胸腔積液和腹水清蛋白檢測假性增高1例

李德濤，周 密，侯玉磊△

重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院：1.檢驗科；2.藥學部，重慶 400016

胸腔積液和腹水總蛋白測定是鑒別滲出液和漏出液的重要指標之一[1]，一般認為胸腔積液和腹水總蛋白高于25 g/L為滲出液，低于25 g/L則為漏出液[2]。清蛋白在胸腔積液和腹水中的檢測主要用于提示血清-清蛋白梯度，能夠比較真實地反映門靜脈壓力，有利于提高胸腔積液和腹水性質(zhì)鑒別的準確性[3-4]。基于溴甲酚綠的比色法檢測清蛋白水平操作簡單，特異性強，目前在國內(nèi)常用于清蛋白的水平檢測。本院檢驗科發(fā)現(xiàn)基于溴甲酚綠比色法檢測胸腔積液和腹水清蛋白假性增高1例，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 患者，女，25歲，因肝部腫瘤住院。患者因上腹部腹脹伴惡心1周入院。查體：體溫36.5 ℃，心率98次/分，呼吸18次/分，血壓113/72 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)。輔助檢查：婦科彩超顯示肝右前葉實性占位，增強CT顯示肝右前葉肝左外葉占位。血清肝功結(jié)果：總蛋白64 g/L、清蛋白38 g/L、總膽紅素(TBIL) 14.9 μmol/L、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT) 160 U/L、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)105 U/L。該患者胸腔積液和腹水外觀呈淺綠色，在全自動生化分析儀RL7600上進行生化檢驗，檢測結(jié)果為總蛋白 46.6 g/L、清蛋白 533.3 g/L、TBIL 15.7 μmol/L、乳酸脫氫酶(LDH) 1 876 U/L、腺苷脫氨酶(ADA) 28 U/L。因該胸腔積液和腹水標本清蛋白水平高于總蛋白，根據(jù)清蛋白反應曲線初步懷疑為清蛋白假性增高，分別用稀釋不同倍數(shù)的生理鹽水、其他患者血清，以及胸腔積液和腹水標本進行檢測。

1.2方法 本次檢測分別在本實驗室3個檢測系統(tǒng)下進行總蛋白和清蛋白濃度檢測：系統(tǒng)1為日立7600儀器加四川邁克單試劑，系統(tǒng)2為羅氏Cobas c701封閉檢測系統(tǒng)，系統(tǒng)3為強生干化學Vitros 5.1 FS封閉檢測系統(tǒng)。以上檢測系統(tǒng)清蛋白的檢測實驗原理均是基于溴甲酚綠的比色法。

2 結(jié) 果

2.1該標本使用不同方法稀釋在系統(tǒng)1的總蛋白和清蛋白結(jié)果 系統(tǒng)1使用不同稀釋液稀釋后檢測該標本后總蛋白和清蛋白結(jié)果見表1，經(jīng)不同稀釋液稀釋，隨著稀釋倍數(shù)增加，總蛋白無趨勢性變化，但清蛋白結(jié)果逐漸降低。隨著稀釋倍數(shù)增加，不同稀釋方法下清蛋白均呈趨勢性降低，由此推測該標本使用系統(tǒng)1清蛋白檢測可能存在干擾。見圖1。

2.2該胸腔積液和腹水使用不同方法稀釋在不同檢測系統(tǒng)總蛋白和清蛋白結(jié)果 在系統(tǒng)2和系統(tǒng)3上檢測該標本發(fā)現(xiàn)，清蛋白結(jié)果均小于總蛋白結(jié)果，符合預期。但2個系統(tǒng)清蛋白結(jié)果相差較大。見表2。

表1 使用不同稀釋液稀釋系統(tǒng)1總蛋白和清蛋白結(jié)果(g/L)

表2 使用不同稀釋液在3個檢測系統(tǒng)中的總蛋白和清蛋白結(jié)果(g/L)

注：-表示此項無數(shù)據(jù)。

圖1 不同方法稀釋胸腔積液和腹水后不同稀釋倍數(shù)下清蛋白結(jié)果

3 討 論

胸腔積液和腹水中檢測清蛋白有利于胸腔積液和腹水良惡性的判斷，溴甲酚綠是檢測清蛋白水平最常用的方法之一[5-6]。溴甲酚綠的檢測原理是在pH4.2左右的緩沖溶液里，溴甲酚綠與清蛋白結(jié)合形成藍綠色復合物，藍綠色復合物顏色的深淺與清蛋白的濃度成正比。據(jù)此可計算樣本中清蛋白的水平[7-8]。然而在本案例中，基于單試劑的開放檢測系統(tǒng)1胸腔積液和腹水清蛋白結(jié)果高于總蛋白結(jié)果，這有違常識，經(jīng)觀測胸腔積液和腹水顏色同試劑顏色比較相似，初步推測該異常結(jié)果可能受標本顏色的影響，胸腔積液和腹水本底對清蛋白的檢測造成了影響。但分別使用生理鹽水，已知結(jié)果的血清、胸腔積液和腹水標本稀釋該胸腔積液和腹水標本后在檢驗科3個檢測系統(tǒng)上進行檢測，最大稀釋到10倍，經(jīng)計算檢測系統(tǒng)1無論哪種稀釋方法清蛋白結(jié)果均大于總蛋白，且稀釋倍數(shù)越大，清蛋白結(jié)果越低。系統(tǒng)2和系統(tǒng)3檢測結(jié)果顯示該胸腔積液和腹水標本清蛋白低于總蛋白，符合常識，但不同稀釋方法和稀釋倍數(shù)下相差較大。另外發(fā)現(xiàn)，使用胸腔積液和腹水稀釋的系列結(jié)果偏差最小，可能與本底效應相關。有研究報道，基于溴甲酚綠的單試劑受標本質(zhì)量的影響比較大，而雙試劑受影響相對較小，并且雙試劑在抗維生素C和血紅蛋白干擾中強于單試劑[9-10]。另外，基于溴甲酚綠方法檢測清蛋白的試劑在一定程度上受標本中非清蛋白類的其他蛋白的干擾，如α和β類球蛋白的非特異性干擾[11]。但是本研究缺少該胸腔積液和腹水蛋白電泳的結(jié)果，以及基于免疫比濁法檢測清蛋白的結(jié)果，沒有辦法排除該胸腔積液和腹水是否存在其他球蛋白影響檢測結(jié)果。

綜上所述，對于基于溴甲酚綠檢測清蛋白的方法，出現(xiàn)異常結(jié)果時，可選擇雙試劑檢測系統(tǒng)或者干化學試劑檢測系統(tǒng)，也可做基于免疫法的清蛋白檢測，以綜合判斷，為臨床醫(yī)生出具真實可靠的結(jié)果以供診斷病情。