雙七他克林對青光眼模型大鼠視神經的保護作用

方家華，宋小云，胡 蓉，劉俊賢，許銀娥

0引言

青光眼是一種不可逆致盲性眼病，可導致視神經萎縮甚至失明，視網膜神經節細胞是受損的主要靶細胞，其軸突組成視神經。目前針對青光眼的主要治療方法是降低眼壓。但是，有研究顯示，即使患者眼壓降低到正常范圍內，視神經損害仍然繼續發展，因此需要給予神經保護治療[1]。相對于單一靶點藥物，多靶點藥物具有更好的神經保護作用。雙七他克林是一種人工合成的多靶點藥物，具有抑制膽堿酯酶、N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid，NMDA)受體、一氧化氮合酶、鈣通道等多種藥理作用[2]。前期實驗結果顯示，雙七他克林通過抑制NMDA受體抑制谷氨酸引起的視網膜神經節細胞損傷[3-4]，體內實驗證實雙七他克林對大鼠視網膜缺血再灌注損傷具有保護作用[5]。美金剛胺是一種NMDA受體抑制劑，在美國已進入青光眼視神經保護的Ⅲ期臨床試驗，但評估試驗結束后被停止進入Ⅳ期臨床試驗，尚未應用于臨床[6]。本研究通過制作青光眼大鼠動物模型，觀察雙七他克林的視神經保護作用，并與美金剛胺進行對比。

1材料和方法

1.1材料實驗動物：成年健康雄性SD大鼠24只，出生12wk，體質量280～320g, 購于湖南斯萊克景達實驗有限公司(合格證號：1107271911002941),飼養溫度18℃～25℃，濕度40%～70%。主要試劑：雙七他克林購自Cayman公司，美金剛胺購自Sigma公司，鼠源性Brn3a一抗購自Millipore公司，鼠源性βⅢ-tubulin一抗購自Covance公司，羊抗鼠二抗(含488nm或546nm熒光探針)，Triton X-100購自Dow公司。 主要儀器設備：冰凍切片機(Leica，CM1950)，熒光顯微鏡(Leica，AF6000)。動物實驗通過長沙市第一醫院倫理委員會審查?！?br>