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半夏及其偽品的鑒定方法簡論

2020-03-03 18:46:29孟姍姍
光明中醫 2020年3期
關鍵詞:方法

孟姍姍

作為傳統中藥材,半夏以干燥塊莖入藥,因其降逆止嘔、燥濕化痰、消痞散結等功效,在我國中醫藥兩千余年的歷史中,備受推崇[1]。近代以來,對半夏藥理藥性的研究更加深入,結果顯示,針對冠心病、高血脂、腫瘤、肝病等多種威脅現代人身體健康的疾病,其有重要的治療作用[2]。因此,我國半夏市場的需求量一直居高不下,同滯后的半夏栽培技術、減少的野生半夏資源等形成激烈矛盾,導致藥材市場中,大量半夏偽品混入其中,不僅影響了藥材市場的穩定,而且對半夏的用藥安全也有負面影響[3]。有鑒于此,近十年來,相關從業人員針對此種情況,不斷進行半夏及其偽品的鑒定研究。本文對此展開綜述,總結不同的半夏及其偽品的鑒定方法,以期為準確、快速地進行半夏鑒定提供參考。

1 鑒定半夏及其偽品的傳統方法

1.1 原植物形態鑒別半夏及偽品在原植物形態上,無論是葉片形狀還是佛焰苞片上,都有所不同。具體來說,半夏的植物葉片呈現出“卵圓形”或“披針形”。半夏偽品中,水半夏的植物葉片呈現出“戟狀長圓形”;而虎掌南星不僅葉柄比其余兩者都要長,最主要的植物葉片呈現“掌狀”。在佛焰苞片的形態上,半夏呈現“鼠尾狀”;水半夏呈現“長鞭狀”;虎掌南星呈現“線狀”[4]。因此,如果單從原植物形態上,半夏及其偽品是可以做到直觀區分的。

1.2 性狀鑒別在完整藥材中鑒定半夏及其偽品相對還是比較困難的。具體來說,半夏藥材形狀為“類球形”,表面白色且密布點狀根痕,頂端中央淺黃色有凹痕;水半夏藥材形狀為“長橢圓形”,表面根痕不明顯,芽痕凹陷似菊核;虎掌南星藥材形狀為“扁球形”,主塊莖周圍有虎類腳掌的小塊莖;犁頭尖藥材形狀為“圓錐形”,個體較小,表面有圓點狀根痕,頂端芽痕較大;山珠半夏藥材為“扁橢圓形”,表面白色有皺紋,頂端莖痕凹陷,周圍有小側芽[5]。總之,通過外觀性狀上鑒定半夏及其偽品十分依賴鑒定者的個人經驗,且鑒定結果只能作為初步參考,不能作為最終鑒定結果的主要依據。特別是現在市面上多為飲片,這就加深了半夏及其偽品鑒定的難度。

1.3 理化鑒定傳統半夏及其偽品的鑒定方法中,利用顯微鏡和色譜法的“理化鑒定”是相對較為科學的、具備標準的鑒定方法。楊俊寶等[6]論述了具體的物理鑒定方法,主要是通過顯微鏡觀察樣本的物理性質,針對鑒定樣本的草酸鈣針晶束和木栓細胞兩方面。其中,擁有整齊無散亂的、較長的草酸鈣針晶束的可以鑒定為半夏;草酸鈣針晶束呈現一半整齊、一半散亂,且相對較短的可以鑒定為虎掌南星;擁有散亂疊放的草酸鈣針晶束,且相對較粗的可以鑒定為水半夏。此外,“木栓細胞”是水半夏外皮所獨有的,無論是半夏還是虎掌南星的外皮中,均不會有殘存。馬偉光等[7]認為利用薄層色譜法可以從化學性質上區分半夏及其偽品。由于化學法所檢測的主要是樣本中的精氨酸,而在半夏與虎掌南星之間,精氨酸成分一致,無法區別。因此,僅能針對水半夏和山珠半夏。總的來說,盡管“理化鑒定”相對來說有明確的標準,減少了對鑒定者的個人經驗的依賴。但是,“理化鑒定”依然存在不小的缺點,對于半夏中摻雜偽品的鑒定較為困難。

1.4 光譜鑒定隨著“電化學指紋圖譜”的問世,一種更加直觀、簡便的半夏及其偽品的鑒定方法被研究出來。具體來說,王朋展等[8]認為可以通過“電子鼻”,以“氣味指紋”來進行半夏及其偽品的鑒定分析。這一研究為快速鑒別半夏及其偽品提供了一條新的途徑,甚至可以應用在不同產地的半夏藥材鑒定上。孟祥松[9]論述了另外一種半夏及其偽品的鑒定方法——“高效液相色譜法”。通過對半夏及其偽品中多類核苷類成分含量的檢測,可以有效鑒別半夏及其偽品。結果顯示,由于對比吸收峰的不同,通過高效液相色譜,能夠直觀看出是否摻偽。

2 鑒定半夏及其偽品的現代方法

2.1 蛋白質技術鑒定吳成麗[10]采用高效毛細管電泳 (HPCE) 鑒別半夏及水半夏,其中性提取液和堿性提取液蛋白的 HPCE 吸收峰有明顯的差異,且重復性良好,可有效鑒別兩者。對不同產地半夏進行蛋白質圓盤 IEF 電泳和薄層等電聚焦(IEF) 電泳比較,發現可將半夏與幾種近緣植物明顯區別開。

2.2 DNA 分子鑒定盧道會[11]認為DNA 條形碼ITS、rps16 序列可用于半夏及其易混品的 DNA 條形碼鑒別,mat K、trm L-trn F 序列可作為天南星科不同屬間 DNA 條形碼條形碼組合候選序列鑒別半夏及其鄰近屬植物,rpl32-trn L 序列可作為鑒別半夏及其易混品的DNA 條形碼候選序列。張雅琴[12]針對半夏與其偽品掌葉半夏RAPD 鑒別,發現利用引物 S10 和 S17 進行 RAPD-PCR 能將二者有效鑒別; 且進一步將 RAPD 分子標記片段 T350 轉化為 SCAR分子標記,亦可對二者進行快速有效鑒定。陳永蘭[3]詳細論述了其所設計的引物能夠特異性地擴增出半夏的目的 DNA,且適用于全國 9 個主要不同產地的半夏藥材的檢測及真偽鑒別。構建了 5 種半夏的 DNA 指紋圖譜,可獨自將 5 種材料分開,從而實現對半夏種質資源分子水平的鑒定。

3 小結

盧道會[14]認為,現代分子技術誕生以前,對半夏及其偽品的鑒定方法,主要采取了性狀鑒定、理化鑒定與光譜色相鑒定。為了加強鑒定效果,提升鑒定準確率,通常會采用聯合鑒定的方式。但是,這些傳統鑒定方法或多或少都存在一些弊端。例如,在性狀鑒定中,對鑒定樣本的完整性要求較高,且鑒定標準依賴鑒定者的個人經驗,鑒定結果受鑒定者主觀能動性影響,因此,“人為因素”對鑒定結果的干擾較大,鑒定結果準確率較低;在理化鑒定中,需要鑒定者能夠熟練操作顯微鏡,或者樣品的預處理過程相對復雜,費時費力。于此同時,化學檢測方法對一些半夏偽品并不適用,因此,理化鑒定范圍較小,同時檢測不夠便捷;光譜色相鑒定在傳統鑒定方法中探索出了一條新的路徑,但是光譜色相在鑒定過程中,樣品前處理、展開劑等都有可能干擾最終的鑒定結果。敬勇[15]認為,相比傳統鑒定方法,現代分子技術對于半夏及其偽品的鑒定具有獨特優勢。其中,蛋白質鑒定技術是現代半夏鑒定的重要指標之一;DNA分子鑒定應用DNA 條形碼技術,不僅效果好、準確率高,而且操作簡便、通用性高,可重復鑒定,在半夏及其偽品的鑒定中,發揮出積極的作用。

綜上所述,現代分子鑒定具有受干擾較小、有明確統一的鑒定標準、可實現鑒定結果的數據化等優點,且操作簡便,對摻偽品及摻偽量的量化研究有重要作用,值得進一步的推廣和研究。

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