乙肝病毒標記物陽性表型血清標本乙型肝炎病毒HBV-DNA臨床檢驗分析

蘇振華

摘要：目的 ?探討乙肝病毒標記物陽性表型血清標本在乙型肝炎病毒診斷中的應用。方法 ?選取2018年5月～2019年5月我院收治的乙肝病毒陽性患者100例作為實驗組，另選取同期我院健康體檢者100例作為對照組，采用酶聯免疫吸附法與PCR熒光定量法對兩組乙肝病毒標記物表型血清指標進行檢測，比較兩組陽性反應組合反應陽性率、HBV-DNA水平。結果 ?通過酶聯免疫吸附法檢驗，在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指標中可表現出11種陽性反應組合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應組合陽性率最高，其次為Presl、HBeAg、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應組合;實驗組HBV-DNA水平為（4.70±1.30）×104，對照組HBV-DNA水平為（0.80±0.10）×104，實驗組高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 ?乙肝病毒標記物表型血清標本檢測在乙型肝炎病毒中診斷的價值較高，可為臨床診斷提供科學依據。

關鍵詞：乙型肝炎病毒;乙肝病毒標記物表型;血清標本

中圖分類號：R737.33 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標識碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.04.061

文章編號：1006-1959（2020）04-0179-02

Abstract：Objective ?To investigate the application of hepatitis B virus marker positive phenotype serum samples in the diagnosis of hepatitis B virus.Methods ?100 patients with HBV-positive patients admitted to our hospital from May 2018 to May 2019 were selected as the experimental group，and another 100 healthy subjects from our hospital during the same period were selected as the control group.ELISA and PCR fluorescence quantitative methods were used the serum index of HBV marker phenotype was detected in the two groups，and the positive rate of combined positive reactions and HBV-DNA levels were compared between the two groups.Results ?By enzyme-linked immunosorbent assay，11 positive reaction combinations can be shown in Presl， HBsAb， HBsAg， HBeAg， HBeAb， HBcAb-IgM， HBcAb-IgG and other indicators， among which HBeAb， HBsAg， HBcAb-IgG positive combination positive highest，followed by Presl， HBeAg， HBsAg，and HBcAb-IgG positive reaction combinations;HBV-DNA level in the experimental group was（4.70±1.30）×104，and HBV-DNA level in the control group was（0.80±0.10）×104，the experimental group was higher than the control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion ?The detection of HBV marker phenotype serum samples is of higher diagnostic value in HBV，and it can provide scientific basis for clinical diagnosis.

Key words：Hepatitis B virus;HBV marker phenotype;Serum specimen

乙型病毒性肝炎（viral hepatitis type B）屬于一種臨床常見的肝臟炎性病變，嚴重威脅人們的健康，該病在全世界范圍內都有著較高的發病率，并且該病輻射年齡較廣，患者在發病后如果沒有采取及時有效治療措施，可能會導致疾病進一步惡化，進而導致肝癌與肝硬化發生。在臨床診斷中一般予以肝功能檢查，并且將血清病原學指標作為診斷依據，但依靠陽性表型指標無法準確反映患者體內乙肝病毒存在情況，同時也無法對疾病進展進行有效監測，臨床誤診、漏診率較高。患者常在出現確切癥狀后才會參與病理診斷，延誤最佳治療時機，預后較差，本研究主要探討乙肝病毒標記物陽性表型血清標本乙型肝炎病毒HBV-DNA臨床檢驗，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 ?選取2018年5月～2019年5月萬年縣人民醫院收治的乙肝病毒陽性患者100例作為實驗組，另選取同期我院健康體檢者100例作為對照組。實驗組男性52例，女性48例;年齡22～60歲，平均年齡（38.10±2.10）歲，對照組男性49例，女性51例;年齡21～61歲，平均年齡（39.10±2.20）歲。患者及家屬知情同意并簽署知情同意書，兩組性別、年齡比較，差異無統計學意義（P<0.05），有可比性。

1.2方法

1.2.1酶聯免疫吸附試驗檢測 ?采用KHBST-360酶標儀進行檢測，對Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指標進行檢測，所有試劑均根據試劑盒進行操作，對血清各項指標進行檢測。

1.2.2 PCR熒光定量法檢測 ?將血清標本放在PCR儀上進行測量，取患者血清標本，劑量為100 μl，對標本進行離心，離心時間設定為10 min，轉速設定為13000 r/min，將上清液進行去除，將25 μl的DNA進行溶合，再次離心10 s，轉速設定為2000 r/min，在沸水中維持10 min后再次進行離心，速率為13000 r/min，取上清液待檢測。給予擴增試劑，利用Taq酶、UNG進行充分混合，采用離心處理，時間為10 s，轉速設定為2000 r/min。對樣本進行加樣處理，在上述操作步驟中準備好標本，劑量為2 μl，轉速設定為2000 r/min，并將其放入PCR熒光儀中，擴增檢測，設置好相關參數進行檢測，循環參數為3 min，溫度為37℃，預變形參數為1 min，溫度為92℃，變性參數為5 s，溫度為92℃，應用熒光檢測參數為30 s，溫度為60℃，采用冷卻儀器，循環次數為40次，溫度為40℃。

1.3觀察指標 ?①陽性反應組合（Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG）陽性率、②HBV-DNA水平。

1.4統計學處理 ?采用SPSS 22.0統計學軟件進行數據分析。計量資料用（x±s）表示，行t檢驗;計數資料采用n（%）表示，行？字2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1陽性反應組合陽性比例及HBV-DNA水平 ?在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指標中可表現出11種陽性反應組合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應組合陽性率最高，其次為Presl、HBeAg、HBsAg、HBcAb-IgG;Presl、HBeAg、HBsAg陽性反應組合HBV-DNA水平最高，其次是HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應組合，見表1。

2.2兩組HBV-DNA水平比較 ?實驗組HBV-DNA水平為（4.70±1.30）×104，高于對照組的（0.80±0.10）×104，差異具有統計學意義（t=29.917，P=0.000）。

3討論

乙型肝炎發病率較高，其發病情況受到了臨床醫生廣泛關注[1]。目前臨床常采用酶聯免疫吸附法檢測乙肝五項指標[2]，但是這種檢測方式存在一定局限性，并且病毒復制水平較低，誤診率較高[3]。在具體的檢測過程當中聯合檢測HBV-DNA水平，有助于對乙肝病毒情況進行更加精確的鑒別。同時在其檢測基礎上利用PCR熒光檢測技術檢測，可以對乙肝病毒標記物表型HBV-DNA水平進行檢測，HBV-DNA在11種陽性組合當中都存在一定的陽性占比率，而對于乙型肝炎患者而言，其高復制性對患者威脅較大。

有研究表明[4]，患者病毒復制水平也能對乙型病毒肝炎的診斷提供依據，處于活動期的HBV-DNA水平高于非活動期。而在乙型肝炎病毒臨床診斷過程當中，僅僅對患者體內乙型肝炎病毒復制的情況進行排除并不能完全提高檢測效果，而利用乙型肝炎病毒復制檢測的陰性情況能夠進行彌補。在乙型肝炎的檢測過程當中，對患者病情發展進行動態觀察，可為臨床治療提供重要依據。

本研究結果顯示，在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指標中可表現出11種陽性反應組合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應組合陽性率最高。實驗組HBV-DNA水平為（4.70±1.30）×104，對照組HBV-DNA水平為（0.80±0.10）×104，實驗組高于對照組，差異具有統計學意義（P<0.05），表明HBV-DNA水平的檢測在乙型肝炎病毒診斷中有一定價值。

綜上所述，在乙型肝炎病毒診斷中乙肝病毒標記物表型血清標本的診斷價值較高，可為臨床診斷提供科學的依據。

參考文獻：

[1]馬梅香.乙肝病毒標記物陽性表型血清標本乙型肝炎病毒（HBV）-DNA臨床檢驗分析的應用效果評價[J].心理月刊，2018，（12）：99.

[2]王曉玲，苑玉聰，郝金翠，等.乙肝腎合劑辨證加減聯合常規西藥綜合治療乙型肝炎病毒相關性腎炎的臨床觀察[J].遼寧中醫雜志，2017，44（10）：2114-2117.

[3]徐茜茜，卓莉，楊悅，等.乙型肝炎病毒相關性腎炎不同年齡組患者的臨床病理特點[J].中國病毒病雜志，2016，6（3）：206-211.

[4]李根瑞，陳涓涓，謝正媛，等.云南省7934例農村育齡人群乙型肝炎病毒標記物血清學篩查檢測結果分析[J].中國預防醫學雜志，2017，18（1）：31-34.

收稿日期：2019-11-07;修回日期：2019-11-20

編輯/李國苗