某院血流感染病原菌分布及耐藥性分析

陳琳

摘要：目的? 對(duì)血培養(yǎng)中病原菌的分布情況及其對(duì)主要抗菌藥物的耐藥性進(jìn)行研究。方法? 對(duì)2016年1月～2019年8月我院住院患者送檢的7905例血培養(yǎng)標(biāo)本，用BacT/ALERT 3D 血培養(yǎng)儀進(jìn)行血培養(yǎng)，從培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性的培養(yǎng)瓶中分離出的菌株在VITEK-Compact Ⅱ微生物全自動(dòng)分析儀中鑒定病原菌的種類(lèi)，并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，從而對(duì)血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本中病原菌的分布及耐藥性進(jìn)行分析。結(jié)果? 血培養(yǎng)中共檢出768株菌株，其中革蘭氏陰性菌共421株（54.82%），革蘭氏陽(yáng)性菌共337株（43.88%），真菌10株（1.30%）。分離出的前5位菌株為：大腸埃希菌（152株）、肺炎克雷伯菌（96株）、人葡萄球菌人亞種（79株）、馬耳他布魯菌（64株）及表皮葡萄球菌（50株）。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林的耐藥率最高，分別為73.20%和97.06%;對(duì)頭孢替坦、阿米卡星、美羅培南及亞胺培南較敏感。人葡萄球菌人亞、表皮葡萄球菌及金黃色葡萄球菌對(duì)芐青霉素的耐藥率最高，分別為88.57%、93.94%及73.68%;對(duì)呋喃妥因、利奈唑胺和替加環(huán)素敏感性較高。結(jié)論? 血培養(yǎng)中分離出的病原菌種類(lèi)復(fù)雜，以革蘭氏陰性菌居多，大腸埃希菌仍為主要致病菌。藥敏結(jié)果顯示病原菌耐藥情況較嚴(yán)重，需加強(qiáng)對(duì)病原菌的監(jiān)測(cè)工作，以指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物。

關(guān)鍵詞：血流感染;血培養(yǎng);耐藥率

Abstract：Objective? To study the distribution of pathogenic bacteria in blood culture and its resistance to major antibacterial drugs.Methods? From January 2016 to August 2019， 7905 blood culture specimens from our hospital patients were examined by BacT / ALERT 3D blood culture instrument.The strains isolated from the culture bottles with positive culture results were used to identify the types of pathogenic bacteria in the VITEK-Compact Ⅱ microbial automatic analyzer， and to conduct drug sensitivity tests， so as to analyze the distribution and drug resistance of the pathogenic bacteria in blood culture positive specimen.Results? A total of 768 strains were detected in blood culture， including 421 Gram-negative bacteria （54.82%）， Gram-positive bacteria 337 （43.88%）， and 10 fungi （1.30%）. The top 5 isolates were： Escherichia coli （152 strains）， Klebsiella pneumoniae （96 strains）， Staphylococcus human subspecies （79 strains）， Brucella malta （64 strains） and epidermis grapes Cocci （50 strains）. The resistance rates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae to ampicillin were the highest， 73.20% and 97.06% respectively; they were sensitive to cefotetan， amikacin， meropenem and imipenem. Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus aureus have the highest resistance rates to benzylpenicillin， 88.57%， 93.94% and 73.68% respectively;they are more sensitive to nitrofurantoin， linezolid and tigecycline.Conclusion? The types of pathogenic bacteria isolated from blood culture are complex， and most are Gram-negative bacteria. Escherichia coli is still the main pathogenic bacteria. The results of drug susceptibility show that the resistance of pathogenic bacteria is serious， and it is necessary to strengthen the monitoring of pathogenic bacteria to guide the rational use of antibacterial drugs in clinic.

Key words：Bloodstream infection;Blood culture;Drug resistance rate

血流感染是影響所有年齡段人群發(fā)病率和死亡率的主要原因[1]，在全球范圍內(nèi)影響約3000萬(wàn)人的健康，致約600萬(wàn)病人死亡[2]，其特征是細(xì)菌或真菌入侵血流并引起機(jī)體炎癥反應(yīng)，致菌血癥或敗血癥，嚴(yán)重者可出現(xiàn)休克，多器官功能衰竭、DIC等[3]。近年來(lái)由于廣譜抗菌藥及有創(chuàng)診療廣泛使用，致血流感染發(fā)生率不斷增加，病原菌種類(lèi)和耐藥性也隨時(shí)間進(jìn)展而有所變化，給臨床經(jīng)驗(yàn)用藥帶來(lái)困難。因此，有必要對(duì)醫(yī)院的病原菌分布和耐藥性進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以有效指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物。本研究分析我院2016年1月～2019年8月送檢的血培養(yǎng)標(biāo)本，并對(duì)檢出的病原菌進(jìn)行了菌群分布和耐藥性分析。

1材料和方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源? 收集2016年1月～2019年8月天津市第二人民醫(yī)院住院患者送檢血培養(yǎng)標(biāo)本7905例。

1.2 儀器與試劑? 全自動(dòng)血培養(yǎng)儀BacT/ALERT 3D和配套的培養(yǎng)瓶，微生物全自動(dòng)分析儀VITEK-Compact Ⅱ和配套的細(xì)菌鑒定卡及藥敏卡均來(lái)自法國(guó)生物梅里埃公司。血瓊脂平板，麥康凱平板，念珠菌顯色平板來(lái)自天津金章科技發(fā)展公司。

1.3 標(biāo)本采集? 采集有血流感染癥狀者在使用抗菌藥物前的全血標(biāo)本，成人8～10 ml，兒童1～3 ml，分別注入需氧培養(yǎng)瓶和厭氧培養(yǎng)瓶中，采集過(guò)程中嚴(yán)格無(wú)菌操作，標(biāo)本采集完成后立即常溫送檢。

1.4 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定? 收集到的血培養(yǎng)瓶立即放入BacT/ALERT 3D全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀中進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)儀器報(bào)警有陽(yáng)性標(biāo)本時(shí)，立即將陽(yáng)性標(biāo)本轉(zhuǎn)種到血瓊脂平板和麥康凱平板中，有必要時(shí)應(yīng)加種念珠菌顯色平板，同時(shí)進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，電話(huà)通知臨床初步鑒定結(jié)果。分離培養(yǎng)18～24 h后，挑取單個(gè)可疑菌落，通過(guò)VITEK-Compact Ⅱ進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏分析。藥敏結(jié)果判定根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）最新標(biāo)準(zhǔn)判讀。

1.5 質(zhì)量控制? 質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853、 糞腸球菌 ATCC29212、肺炎克雷伯菌ATCC700603。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 采用WHONET5.4 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)使用（n，%）進(jìn)行描述。

2 結(jié)果

2.1病原菌分布? 共分離出768株菌株，前5位為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌，人葡萄球菌人亞種，馬耳他布魯菌，表皮葡萄球菌，見(jiàn)表1。

2.2主要革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥情況? 分離出的革蘭氏陽(yáng)性菌中以人葡萄球菌人亞種最多，其次為表皮葡萄球菌。人葡萄球菌人亞種、表皮葡萄球菌及金黃色葡萄球菌對(duì)芐青霉素的耐藥率最高，溶血葡萄球菌對(duì)芐青霉素和苯唑西林的耐藥率最高，這4種革蘭氏陽(yáng)性球菌對(duì)克雷霉素和紅霉素的耐藥率均>50%。4種革蘭氏陽(yáng)性球菌中未發(fā)現(xiàn)對(duì)利奈唑胺、替加環(huán)素的耐藥菌株，對(duì)呋喃妥因的敏感性較高，見(jiàn)表2。

2.3主要革蘭氏陰性菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率? 革蘭氏陰性菌中大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌在前2位，大腸埃希菌對(duì)氨芐西林的耐藥率最高，對(duì)復(fù)方新諾明和頭孢唑啉耐藥率>50%。肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林的耐藥率最高，其次是對(duì)哌拉西林及呋喃妥因。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢替坦、阿米卡星、美羅培南及亞胺培南較敏感，其中未發(fā)現(xiàn)對(duì)頭孢替坦耐藥的肺炎克雷伯菌株，見(jiàn)表3。

3討論

血流感染所導(dǎo)致的菌血癥和敗血癥是引起患者急性死亡的原因之一[4]。血培養(yǎng)是血流感染最直接的診斷方法，對(duì)患者后續(xù)治療、病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后都具有重要作用。及時(shí)準(zhǔn)確的血培養(yǎng)鑒定及藥敏結(jié)果有助于臨床有效的控制感染，減少患者的死亡率。同時(shí)，對(duì)血流感染中檢出的病原菌的分布和耐藥情況進(jìn)行定期監(jiān)測(cè)，可以指導(dǎo)臨床經(jīng)驗(yàn)用藥，以達(dá)到及時(shí)有效控制感染的目的。

本研究從7905例血培養(yǎng)中檢出768株菌株，革蘭氏陰性菌仍是血流感染主要菌株，占54.82%，與陳俊等[3]及唐洪影等[5]報(bào)道的血培養(yǎng)結(jié)果一致。但與楊士華[6]報(bào)道的結(jié)果不同，可能是因?yàn)椴≡姆植寂c地域有一定的關(guān)系。革蘭氏陰性菌中以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢出最多，革蘭氏陽(yáng)性菌中檢出最多的為人葡萄球菌人亞種，其次為表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌。大腸埃希菌對(duì)阿米卡星、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦及頭孢替坦具有較高的敏感性;肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢替坦、阿米卡星、亞胺培南及美羅培南具有較高的敏感性，其中未發(fā)現(xiàn)對(duì)頭孢替坦耐藥的肺炎克雷伯菌株。人葡萄球菌人亞種、表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌及溶血葡萄球菌對(duì)替加環(huán)素、利奈唑胺均未發(fā)現(xiàn)耐藥。

本研究中發(fā)現(xiàn)表皮葡萄球菌檢出率高于金黃色葡萄球菌，這與陳俊玲[7]、高壁如等[8]報(bào)道相一致。表皮葡萄球菌是存在于人皮膚黏膜的正常菌群，如在創(chuàng)傷性診療過(guò)程中未嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，對(duì)皮膚消毒不徹底，就會(huì)使表皮葡萄球菌進(jìn)入血液并引發(fā)感染，表皮葡萄球菌的高檢出率提示臨床在進(jìn)行有創(chuàng)診療時(shí)，應(yīng)加強(qiáng)消毒意識(shí)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免不必要的感染產(chǎn)生。此外，馬耳他布魯菌檢出率也較高，人布魯式桿菌病是一種人蓄共患病，傳播途徑主要為直接接觸皮膚傳播，也可通過(guò)消化道傳播，如未經(jīng)高溫消毒的奶制品，牛羊肉等，對(duì)布魯氏桿菌及時(shí)的檢出有助于臨床診斷。布魯氏桿菌也可以通過(guò)氣溶膠吸入感染，提示實(shí)驗(yàn)人員一定要做好防護(hù)工作。本研究中共檢出10株真菌，其中一半為新生隱球菌，這可能與我院患者構(gòu)成有關(guān)，因其感染常見(jiàn)于免疫功能受損的人群，如艾滋病等，及時(shí)準(zhǔn)確對(duì)血流感染中真菌的檢出有助于更合理的使用抗真菌藥物。

綜上所述，血流感染的病原菌復(fù)雜多變，不同病原菌間的耐藥性差異也較大。由于有創(chuàng)診療的廣泛開(kāi)展及抗菌藥物的不合理應(yīng)用，導(dǎo)致血流感染的發(fā)病率不斷增加，病原菌的耐藥情況日漸嚴(yán)重，且隨時(shí)間的推移病原菌的分布和耐藥性都會(huì)產(chǎn)生變化。這就使醫(yī)院對(duì)血流感染病原菌的的監(jiān)測(cè)顯得至關(guān)重要，實(shí)時(shí)了解病原菌的分布和耐藥情況，對(duì)幫助臨床合理使用抗菌藥物，提高患者治愈率具有重要意義。

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編輯/馮清亮