè)方法對(duì)血小板計(jì)數(shù)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;MCV小于70fl時(shí)，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)明顯高于手工法檢測(cè)結(jié)果，差異明顯（P<0.05）。結(jié)論：全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀對(duì)血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性，同標(biāo)本放置時(shí)間、紅細(xì)胞體積相關(guān)，必要需要重新采血，或者是采取手工計(jì)數(shù)。??對(duì)血小板計(jì)數(shù)的影響考慮小紅細(xì)胞和血小板數(shù)的絕對(duì)增加。

【關(guān)鍵詞】血細(xì)胞分析儀;血小板計(jì)數(shù);影響因素

【中圖分類號(hào)】R181.3+2 ??【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A???【文章編號(hào)】1004-7484（2019）10-0168-01

前言

血小板計(jì)數(shù)對(duì)血栓、出血性疾病和血小板減少性疾病的診斷與治療有重要的參考價(jià)值。如今各醫(yī)療單位均采用自動(dòng)化的血液分析儀進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，其對(duì)于血小板數(shù)及形態(tài)正常的標(biāo)本結(jié)果比較可靠，但對(duì)于血小板減少和/或紅細(xì)胞形態(tài)異常者，所得結(jié)果誤差甚大，這里對(duì)血液分析儀血小板計(jì)數(shù)的影響因素進(jìn)行探討。

血小板來自骨髓的巨核細(xì)胞，體積較小，直徑2～4微米，壽命約～11天。正常人血小板約有2/3在外周血循環(huán)，1/3滯留在脾臟;衰老的血小板主要在脾臟清除，也有少量在肝臟清除。血小板在止血，血栓形成方面有重要的作用，如血小板磷脂參與多種凝血因子的活化等。血小板具有粘附、聚集、釋放等功能[1]。當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷時(shí)反應(yīng)迅速，首先粘附于損傷之處，繼而聚集，形成凝塊并釋放多種促凝或血管活性物質(zhì)使血栓形成從而達(dá)到止血的目的。另外，血小板還具有促進(jìn)纖維蛋白溶解的作用。血小板的量和質(zhì)發(fā)生改變時(shí)，可以導(dǎo)致出血，如血小板<50X109/L時(shí)即容易有出血傾向，<20X109/L則易發(fā)生嚴(yán)重出血。血小板檢查結(jié)果易受多種因素影響，也和操作技術(shù)熟練有關(guān)。

1? 檢測(cè)前因素

1.1 抗凝劑影響 近年來許多國(guó)家的儀器血液檢查都已改用EDTA抗凝靜脈血，它是一種鈣螯合劑，常用的有二鈉鹽、二鉀鹽，鉀鹽溶解度大，與血混合后，抗凝效果較好，結(jié)果較可靠。但如有紅細(xì)胞碎片則易與血小板混淆，有時(shí)也可引起非特異性血小板凝集，導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)減少。另外，抗凝劑（稀釋液）一定要經(jīng)常保持新鮮，隨時(shí)配置，防止酸、堿及臟物污染，以致使血小板破壞，影響計(jì)數(shù)。關(guān)于EDTA抗凝劑的使用，劉健等研究認(rèn)為靜脈血4ml分別加入EDTA-K2。

和EDTA-K3抗凝試管中各2ml，其檢測(cè)結(jié)果均無顯著性差異。還有研究表明若將丁胺卡那霉素在抽血前或抽血后15min內(nèi)以濃度為5mg/ml血加入，其血小板數(shù)在室溫4h內(nèi)可保持相對(duì)穩(wěn)定，既可保持血細(xì)胞形態(tài)穩(wěn)定又利于血小板準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。

2 對(duì)象與方法

2.1 對(duì)象? 選取2018年3月～2018年12月期間進(jìn)行健康體檢者60例，其中男32例，女28例，年齡6～78歲，平均年齡50.5±2.5歲。

2.2 方法? 采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，同時(shí)采用顯微鏡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板;應(yīng)用血小板稀釋液配制，清洗液，EDTA-K2抗凝劑，瑞氏染液。抽靜脈血2ml加入抗凝劑抗凝管中混勻，嚴(yán)格按儀器說明進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)在1小時(shí)內(nèi)完進(jìn)行。手工法：采靜脈血2ml，手工計(jì)數(shù)3次取平均值[2]。

2.3 統(tǒng)計(jì)方法? 采用SPSS20.0軟件時(shí)行數(shù)據(jù)處理分析，計(jì)量資料采用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，p<0.05差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 對(duì)血小板計(jì)數(shù)結(jié)果于不同時(shí)間的相關(guān)性進(jìn)行對(duì)比，儀器法檢測(cè)，立即檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)（123.15±45.98）X109/L，10分鐘（166.32±45.35）X109/L，1h時(shí)（168.45±46.72）X109/L，2小時(shí)（168.22±46.92）X109/L，4小時(shí)（167.13±47.23）X109/L，8小時(shí)（134.55±51.36）X109/L;手工法檢測(cè)，立即檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)（164.20±44.30）X109/L，10分鐘（165.26±45.08）X109/L，1h時(shí)（164.49±45.68）X109/L，2小時(shí)（164.96±46.65）X109/L，4小時(shí)（162.84±46.95）X109/L，8小時(shí)（148.80±45.92）X109/L。

全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板，放置10分鐘血小板數(shù)明顯高于立刻檢測(cè)血小板數(shù)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），之后1、2、4小時(shí)血小板數(shù)無顯著性差異（P>0.05），放置8小時(shí)后血小板數(shù)明顯低于放置10分鐘血小板數(shù)（P<0.05）。應(yīng)用手工法測(cè)定血小板，血小板數(shù)在立刻檢測(cè)和放置 10分鐘、1、2、4小時(shí)時(shí)血小板數(shù)差異不明顯（P>0.05），放置8小時(shí)后血小板數(shù)明顯降低，低于其它時(shí)間的血小板數(shù)（P<0.05）。

3.2 對(duì)平均紅細(xì)胞體積與計(jì)數(shù)結(jié)果之間的相關(guān)性進(jìn)行比較，平均紅細(xì)胞體積（MCV）大于70fl時(shí)，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)（88.92±90.42）X109/L，手工法（83.22±48.93）X109/L;MCV小于70fl時(shí)，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)（192.33±108.86）X109/L，手工法（102.44±86.98）X109/L;MCV大于70fl時(shí)，兩種檢測(cè)方法對(duì)血小板計(jì)數(shù)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;MCV小于70fl時(shí)，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)明顯高于手工法檢測(cè)結(jié)果，差異明顯（P<0.05）。

4 討論

由于血小板計(jì)數(shù)的誤差較大，計(jì)數(shù)時(shí)必須嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，盡量減少誤差。特別是血細(xì)胞分析儀法，由于其影響因素多，要密切注意觀察直方圖的變化。如果直方圖出現(xiàn)異常，提示此結(jié)果不可信，必須采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法重新計(jì)數(shù)后報(bào)告結(jié)果。

稀釋液必須符合要求稀釋液必須新鮮、潔凈，無雜物和細(xì)菌污染。定期檢查稀釋液的質(zhì)量，檢測(cè)前應(yīng)先做稀釋液空白計(jì)數(shù)，如果計(jì)數(shù)值為零時(shí)方可使用。優(yōu)質(zhì)的血小板稀釋液必須具備以下條件。能有效抑制凝血。迅速固定血小板，防止血小板聚集和形態(tài)變化。溶血性稀釋液要能完全破壞紅細(xì)胞。組成簡(jiǎn)單并易于保存，不利于細(xì)菌生長(zhǎng)[3]。

所用器材必須校準(zhǔn)、潔凈、干燥。采血、計(jì)數(shù)均應(yīng)規(guī)范，避免血小板激活或破壞。血小板懸液充入計(jì)數(shù)室后必須靜置15min再計(jì)數(shù)，并在采血后1h內(nèi)完成計(jì)數(shù)。時(shí)間過短或過長(zhǎng)則可導(dǎo)致血小板未完全下沉或失去光澤，使計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。顯微鏡下觀察時(shí)的光線要適中，并注意與細(xì)胞碎片、灰塵、微生物等鑒別[4]。計(jì)數(shù)前必須輕輕搖動(dòng)血小板懸液2min或200次以上，但用力不宜過大，以免造成血小板破壞或產(chǎn)生氣泡，引起計(jì)數(shù)誤差。

及時(shí)核準(zhǔn)血小板計(jì)數(shù)結(jié)果，由經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員及時(shí)核準(zhǔn)血小板計(jì)數(shù)結(jié)果。用同1份血標(biāo)本制備良好的血涂片，觀察血小板數(shù)量、形態(tài)和分布情況，進(jìn)行核準(zhǔn)。用血小板計(jì)數(shù)的參考方法核準(zhǔn)計(jì)數(shù)結(jié)果。每份標(biāo)本最好做2次計(jì)數(shù)，若2次計(jì)數(shù)誤差小于10%，取其均值報(bào)告;若計(jì)數(shù)誤差大于10%，應(yīng)做第3次計(jì)數(shù)，取2次相近結(jié)果的均值報(bào)告。

參考文獻(xiàn)

[1]鐘紅梅.血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)的影響因素分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，09（5）：637-638.

[2] 楊健.血液分析儀測(cè)定血小板計(jì)數(shù)的影響因素研究[J].臨床合理用藥雜志，2013，6（27）：14-15.

作者簡(jiǎn)介：?jiǎn)斡瘢ǔ錾暝?）：1982.4.17?，性別：女，民族：漢族，籍貫：山東菏澤，學(xué)歷：大學(xué)本科，職稱：?主治醫(yī)師。