PTK6 和c-erbB-2 在乳腺癌中的臨床應用價值

吳韶娜

（山西省長治市第二人民醫院，山西 長治）

0 引言

本研究采用非生物素EliVisionTMplus 二步法分別檢測PTK6 和c-erbB-2 的陽性表達率與臨床病理參數之間的關系以及二者之間的相關性，由于PTK6 蛋白和c-erbB-2 蛋白表達的相關性，很可能這些蛋白可以共同作為乳腺癌診斷及預后的標志物。

1 資料與方法

1.1 標本來源

標本來自廈門市某醫院（2003 年2 月至2008 年5 月）接受乳腺癌手術的乳腺癌病例。依據2012 WHO 乳腺癌分類標準進行組織學分類：非特殊性浸潤性導管癌116 例；對其進行組織學分級：Ⅰ級35 例，Ⅱ級63 例，Ⅲ級18 例。116例乳腺癌中86 例有淋巴轉移，30 例無淋巴結轉移。根據國際抗癌協會TNM 分期方案將乳腺癌分為：Ⅰ期40 例，Ⅱ期57 例，Ⅲ期19 例。另取癌旁乳腺組織52 例（距瘤邊緣5 cm）做對照。所有標本均經兩位病理科醫生確診。

1.2 檢測方法

所有標本經1 0% 中性福爾馬林固定，石蠟包埋，4 μ m 連續切片，采用二步法檢測：①石蠟切片脫蠟至水；②檸檬酸抗原修復液（0.01 M，pH6.0）對組織進行高壓加熱抗原修復；③滴加一抗工作液，4 ℃過夜，PBS沖洗3 次（3 min/ 次）；④滴加增強劑，室溫孵育20 min，PBS 沖洗3 次（3 min/ 次）；⑤滴加二抗，室溫孵育30 min，PBS 沖洗3 次（3 min/ 次）；⑥DAB 顯色、蘇木素復染、封片。用已知陽性標本作陽性對照；以PBS 代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判斷

所有切片均采用雙盲觀察，陽性百分率采用半定量判斷標準，即選5 個不同高倍視野，每個視野計數100 個細胞，計算出其中陽性細胞的百分率。陽性細胞數＜10% 為（-），10%～25%為（+），26%～50%為（++），＞50%為（+++）。臨床乳腺癌患者分子靶向治療常采用免疫組化法c-erbB-2+++作為評定標準。

1.4 統計學處理

采用SPSS 20.0 軟件進行數據統計，各組間率比較采用χ2檢驗，數據相關性分析采用Spearman 秩相關分析，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 PTK6、c-erbB-2 蛋白在乳腺不同組織學類型中的表達

如表1 所示，116 例浸潤性乳腺癌組織中，有68 例PTK6蛋白呈陽性表達，其陽性表達率為64.7%，而52 例乳腺癌旁組織中，有8 例蛋白陽性表達，陽性表達率為15.4%，結果提示，PTK6 蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達率顯著高于乳腺癌旁組織，差異有統計學意義（P＜0.05）；116 例浸潤性乳腺癌組織中，有57 例c-erbB-2 蛋白呈陽性表達，其陽性表達率為49.1%，52 例乳腺癌旁組織的陽性表達率為19.2%，結果提示，c-erbB-2 蛋白在乳腺癌組織中的陽性表達率顯著高于乳腺癌旁組織，差異有統計學意義（P＜0.05）。

表1 PTK6 和c-erbB-2 蛋白在乳腺不同組織學類型中的表達（n, %）

2.2 浸潤性乳腺癌中PTK6、c-erbB-2 蛋白陽性表達與臨床病理特征之間關系

如表2 所示，PTK6 蛋白陽性表達隨著組織學分級的增加而增高，組織學分級Ⅰ級和Ⅱ- Ⅲ級的陽性表達率分別為48.6% 和71.6%，經統計學處理，差異有統計學意義（P＜0.05），而在腫瘤直徑、年齡、臨床分期、淋巴結轉移以及ER、PR 受體分組之間差異無統計學意義。c-erbB-2蛋白陽性表達在組織學分級、臨床分期和淋巴結轉移分組之間差異有統計學意義（P＜0.05），而在其余幾項分組之間差異無統計學意義，見表2。

2.3 PTK6 與c-erbB-2 蛋白在浸潤性乳腺癌組織中表達的相關性分析

如表3 所示，在75 例PTK6 蛋白陽性表達的浸潤性乳腺癌組織中，c-e r b B-2 蛋白的陽性表達率為5 7.3%（4 3/7 5）；41 例PTK6 蛋 白 陰 性 表 達 的 浸潤性乳腺癌組織中，c-erbB-2 蛋白的陽性表達率為34.1%（14/41），有統計學意義（P＜0.05）。Spearman 相關分析表明二者密切相關（rs=0.222，P＜0.05），見表3。

3 討論

乳腺癌是女性中最常見的惡性腫瘤，乳腺癌發病率逐年上升，目前已成為我國女性發病率最高的惡性腫瘤，且有低齡化趨勢[1]。分子標志物在乳腺癌診斷、判斷預后和治療方案中的價值越來越受到人們的重視。愈來愈多的證據表明，HER 家族成員參與乳腺癌發生發展，而與c-erbB-2 有關聯的一些蛋白也成為了研究的熱點[2]。

表2 浸潤性乳腺癌組織中PTK6、c-erbB-2 蛋白陽性表達與臨床病理特征之間的關系（n, %）

表3 浸潤性乳腺癌組織中PTK6 蛋白與c-erbB-2 蛋白表達的相關性（n）

PTK6 在乳腺癌細胞和大約2/3 的原發性乳腺癌組織中表達升高，但在正常的乳腺上皮組織表達低或檢測不到，這表明PTK6 可能與乳腺組織癌變有關[3]。本研究進一步探討了PTK6 蛋白表達與c-erbB-2 蛋白表達之間的關系，經spearman 相關分析，結果顯示，PTK6 蛋白表達與c-erbB-2蛋白表達呈正相關，即隨著c-erbB-2 蛋白陽性率的增高，PTK6 蛋白陽性率亦增高，這也是為什么c-erbB-2 陽性表達的乳腺癌患者療效不佳的原因之一。

綜上所述，PTK6 蛋白和c-erbB-2 蛋白在乳腺癌中的表達較正常乳腺組織明顯增加，且與組織學分級有關，提示其可能在乳腺癌的發生、發展中起著重要的促進作用，PTK6蛋白和c-erbB-2 蛋白在乳腺癌中表達呈正相關，從而提示PTK6 蛋白可能是上調c-erbB-2 蛋白表達的一種激酶，在HER 表達的乳腺癌細胞的信號轉導中可能發揮重要的作用，因此在乳腺癌靶向治療中，PTK6 可能會成為細胞質治療靶點，PTK6 蛋白可能會成為乳腺癌新的標志物。但目前關于PTK6 在乳腺癌發生發展中的作用、預后意義以及與受體酪氨酸激酶家族的關系研究甚少，今后本研究小組將側重于PTK 與HER 受體的信號通路研究，可為乳腺癌的臨床治療開辟新的途徑。