黃芪多糖對(duì)胃癌術(shù)后輔助化療患者血清炎癥因子的影響及意義

張明明 張翠改 劉欣 李偉皓 高偉 隋愛霞 檀碧波

(河北省人民醫(yī)院 1檢驗(yàn)科，河北 石家莊 050051;2體檢中心;3功能科;4河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院特檢科;5河北省人民醫(yī)院腫瘤科;6河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院外三科)

胃癌的發(fā)病率、死亡率、復(fù)發(fā)率均高，是最常見的消化系統(tǒng)的惡性腫瘤之一，在男性惡性腫瘤死亡原因中占第二位，嚴(yán)重威脅著人民的健康〔1〕。根治性手術(shù)切除是目前治療胃癌的主要方法，但很多病人難以早期診斷，就診時(shí)多已經(jīng)處于進(jìn)展期，手術(shù)療效欠佳或失去手術(shù)的機(jī)會(huì)〔2〕，術(shù)后化學(xué)藥物治療在胃癌綜合治療中發(fā)揮了重要作用。但現(xiàn)有的化療藥物在抑制和殺傷腫瘤組織的同時(shí)，大多引起其他組織細(xì)胞的破壞和損傷，局部組織細(xì)胞變性壞死，出現(xiàn)炎癥反應(yīng)〔3〕。以中藥聯(lián)合治療胃癌患者，可以在保證化療藥物效果的同時(shí)減少毒副反應(yīng)，改善機(jī)體免疫功能，減輕炎癥反應(yīng)已成為目前的研究熱點(diǎn)，并取得了效果〔4〕。傳統(tǒng)中藥黃芪益氣補(bǔ)虛，適用于因化療后白細(xì)胞減少、免疫功能低下的腫瘤患者。黃芪多糖是黃芪的主要有效成分，在腫瘤治療中發(fā)揮了較好的作用〔5〕。但黃芪多糖是否能改善胃癌術(shù)后的炎性反應(yīng)報(bào)道較少。本研究旨在觀察黃芪多糖對(duì)接受術(shù)后輔助化療胃癌患者血清炎癥因子水平的影響及意義。

1 對(duì)象與方法

1.1受試人群 篩選行根治性切除手術(shù)、TNM分期為Ⅱ～Ⅲ期、給予SOX化療方案(奧沙利鉑+替吉奧，6～8個(gè)療程)的胃癌患者共120例，隨機(jī)分成黃芪多糖(250 mg/支，批準(zhǔn)文號(hào)220040086，天津賽諾制藥公司產(chǎn)品)高劑量治療組、低劑量治療組和單純化療組各40例。病例組中高劑量治療組在單純化療組開始使用奧沙利鉑時(shí)給予250 mg黃芪多糖加入5%葡萄糖注射液靜點(diǎn)，2次/d，共3 d；低劑量治療組在單純化療組奧沙利鉑開始使用時(shí)給予250 mg黃芪多糖加入5%葡萄糖注射液靜點(diǎn)，1次/d，共3 d；單純化療組采用單純術(shù)后化療，奧沙利鉑開始使用時(shí)給予5%葡萄糖注射液。高劑量治療組男25例，女15例，平均年齡(51.8±8.31)歲；低劑量治療組男24例，女16例，平均年齡(52.1±7.92)歲，單純化療組男24例，女16例，平均年齡(52.6±6.23)歲，排除其他系統(tǒng)疾病，如心腦血管疾病、肝腎疾病、代謝性疾病等。同時(shí)選取健康體檢者40例為健康對(duì)照組，性別年齡與化療患者相匹配，男24例，女16例，平均年齡(52.6±8.26)歲。

1.2主要儀器 美國貝克曼全自動(dòng)生化分析儀AU5821，上海賽默菲世爾Multiskan FC 酶標(biāo)儀，日本SYSMEX全自動(dòng)模塊式血液體液分析儀XN20，南京諾爾曼NRM411全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀。

1.3主要試劑 C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試劑盒為德國DiaSys公司產(chǎn)品，白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-10試劑盒購自美國R&D公司，其余試劑均為儀器原裝配套試劑，由醫(yī)院藥學(xué)部統(tǒng)一采購。

1.4檢測(cè)方法

1.4.1全血指標(biāo)檢測(cè) 病例組于化療開始前和化療結(jié)束后1 w，晨起空腹抽取乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血3 ml，檢測(cè)血液中白細(xì)胞總數(shù)，中性粒細(xì)胞絕對(duì)值，淋巴細(xì)胞絕對(duì)值。

1.4.2血清指標(biāo)的檢測(cè) 病例組于化療開始之前和化療結(jié)束后1 w，晨起空腹各抽取靜脈血5 ml，檢查血清中CRP、降鈣素原(PCT)、IL-6、IL-10水平變化。

1.4.3健康對(duì)照組指標(biāo)檢測(cè) 晨起空腹采靜脈血8 ml，5 ml放入促凝管中，3 ml置于EDTA抗凝管中，檢查項(xiàng)目同病例組。

1.4.4各指標(biāo)主要檢測(cè)方法 CRP在美國Beckman全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)，質(zhì)控品、定標(biāo)品為德國DiaSys公司配套產(chǎn)品。檢測(cè)范圍：0～350 mg/L。PCT在南京諾爾曼NRM411全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀上檢測(cè)，質(zhì)控品、定標(biāo)品為廠家配套產(chǎn)品。檢測(cè)范圍：0～150 ng/ml。試劑盒購自美國R&D公司，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)，檢測(cè)操作步驟完全按試劑盒說明書，在上海賽默菲世爾Multiskan FC 酶標(biāo)儀上測(cè)吸光度(A450 nm)。血清IL-6測(cè)定：IL-6試劑盒(美國R&D公司，批號(hào)：20170818)，批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<7%、批間CV<9%，檢測(cè)范圍：5.6～1 000.0 pg/ml。靈敏度：3.9 pg/ml,相關(guān)系數(shù)R在0.97以上。血清IL-10測(cè)定：IL-10試劑盒(美國R&D公司，批號(hào)：20171209)，板內(nèi)CV<9%、板間CV<11%，檢測(cè)范圍：12.5～800.0 pg/ml。靈敏度：3.12 pg/ml，相關(guān)系數(shù)R在0.95以上。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行t、F檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1各組血清炎癥因子水平及白細(xì)胞水平指標(biāo)比較 化療前4組血清IL-6、IL-10、CRP、PCT水平、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)無顯著差異(P>0.05)，見表1。

表1 各組血清炎癥因子水平及白細(xì)胞水平指標(biāo)比較

2.2不同劑量治療組化療前后血清炎癥因子水平及白細(xì)胞水平的比較 3個(gè)病例組化療后較化療前血清IL-6、CRP、PCT水平均明顯升高(P<0.001)，高劑量治療組血清IL-10水平、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)均明顯下降(P<0.05，P<0.01)。低劑量治療組、單純化療組血清IL-10水平、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯降低(P<0.001)，見表2。

表2 病例組化療前后血清炎癥因子水平及白細(xì)胞水平比較

2.3高劑量治療組、低劑量治療組和單純化療組化療后血清炎癥因子水平及白細(xì)胞水平的比較 化療后，高劑量治療組、低劑量治療組和單純化療組血清IL-6、CRP、PCT的水平逐漸上升，以高劑量治療組水平為最低，單純化療組水平為最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血清IL-10的水平、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)逐漸降低，以高劑量治療組水平為最高，單純化療組水平為最低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 高劑量治療組、低劑量治療組和單純化療組化療后血清炎癥因子水平及白細(xì)胞水平比較

與單純化療組比較:1)P<0.05；與低劑量治療組比較:2)P<0.05

3 討 論

由于大多數(shù)胃癌患者就診時(shí)已處于進(jìn)展期，單純手術(shù)很難達(dá)到根治效果。這些患者多伴有可見或不可見的轉(zhuǎn)移灶，術(shù)后輔助化療是保障綜合治療效果的重要手段，但化療藥物均對(duì)人體有一定的損傷，可導(dǎo)致機(jī)體的炎癥狀態(tài)〔6〕。因此，尋找有效藥物與化療同時(shí)應(yīng)用，改善機(jī)體的免疫功能及緩解炎癥作用是當(dāng)務(wù)之急。有研究報(bào)道，中藥可以使晚期肺癌瘤體縮小，生活質(zhì)量提高；可以使結(jié)直腸癌患者血清癌胚抗原(CEA)水平下降，T細(xì)胞亞群比例恢復(fù)〔7,8〕。可見中藥對(duì)于癌癥患者有良好療效。

黃芪是豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，有補(bǔ)氣固表、利尿解毒、排膿祛火，斂瘡生肌的功效〔9〕，其中的黃芪多糖是其主要生物學(xué)活性成分之一，在腫瘤治療、控制炎癥、調(diào)節(jié)免疫、對(duì)抗感染等方面有良好作用。有研究顯示黃芪多糖與化療聯(lián)合應(yīng)用，可以改善免疫功能、提高生活質(zhì)量〔10〕。本研究提示黃芪多糖的應(yīng)用明顯緩解了機(jī)體的炎癥反應(yīng)，對(duì)改善機(jī)體的整體狀態(tài)、促進(jìn)患者康復(fù)有益。

ILs是由淋巴、單核、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞、表皮細(xì)胞等非免疫細(xì)胞經(jīng)刺激而合成、分泌的，具有廣泛生物學(xué)活性，又稱為淋巴因子〔11〕。在炎癥反應(yīng)、抗感染調(diào)節(jié)方面有重要作用。IL-6在多種疾病時(shí)有明顯改變。IL-6上升的水平與腫瘤的發(fā)展變化及治療效果關(guān)系密切，可反映患者的病情變化〔12〕。IL-10是炎癥與免疫的抑制因子，發(fā)揮下調(diào)炎癥反應(yīng)、拮抗炎性介質(zhì)的作用。IL-10在腫瘤患者中表達(dá)下調(diào)，是反映腫瘤患者狀態(tài)的重要因子〔13〕。本研究結(jié)果證實(shí)化療加重了機(jī)體炎癥反應(yīng)，患者處于易感狀態(tài)。同時(shí)研究推測(cè)黃芪多糖抑制了機(jī)體的炎癥反應(yīng)，對(duì)機(jī)體的免疫功能有保護(hù)作用。

白細(xì)胞尤其是中性粒細(xì)胞，通過釋放多種酶類、細(xì)胞毒性效應(yīng)分子、花生四烯酸等，溶解細(xì)菌及組織碎片，趨化細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，吞噬殺滅異物等，對(duì)于抗炎，抵抗外來物質(zhì)入侵等方面有重要作用。化療藥物的應(yīng)用，使機(jī)體的骨髓增生功能受到抑制，導(dǎo)致白細(xì)胞尤其是中性粒細(xì)胞數(shù)量減少，使機(jī)體抗感染能力下降，抵抗力降低〔14〕。本實(shí)驗(yàn)可見黃芪多糖對(duì)于化療患者提高白細(xì)胞尤其是中性粒細(xì)胞水平是有作用的。

CRP是急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，可由IL-6等一系列細(xì)胞因子的刺激產(chǎn)生，是炎癥反應(yīng)、組織壞死和惡性腫瘤等的預(yù)測(cè)因子，其水平的升高降低與機(jī)體的炎癥狀態(tài)、惡性腫瘤的進(jìn)展密切相關(guān)，同時(shí)CRP濃度可預(yù)測(cè)惡性腫瘤的預(yù)后〔15〕。PCT反映了全身炎癥反應(yīng)的活躍程度，也是病情觀察和預(yù)后判斷的重要指標(biāo)〔16〕。正常人血清CRP和PCT的含量很少，但在炎癥急性期、惡性腫瘤、局部缺血、組織損傷等患者的血漿中，含量可以迅速并明顯增加。有研究證實(shí)PCT在乳腺癌、白血病等惡性腫瘤化療后顯著升高〔17,18〕。但CRP和PCT在中藥聯(lián)合化療過程中的變化報(bào)道尚少。本研究發(fā)現(xiàn)黃芪多糖對(duì)于化療患者減少炎癥反應(yīng)、改善免疫功能方面是很有價(jià)值的。

綜上，化療可使術(shù)后胃癌患者血清炎癥因子IL-6、CRP、PCT明顯上升，IL-10及白細(xì)胞尤其是中性粒細(xì)胞的水平明顯下降，不同劑量的黃芪多糖的應(yīng)用可以使患者的IL-6、CRP、PCT、IL-10水平及白細(xì)胞水平得到改善，尤其以高劑量的黃芪多糖效果最好，減輕了患者化療后炎癥反應(yīng)，有效緩解了患者的易感狀態(tài)，對(duì)患者后期康復(fù)起到積極的作用。但本研究例數(shù)較少，遠(yuǎn)期效果不甚明確，還有待深入研究。