牛羊品種改良胚胎繁殖技術

齊勒盼·朱力地別克　阿布力孜

一、影響牛羊品種改良胚胎繁殖技術應用效果的因素

在牛羊品種改良胚胎繁殖技術的實際應用中，胚胎質量、操作手段，以及供體、受體同期發情性等因素，均會對牛羊品種改良效果產生影響。在冷凍存儲、收集處理胚胎樣品時，因為胚胎本身的生產方式存在差異性，使得不同胚胎發育潛能、胚胎質量難以保障。繼而使得牛羊胚胎在移植后，不同母體其受胎率區別較大。所以為確保母牛、母羊可以正常受胎，相關人員應重視提供借助高質量牛羊胚胎，提高移植成功率。另外，胚胎在母體子宮內成長、發育的時候，母體子宮分泌、環境變化，以及供體、受體發情期是否同步，均會影響牛羊品種改良期間的胚胎繁殖情況。再者，牛羊品種改良胚胎繁殖技術在具體操作時，對人員技術要求較高。相關人員胚胎解凍、移植等操作的規范性與標準性，會直接影響胚胎移植的妊娠率，以及母體受胎率。

二、牛羊品種改良胚胎繁殖技術

在國家政策、資金的支持與引導中，新疆牛羊品種改良工作取得顯著成效。而牛羊品種改良胚胎繁殖技術，在實踐中，主要包括供體母牛、母羊，以及受體母牛、母羊的選擇、同期發情的有效控制、供體母牛母羊排卵處理等工作，以及受胎成功的胚胎存儲、回收、冷凍保存與胚胎質量檢測、移植等內容。

1、有效處理同期發情

牛羊品種改良胚胎繁殖技術中，有效處理同期發情屬于繁殖技術運用的基礎性工作。具體措施如下。首先，供體、受體選擇。在選擇供體母牛、牛羊時，為確保其妊娠率、胚胎移植的成功率，應挑選年齡在2到6歲的經驗性母羊及母牛。同時確保其品種的優良，從而肯定其育種價值，并且沒有遺傳、感染性疾病，遺傳特征明顯、性能穩定，身體較為壯碩，以及采食欲望強烈。而受體母牛與母羊的年齡應在2到5歲之間，保持著良好、穩定的發情周期，采食欲望同樣強烈。沒有生殖系統類的疾病，可以順利完成生產任務，且生產經驗豐富。

其次，健康檢查。供受體選擇完畢后，相關人員在實踐牛羊品種改良胚胎繁殖技術前，應對其進行全面的身體檢查，檢測其健康指標。然后定期記錄母羊、母牛發情時間，總結其發情規律。在正式移植胚胎前，為預防受體出現應激反應，應避免隨意更改其飼養位置。

發情期信息記錄完成后，可選擇供體母牛母羊、受體母牛母羊完成同期發情處理工作。

最后，同期發情處理。在此期間，相關人員在臨近排卵期、發情期后，借助P4、PGC、PMSG、LH等常用的外源性性激素，進行同期發情處理。上述外源性性激素中，由于PGC本身的溶解黃體能力較強，能夠提高供體母牛母羊、受體母牛母羊同期發情率，且使用效果明顯、性價比高，所以在牛羊胚胎繁殖技術運用中有著較強的實踐優勢。

2、供體的超排卵處理

供體的排卵處理時間，一般在母牛、母羊第一個發情周期內。相關人員在供體發情期內，選擇合適時間，通過注射促性腺激素，促進供體卵巢的成長發育，提高其排卵數量。而供體的超排卵處理環節，在牛羊品種改良胚胎繁殖期間，有助于提高供體母牛或母羊的胚胎數量。據了解，規范且標準的供體的超排卵處理后，供體排卵時，可回收10～15枚胚胎。若是胚胎數量少，不僅會導致胚胎回收難度大，還會影響受體受精率。

3、胚胎樣品采集

胚胎樣品采集，主要集中在供體母牛、母羊在成功受精后的一周內進行。在此期間，相關人員會在母牛或母羊在保定架正常綁定后，利用少許的普魯卡，對供體母牛、母羊的尾椎硬膜外腔區域進行麻醉處理，以便于減少供體不適感，確保胚胎收集的順利。需要注意的是，保定架應按照前高后低的方式擺放，前后距離應保持在18厘米。正式收集胚胎前，相關人員需在供體后期肢體、外陰衛生消毒后，借助開張器慢慢將供體子宮擴張開，并同步清理供體子宮內部粘液。然后借助兒通管，沖洗供體子宮，同時使用消毒、清潔完畢的錐形瓶，將沖洗液收集。

4、胚胎質量檢測

檢測胚胎質量前，相關人員應在提前將錐形瓶內的沖洗液靜置處理，在30分鐘后，使用高精度的實體顯微鏡，查找沖洗溶液內存有的胚胎，并記錄胚胎數量。然后將消過毒的習慣，將沖洗液吸取并移放至PBS保存滴液內。在沖洗溶液與滴液逐漸融合后，將其放置在200倍顯微鏡下分析滴液中的胚胎質量。之后結合現有的胚胎質量標準分級，將其劃分為A、B、C、D 等四個等級，并將其分開存放，再選出優質胚胎，用于牛羊品種改良中的胚胎繁殖。

5、胚胎的冷凍保存

牛羊品種改良胚胎繁殖技術中，胚胎的保存方式主要為冷凍保存。直接冷凍、常規冷凍、玻璃化冷凍等都屬于當前時期，牛羊胚胎的冷凍保存方式。在哺乳類動物胚胎保存中，常規冷凍應用較為廣泛。相關人員可將選出的優質胚胎，及時放置在冷凍液中，在平衡放置一段時間后，根據每分鐘0.5攝氏度速度，將試管溫度調至零下35攝氏度，并迅速投入液氮罐保存。但選擇此種冷凍方式時，還應將糖類、丙乙醇、乙二醇等常用防凍劑添加到胚胎中。

而直接冷凍法與常規冷凍法較為相同，其區別在于冷凍劑的選用，該冷凍方式，多選擇乙二醇。除此之外，玻璃化冷凍法在實際運用中，是將提前收集的優質胚胎，靜置在玻璃冷凍液之后，直接放置在液氮罐內保存。這一冷凍過程，可直接繞過胚胎的冰晶化時期，直接將液態胚胎調整至玻璃化狀態。無需對胚胎進行緩慢降溫處理，有助于簡化胚胎冷凍環節，高效預防胚胎冷凍存儲期間，出現損傷現象，影響牛羊胚胎的成功率。

6、胚胎的移植處理

移植胚胎時，應全面檢查受體母牛身體狀態，確保受體母牛、母羊卵泡直徑在20 毫米左右。一般情況下，受體母牛、母羊在發情處理后的36 小時后，會逐漸產生排卵現象。另外，正式移植胚胎移植時，還應檢查受體母牛黃體直徑是否大于15 毫米，且凹凸感明顯。然后使用已消毒習慣，分三次吸取PBS保存液中的胚胎，并將其輸送至受體牛母牛或母羊的子宮內部，取出移植腔。

（作者單位：1.834600 新疆塔城地區額敏縣喀拉也木勒鎮畜牧獸醫站;2.830001 新疆農業大學動物科技學院）