玻璃體腔注射TA對光化學誘導大鼠BRVO模型血管生成及Notch通路的影響

韓莎莎, 張賀鵬, 李躍峰

0引言

視網膜靜脈阻塞(retinal vein occlusion，RVO)是視網膜血管病變造成的眼部血管病，影響視力，嚴重時使患者失明[1]，視網膜分支靜脈阻塞(branch retinal vein occlusion，BRVO)是其中一種類型，可通過治療緩解癥狀。曲安奈德(triamcinolone acetonide，TA)屬于腎上腺皮質激素類藥物，因抗炎和抗過敏作用強且時間久在眼科疾病中應用廣泛，可減少BRVO患者眼內新生血管生成[2]，但具體作用機制尚不明確。新生血管受多種基因調控，其中血管內皮細胞生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是作用最強、特異性最高的血管生長因子之一，幾乎參與血管形成的所有步驟[3]；Notch信號通路在血管生成中的作用已明確，可促進血管生成[4]，能促進VEGF激活從而發揮促血管生成作用等[5]。本研究通過構建化學誘導大鼠BRVO模型，觀察TA對BRVO大鼠的新生血管的抑制作用并探討其作用機制，旨在揭示其抑制血管新生的分子機制。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1實驗動物雄性SD大鼠購自廣州醫科大學實驗動物中心，許可證號：SYXK(粵)2016-0158，體質量200～230g，SPF級。所有大鼠均飼養于溫度23℃±2℃、濕度50%±10%，光照/黑暗12h/12h環境中，均自由飲水飲食。所有實驗均經本院動物實驗倫理委員會批準。

1.1.2試劑與儀器眼內灌注液(美國Alcon，進口注冊標準：YZB/USA 0661)，孟加拉紅鈉鹽(上海北諾生物科技有限公司，貨號：330000-1G)，戊巴比妥鈉緩沖液(吉林省神經精神病醫院制藥廠，國藥準字：H1400546)，40mg/mL TA注射液(昆明積大制藥股份有限公司，國藥準字：H53021604)，熒光素鈉注射液(廣州白云山明興制藥有限公司，國藥準字：H44023401)，勻漿緩沖液(上海谷研實業有限公司，貨號：GOY-0993)，一抗VEGF、血管內皮生長因子受體(VEGF receptor 2，VEGFR2)、Notch1、Jagged1、DLL4、GADPH，二抗羊抗兔、羊抗鼠(英國abcam)。……