肺癌患者中HE4等六項腫瘤標志物的聯合診斷價值探討

劉 婧 江中林 曹 陽

肺癌相關的血清腫瘤標志物檢測在近年來發展很快，它們的異常改變往往早于影像學表現[1]，因此在腫瘤篩查、診斷、判斷預后和轉歸方面發揮越來越重要的作用。合理選擇和組合使用血清腫瘤標志物，在臨床上可以大大提高其診斷價值。目前，神經原特異性烯醇化酶（NSE）、細胞角蛋白－19片段（CYFRA21-1）和鱗狀細胞癌相關抗原（SCC）是臨床診斷肺癌重要的腫瘤標志物[2]。Nagy J等發現，作為一種比較新的腫瘤標志物，血清HE4的檢測在肺癌的診斷中具有重要的價值，尤其聯合檢測糖類抗原125（CA125）、癌胚抗原（CEA）等血清腫瘤標志物效果更佳[3]。本研究旨在探討人附睪分泌蛋白4（HE4）、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1這六項腫瘤標志物的聯合檢測在肺癌的診斷及淋巴結轉移監測中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選自2018年10月-2019年10月在本醫院呼吸內科、胸泌科、化療科、急診科住院患者85例，并且所有患者均已病理學確診。85例肺部癌癥患者病理分型：小細胞癌15例，鱗癌24例，腺癌46例；根據2017年國際抗癌聯盟（UICC）肺癌TNM分期標準第八版，所選85例肺癌其臨床TNM分期：Ⅰ期1例，Ⅱ期15例，Ⅲ期31例，Ⅳ期38例。其中，男60例，女25例，年齡31～80歲，平均年齡（47.9±10.4）歲。85例肺癌患者中49例無淋巴結轉移，36例有淋巴結轉移。所有病例均由病理或細胞學確診。肺部良性病變病例標本45例，年齡21～78歲，平均年齡（53.3±15.6）歲，良性病變對照組經病理或臨床診斷為良性病變，其中肺炎22例，慢性阻塞性肺病11例，肺良性腫瘤12例。兩組患者年齡差異無統計學意義（P＞0.05）。確定的排除標準為：不合作的患者；年齡＞80歲的患者；肝、腎、心臟等器官嚴重疾病的患者；標本無脂血無溶血。選取的肺部良性病變患者采血前均未接受抗腫瘤藥物治療。

1.2 檢測方法 本研究所選檢測者均要求于清晨空腹抽取靜脈血3 mL，送實驗室后立即分離血清，于-70℃冷藏冰柜保存待檢。SCC檢測項目采用深圳新產業生物醫學工程股份有限公司生產的 Maglumi 4000 Plus全自動化學發光分析儀及其配套試劑盒。HE4、NSE、CEA、CA125、CYFRA21-1等檢測項目采用羅氏電化學發光全自動分析儀e-602，檢測試劑由羅氏公司提供相應的配套試劑。質控品采用美國伯樂公司提供的腫瘤類高、中值質控品，質控判斷標準為Westgard多規則分析。以上各項目檢測均嚴格按儀器和試劑說明書由專人進行操作。各項檢測指標按德國進口羅氏診斷公司電化學發光試劑說明書及深圳新產業化學發光試劑說明書確定實驗室參考區間如下：NSE≤16.3 ng/mL、CEA≤ 6.5 ng/mL、CYFRA21-1≤3.3 ng/mL、SCC 相關抗原＜2.5 ng/mL、CA125≤35 U/mL、HE4＜121 pmol/L。診斷結果陽性判定標準：各項檢測指標的檢測值水平超過正常參考值上限范圍。

1.3 統計學方法 采用SPSS 18.0統計軟件處理數據，計量資料采用均數±標準差的方法表示，采用t檢驗；行多因素采用Logistic回歸分析，并繪制受試者工作特征曲線（ROC曲線），計算曲線下面積（AUC）。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組患者HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1水平比較 肺癌組與良性病變對照組比較，HE4、NSE、CYFRA21-1的水平顯著升高，差異具有統計學意義（P＜0.05）；兩組CEA、CA125、SCC水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組患者HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1檢測結果比較（x±s）

2.2 肺癌淋巴結轉移與否兩組中HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1水平比較 經臨床手術和病理學證實，85例肺癌患者中49例無淋巴結轉移，36例有淋巴結轉移。兩組進行比較，在HE4、NSE、CEA、CYFRA21-1等四個項目檢測水平中，有淋巴結轉移組明顯高于無淋巴結轉移組，其差異具有統計學意義（P＜0.05）；CA125、SCC水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 肺癌淋巴結轉移與否兩組中HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1水平比較（x±s）

2.3 HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1水平變化在肺淋巴結轉移中的價值評價 將HE4、CEA、CA125、SCC、NSE、CYFRA21-1六 項指標在有肺癌淋巴結轉移和無淋巴結轉移兩組中的水平變化繪制ROC曲線（圖1）。HE4的AUC為0.780，95%CL：0.695～0.866，當HE4的 截斷值為109.6 pmol/L時敏感性為71.8%，特異性為82.5%，臨床診斷的符合率為72.6%，其預測價值最 佳；NSE的AUC為0.755，95%CL：0.662～0.847，當NSE的截斷值為51.3 ng/mL時特異性為89.5%，敏感性為50.2%，臨床診斷的符合率達到73.8%，其預測價值最佳；CYFRA21-1的AUC為0.794，95%CL:0.713～0.878，當 CYFRA21-1的截斷值為23.75 ng/mL時敏感性為70.6%，特異性為93.2%，診斷符合率為83.2%，其預測價值最佳。CEA、CA125、SCC三項由于在0.5＜ AUC ＜0.7，所以在肺癌淋巴結轉移預測診斷價值不高。

圖1 ROC曲線

2.4 HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1六項聯合檢測及單項檢測對肺癌的診斷價值 結果表明，進行六項聯合檢測，無論是在其準確性、敏感性還是陰性預測值方面，與單項檢測相比較都有顯著提高，其差異具有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1關于肺癌診斷價值的評價(%)

3 討 論

肺癌的局部復發和遠處轉移導致肺癌患者預后差，總體5年生存率約為16%，對肺癌患者進行早期診斷、早期治療，從而提高其生存率，是廣大醫學研究者共同的目標。

3.1 肺癌相關的血清腫瘤標志物的類型 ①HE4：1991年，Kirchhoff等人在人附睪上皮細胞中發現的一種糖蛋白，該糖蛋白隱匿于乳清酸性4-二硫化中心（WFDC），這就是HE4。HE4在卵巢腫瘤組織中高度表達，可作為卵巢癌的血清腫瘤標志物。進一步研究發現，HE4在肺部腫瘤、乳腺腫瘤、盆腔腫瘤、腎癌和移行細胞癌等惡性腫瘤疾病患者的血清中也具有一定表達，提示其可作為血清學腫瘤標志物，提供重要輔助診斷價值[4]。另外，Yamashita S等[5]發現原發性肺腺癌患者組血清中HE4含量明顯高于健康對照組，且術后復發患者血清中的HE4含量將進一步升高，提示HE4的高表達與肺癌患者手術后復發也存在一定相關性。②CYFRA21-1：CYFRA21-1是一種酸性蛋白質，廣泛存在于單層上皮細胞的細胞質中。當上皮細胞起源的腫瘤細胞（如肺癌、食管癌）發生壞死或者溶解時，CYFRA21-1會以片段的形式釋放到血液中，致使其血清水平急劇上升[6]。目前，CYFRA21-1主要用于監測非小細胞型肺癌（NSCLC）。③NSE：NSE是一種糖酵解酶，在哺乳動物的大腦神經元中大量存在，另外在肺癌組織中也發現有大量NSE存在，其中，小細胞肺癌中含量最高，其組織中的含量可達到正常肺細胞的3～35倍[7]。NSE是目前公認的小細胞肺癌高特異性和高靈敏性的腫瘤標志物。④SCC：SCC是一種鱗狀上皮抗原，存于鱗狀細胞（如宮頸、肺等）的胞漿內，可作為非小細胞肺癌（NSCLC）的血清學腫瘤標志物。在排除腎功能衰竭和皮膚病的情況下，SCC血清水平升高臨床上可提示有NSCLC的發生。SCC的檢測對于肺癌預后診斷有一定價值，可提示其復發、治療后殘余和治療反應。⑤CEA：CEA是由消化道細胞分泌的一種廣譜性血清腫瘤標志物。有研究表明，肺癌中的CEA陽性率為40%～80%。由于其廣譜性，臨床上常用CEA與其他腫瘤標志物聯合檢測來提高肺癌的診斷率。⑥CA125：CA125是上皮卵巢癌和子宮內膜癌的良好腫瘤標志物，在肺癌患者中也有一定的陽性率，并可隨肺癌分期進展而明顯升高。

3.2 肺癌血清腫瘤標志物聯合檢測的臨床價值分析 ①在本組資料中發現，肺癌組血清檢測的標志物中HE4、NSE、CYFRA21-1三項檢測值與良性病變對照組相比有顯著差異，具有統計學意義（P＜0.05），表明其對肺癌的診斷有一定意義。另外三個檢測項CEA、CA125、SCC的水平與良性病變對照組相比，有所升高，但無統計學意義。這三項沒有達到本研究的預期，這可能跟所選取的病例樣本不太理想以及所選取的樣本數量不足有關。②在肺癌患者淋巴結轉移與否的分組觀察中，本研究結果發現：有淋巴結轉移組其HE4、NSE、CEA、CYFRA21-1水平高于無淋巴結轉移組，差異有統計學意義（P＜0.05），而CA125、SCC兩項檢測結果在兩組比較中無顯著差異（P＞0.05）。結果提示肺癌患者血清HE4、NSE、CEA、CYFRA21-1的進一步升高可能預示預后不良。③通過ROC曲線以及AUC分析：當 HE4的AUC為0.780、NSE的AUC為0.755、CYFRA21-1的AUC為0.795，并且當HE4的截斷值為109.6 pmol/L、NSE的截斷值為51.3 pmol/L、CYFRA2l-1的截斷值為23.75 ng/mL時提示有肺癌淋巴結轉移，具有最佳預測價值。而CEA、CA125、SCC三項由于在0.5＜AUC＜0.7，所以在淋巴結轉移預測診斷中價值不高。④本研究發現，采用HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1六個項目聯合檢測觀察肺癌診斷的敏感性、準確性和陰性預測值，與各單項檢測相比，其差異有統計學意義（P＜0.05），但在特異性和陽性預測值的觀察中，與單項檢測進行比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。由此可見，采用HE4與NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1六個腫瘤標志物聯合檢測，在臨床上可以提高肺癌的診斷率，有一定的推廣應用價值。

綜上所述，采用HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1六項聯合檢測對肺癌診斷具有重要意義，同時在判定是否有淋巴結轉移時也具有一定的評估和應用價值。由于本研究收集病例數有限，在今后的研究中，將繼續擴大臨床病例數，進一步做相關問題的分析。