妊娠期糖尿病和妊娠期高血壓患者血清IGFBP-3、Lp-PLA2對(duì)胎兒生長發(fā)育的影響

陶麗靜 ，李小花，朱妙珊

(惠州市第二婦幼保健院檢驗(yàn)科,廣東惠州 516001)

妊娠期糖尿病(GDM)是指孕婦妊娠期間新確診的糖尿病，我國GDM的發(fā)生率約為5%[1]。GDM孕婦羊水過多、巨大兒、新生兒低血糖等發(fā)生率增加，對(duì)孕產(chǎn)婦及新生兒的負(fù)面影響較大[2]。妊娠期高血壓(HDCP)是妊娠20周后出現(xiàn)血壓≥140/90 mm Hg，我國發(fā)生率約9%，病理生理改變基礎(chǔ)為血管的內(nèi)皮細(xì)胞受損進(jìn)而發(fā)生功能障礙[3]。GDM、HDCP的發(fā)生嚴(yán)重影響孕產(chǎn)的健康、胎兒及新生而的生長發(fā)育。人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)由位于染色體7p12.3的 IGFBP-3編碼，蛋白合成主要發(fā)生在肝臟，以依賴或不依賴胰島素樣生長因子的方式調(diào)節(jié)機(jī)體的生長發(fā)育，有研究發(fā)現(xiàn)臍血內(nèi)IGFBP-3的水平與新生兒體質(zhì)量呈正相關(guān)[4]。人脂蛋白相關(guān)磷脂酶 A2(Lp-PLA2)蛋白主由位于染色體6p12.3的PLA2G7基因編碼，與脂代謝紊亂、炎性反應(yīng)的發(fā)生密切相關(guān)[5]。有研究指出孕產(chǎn)婦血清Lp-PLA2的水平不僅反應(yīng)孕產(chǎn)婦的自身健康狀況，與新生兒的生長發(fā)育也密切有關(guān)[6]。此次研究，通過檢測(cè)GDM、正常妊娠及HDCP 3組妊娠早、中、晚及足月分娩時(shí)新生兒臍血中IGFBP-3、Lp-PLA2的表達(dá)，研究檢測(cè)結(jié)果與新生兒體質(zhì)量的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年4月到2019年3月來本院進(jìn)行分娩的90例足月孕婦納入本次課題研究，其中GDM組30例、正常妊娠組30例、HDCP組30例。GDM診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)美國糖尿病協(xié)會(huì)2011年的最新GDM診斷指南，患者妊娠期間首次發(fā)現(xiàn)糖尿病，且糖耐量測(cè)試患者兩次或兩次以上空腹血糖≥5.8 mmol/L，并于產(chǎn)后恢復(fù)。正常妊娠組孕婦身體質(zhì)量指數(shù)≤24，無妊娠并發(fā)癥及其他內(nèi)外科疾病。HDCP診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)第七版《婦產(chǎn)科學(xué)》診斷指南，妊娠20周后孕婦首次出現(xiàn)舒張壓≥90 mm Hg和(或)收縮壓≥140 mm Hg。GDM組：孕婦年齡25～41歲、平均(30.34±5.12)歲，胎齡37～41周、平均(39.11±1.98)周。正常妊娠組：孕婦年齡25～39歲、平均(28.12±4.77)歲，胎齡37～40周、平均(38.25±1.52)周。HDCP組：孕婦年齡25～40歲，平均(29.35±4.93)歲，胎齡37～40周、平均(38.97±1.65)周。入選對(duì)象均為初產(chǎn)婦，簽署實(shí)驗(yàn)相關(guān)知情同意書，并通過醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審批。3組的年齡、孕周等一般資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 所有研究對(duì)象在產(chǎn)前檢查時(shí)分別于妊娠孕早期(第16～18周)、孕中期(第26～28周)、孕晚期(第37～40周)階段空腹抽取5 mL靜脈血，以及取5 mL新生兒的臍血，置于普通管中，待其凝固后，常溫4 000 r/min離心10 min，留取上清存于-20 ℃冰箱內(nèi)保存以待統(tǒng)一檢測(cè)。血清IGFBP-3、Lp-PLA2的檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，所用試劑盒購于上海廣銳生物技術(shù)有限公司，所有操作步驟嚴(yán)格遵循試劑說明書標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.3觀察指標(biāo) 檢測(cè)GDM組和正常妊娠組妊娠時(shí)早、中、晚期以及新生兒臍血中的血清IGFBP-3、Lp-PLA2表達(dá)水平。因HDCP于妊娠20周后才能診斷，檢測(cè)HDCP妊娠時(shí)中、晚期以及胎兒臍血中的血清IGFBP-3、Lp-PLA2的表達(dá)水平。比較3組孕婦的新生兒出生后體質(zhì)量以及妊娠結(jié)局。

2 結(jié) 果

2.13組孕婦不同時(shí)期血清IGFBP-3水平 GDM組妊娠早、中、晚期血清IGFBP-3的水平分別為(3 023.77±546.86)ng/mL、(3 190.03±594.96)ng/mL、(4373.89±704.61)ng/mL，3組間比較血清IGFBP-3水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=42.44，P=0.00)，其中兩兩比較結(jié)果發(fā)現(xiàn)，妊娠早、中期孕婦血清IGFBP-3的水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.30)，妊娠晚期血清IGFBP-3的表達(dá)與妊娠早、中期均有顯著差異(P=0.00)。正常妊娠組早、中、晚期血清IGFBP-3的水平分別為(3 013.96±520.91)ng/mL、(3 172.04±554.72)ng/mL、(3 901.75±649.74)ng/mL，3組間比較血清IGFBP-3的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=20.16，P=0.00)，其中兩兩比較結(jié)果發(fā)現(xiàn)，妊娠早、中期孕婦血清IGFBP-3的水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.29)，妊娠晚期血清IGFBP-3的與妊娠早、中期比較，異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.00)。HDCP組中、晚期血清IGFBP-3的水平分別為(3 129.27±494.37)ng/mL、(3 497.04±541.23)ng/mL，2組間比較血清IGFBP-3的水平水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.75，P=0.01)。妊娠早期，GDM組和正常妊娠組血清IGFBP-3的水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.07，P=0.94)。妊娠中期，3組血清IGFBP-3的水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=0.10，P=0.91)。妊娠晚期，3組血清IGFBP-3的水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=14.31，P=0.00)，見圖1。

圖1 3組孕婦不同時(shí)期血清IGFBP-3表達(dá)水平

2.23組孕婦不同時(shí)期血清Lp-PLA2水平 GDM組妊娠早、中、晚期血清Lp-PLA2的水平分別為(140.15±15.47)ng/mL、(221.36±28.69)ng/mL、(268.08±40.65)ng/mL，3組間比較血清Lp-PLA2的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=52.67，P=0.00)，其中兩兩比較結(jié)果發(fā)現(xiàn)，妊娠早、中、晚期孕婦血清Lp-PLA2的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。正常妊娠組早、中、晚期血清Lp-PLA2的水平分別為(136.77±15.07)ng/mL、(154.93±21.29)ng/mL、(178.55±22.47)ng/mL，3組間比較血清Lp-PLA2的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=33.31，P=0.00)，其中兩兩比較結(jié)果發(fā)現(xiàn)，妊娠早、中、晚期孕婦血清Lp-PLA2的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HDCP組中、晚期血清Lp-PLA2的水平分別為(255.48±35.17)ng/mL、(315.80±43.60)ng/mL，血清Lp-PLA2的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=34.78，P=0.00)。妊娠早期，GDM組和正常妊娠組血清Lp-PLA2的水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.856，P=0.396)。妊娠中期，3組血清IGFBP-3的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=20.84，P=0.00)。妊娠晚期，3組血清Lp-PLA2的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=25.25，P=0.00)，見圖2。

圖2 3組孕婦不同時(shí)期血清Lp-PLA2表達(dá)水平

2.33組孕婦新生兒臍血中的IGFBP-3、Lp-PLA2的表達(dá)水平 GDM組、正常組、HDCP組新生兒IGFBP-3的水平分別為(1 303.76±262.41)ng/mL、(892.83±193.51)ng/mL、(617.41±170.88)ng/mL，3組間比較臍血中IGFBP-3的水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=29.52，P=0.00)，其中兩兩比較結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GDM組、正常組、HDCP組新生兒臍血中IGFBP-3的水平比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。GDM組、正常組、HDCP組新生兒Lp-PLA2的水平分別為(18.19±6.39)ng/mL、(16.52±4.81)ng/mL、(19.73±7.99)ng/mL，3組間比較臍血中IGFBP-3的水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.81，P=0.84)，其中兩兩比較結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GDM組、正常組、HDCP組新生兒臍血中IGFBP-3的表達(dá)均無顯著差異(P>0.05),見圖3。

圖3 3組孕婦新生兒臍血中的IGFBP-3、Lp-PLA2的表達(dá)水平

組別n出生體質(zhì)量(x±s,g)正常體質(zhì)量兒[n(%)]低體質(zhì)量兒[n(%)]巨大兒GDM組304 303.129±213.7324(80.00)1(3.33)5(16.67)c正常組303 142.18±171.5329(96.67)a0(0.00)1(3.33)HDCP組302 297.19±193.0323(76.67)7(23.33)b0(0.00)F25.616.4112.637.50P0.000.040.000.02

注：與正常組比較，aP<0.05；與HDCP組比較，bP<0.05；與GDM組比較，cP<0.05

2.43組孕婦新生兒出生體質(zhì)量比較 GDM組新生兒體質(zhì)量顯著重于正常組及HDCP組(P<0.05)，巨大兒的出生率也明顯高于正常組及HDCP組(P<0.05)，HDCP組低體質(zhì)量新生兒出生率明顯高于其他兩組(P<0.05)，正常組的正常體質(zhì)量新生兒出生率明顯高于其他兩組(P<0.05),見表1。

3 討 論

隨著人們生活水平的提高以及醫(yī)療水平的進(jìn)步，GDM及HDCP的發(fā)病率逐漸增長，若控制不佳會(huì)影響孕產(chǎn)婦健康狀況及新生兒的生長發(fā)育。引起GDM的發(fā)病因素有很多，如胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝紊亂、遺傳、免疫等[7]。HDCP的發(fā)病與血管內(nèi)皮受損導(dǎo)致的功能障礙、滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡、免疫炎癥等因素密切相關(guān)[8]。因此，妊娠期間及分娩后，尋求能反應(yīng)胎兒生長發(fā)育的有效生化指標(biāo)，能夠預(yù)測(cè)胎兒的生長發(fā)育情況，為及時(shí)采取有效的措施提供依據(jù)。

IGFBP-3是一種低分子的多肽類物質(zhì)，共含有264個(gè)氨基酸，是妊娠晚期IGF-1的最主要調(diào)節(jié)蛋白，由肝臟合成和分泌[9]。IGFBP-3對(duì)IGF-1的調(diào)節(jié)是雙向的，當(dāng)機(jī)體IGFBP-3濃度增高時(shí)，一方面過量的IGFBP-3與IGF-1結(jié)合成一個(gè)相對(duì)分子質(zhì)量約150×103的復(fù)合物，游離、發(fā)揮功能的IGF-1降低，從而細(xì)胞及組織的生長受抑制；另一方面IGFBP-3與IGFs結(jié)合后，IGF-1避免被酶類代謝消耗，半衰期延長，IGFs的作用增強(qiáng)，從而促進(jìn)細(xì)胞的生長及分化[10]。此外，IGFBP-3還可以通過不依賴IGFs的方式調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長發(fā)育。目前發(fā)現(xiàn)水解IGFBP-3的酶有激肽釋放酶樣絲氨酸蛋白酶、組織蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶[11]。本次研究發(fā)現(xiàn)，GDM、正常妊娠及HDCP的母血IGFBP-3的表達(dá)水平在妊娠早、中期表達(dá)比較無顯著差異，在妊娠晚期的表達(dá)具有顯著差異，說明IGFBP-3的水平主要在妊娠晚期合成，且GDM組的IGFBP-3水平高于正常組及HDCP組，HDCP組IGFBP-3的水平最低。此外，GDM組中新生兒臍血中IGFBP-3的水平最高、HDCP組最低。3組新生兒的體質(zhì)量比較發(fā)現(xiàn)，數(shù)據(jù)具有顯著差異，GDM組新生兒體質(zhì)量最大，HDCP組體質(zhì)量最低，且GDM組巨大兒的出生率也明顯高于其他兩組，HDCP組低體質(zhì)量新生兒出生率明顯高于其他兩組。這些數(shù)據(jù)表明妊娠晚期母血及臍血中IGFBP-3的水平可能影響新生兒的生長發(fā)育及參與巨大兒及低體質(zhì)量新生兒的出生。目前大部分研究主要側(cè)重于GDM孕婦中IGF系統(tǒng)的表達(dá)與胎兒出生情況的研究，本研究結(jié)果與國內(nèi)梁輝標(biāo)教授等人的結(jié)論也基本一致[12]。本研究還系統(tǒng)性地總結(jié)了HDCP孕婦血清與新生兒臍血內(nèi)IGFBP-3的表達(dá)，臨床評(píng)價(jià)價(jià)值更廣。

Lp-PLA2屬于血管特異性炎癥酶，由巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T細(xì)胞等分泌，與低密度脂蛋白(LDL)結(jié)合形成復(fù)合體儲(chǔ)存在體內(nèi)[13]。Lp-PLA2以不依賴于鈣離子的方式蛋白水解細(xì)胞內(nèi)氧化卵磷脂后，形成促炎介質(zhì)氧化型游離脂肪酸及溶血型卵磷脂，刺激炎癥因子及黏附分子，趨化單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等在血管內(nèi)膜的聚集，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮受損，參與HDCP的形成[14]。有研究發(fā)現(xiàn)Lp-PLA2是誘導(dǎo)2型糖尿病患者發(fā)生血管病變的重要因素。GDM中Lp-PLA2表達(dá)增加的可能原因是：GDM患者發(fā)生胰島素抵抗，且這種抵抗伴隨孕周的增長而加重。加重的胰島素抵抗反應(yīng)使得孕婦處于應(yīng)激狀態(tài)，激活機(jī)體的Lp-PLA2活性[15]。本次研究發(fā)現(xiàn)，GDM、正常妊娠及HDCP的母血Lp-PLA2的水平在妊娠早、中、晚期有顯著差異，且GDM組的Lp-PLA2水平高于正常組，HDCP組Lp-PLA2的水平最高。此外，GDM組、正常組、HDCP組新生兒臍血中IGFBP-3的表達(dá)均無顯著差異。3組新生兒的體質(zhì)量比較發(fā)現(xiàn)，HDCP組的低體質(zhì)量新生兒出生率明顯高于其他兩組。這些數(shù)據(jù)表明妊娠期血清Lp-PLA2的水平在一定程度可反映孕婦的健康狀態(tài)，可能以某種方式抑制新生兒的生長發(fā)育進(jìn)而導(dǎo)致低體質(zhì)量新生兒的發(fā)生。關(guān)于Lp-PLA2的研究，目前研究者們主要探討其與HDCP患者的關(guān)系及臨床意義，此次研究在HDCP中Lp-PLA2的結(jié)論與國內(nèi)楊智等結(jié)論基本一致[16]。此外，本研究進(jìn)一步探討了GDM孕婦及新生兒臍血中Lp-PLA2的意義及其對(duì)新生兒體質(zhì)量的影響。

妊娠晚期母血及臍血內(nèi)IGFBP-3對(duì)胎兒宮內(nèi)的生長發(fā)育及巨大兒的形成具有重要作用，母血Lp-PLA2的表達(dá)以某種方式抑制新生兒的生長發(fā)育進(jìn)而導(dǎo)致低體質(zhì)量新生兒的發(fā)生，具有一定的臨床評(píng)價(jià)價(jià)值。

4 結(jié) 論

本文報(bào)道了母血及臍血中IGFBP-3的表達(dá)、母血Lp-PLA2的水平與胎兒宮內(nèi)發(fā)育密切相關(guān)，具有臨床評(píng)價(jià)價(jià)值。以往側(cè)重在GDM探討IGFBP-3的表達(dá)、HDCP中探討Lp-PLA2的表達(dá)，此次研究，較為全面及系統(tǒng)的探討了在GDM、HDCP、正常孕婦及臍血中IGFBP-3、Lp-PLA2的水平及其對(duì)新生兒體質(zhì)量的影響。