全自動毛細管電泳在新生兒地中海貧血篩查中的應用價值

楊希

（北流市人民醫院，廣西 北流 537400）

0 引言

地中海貧血是一種常染色體隱性遺傳的單基因溶血性貧血性疾病，是珠蛋白鏈發生缺失或突變導致的血紅蛋白四聚體結構異常比例失衡，從而無效造血慢性溶血而貧血，其表型較為復雜。大多數患者的癥狀較輕，但相當一部分臨床癥狀表型較嚴重，會嚴重影響患者的日常生活和工作[1]，重型地貧則暫無有效治療手段，故有效干預防控是減少地中海貧血，優生優育，提高人口素質的重要工作。根據珠蛋白基因缺陷情況分成α、β、γ、δ四種類型的地中海貧血，α、β型是較為常見的地中海貧血，在我國的南方地區有著較高的發病率[2-3]。地中海貧血在不同程度上對患者的日常生活與學習產生影響，所以對于地中海貧血早篩查早干預早治療十分必要。本研究選取北流市人民醫院收治的1842例新生兒作為研究對象，抽取新生兒的臍帶血，對全自動毛細管電泳在新生兒地中海貧血篩查中的應用價值進行研究，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取2018年1月至2018年4月北流市人民醫院收治的1842例新生兒作為研究對象，在新生兒娩出后用真空抗凝管采集臍帶血送檢，采用全自動毛細管電泳對樣本結果進行檢測。按照檢查的具體結果將所有患兒分為疑似α地中海貧血組177例（9.61%）與疑似β地中海貧血組115例（6.24%）。疑似α地中海貧血組，男性95例，女性82例；患兒胎齡：早產兒35例，足月兒142例；疑似β地中海貧血組，男性61例，女性54例；患兒胎齡：早產兒21例，足月兒94例。兩組患兒性別、胎齡方面狀況比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究均在家屬知情且同意的前提下完成，且經過北流市人民醫院倫理協會的批準。

1.2 儀器與方法。儀器：全自動毛細管電泳儀（生產廠家：法國Shia公司），使用前對儀器的性能進行核對，選擇相應配套的血紅蛋白試劑盒。方法 全自動毛細管電泳法（CZE）是在高壓電場帶電粒子的驅動作用下，在石英毛細管內，通過不同的速度對各種血紅蛋白進行分離處理。樣板放在毛細管的負極端，在高壓電場的作用中，血紅蛋白會出現在靠近正極的附近，分離處理完成后，使用氘光源進行照射處理，對血紅蛋白的成分進行分析，并對各成分準確定量。操作均由同一位有豐富經驗的工作人員嚴格按照說明書執行，將實驗所得數據進行記錄核實。

1.3 參考標準

1.3.1 主要有三個區帶對測評有明確意義，分別是HBA，HB bart’s、HbF。

1.3.2 α地中海貧血：HB bart’s是一項篩查α地貧的敏感指標，HB hart’s應該不存在于正常新生兒血液，按照HB bart’s的含量不同，毛細電泳法將α地中海貧血分為正常（0%），靜止型（0%-2%），中間型（H病型）（10.1%-30.0%），標準型（5%-10%），Bart’s水腫胎（＞70%）；與正常（αα/αα），靜止型（-α/αα，ααT/αα），輕型（--/αα），（-α/-α 或 -α/αTα）， 中 間 型（--/-α，--/αTα），重型（--/--）相對應。

1.3.3 β地中海貧血：HBA，HbF，HbA2可以作為β地中海貧血的診斷相關依據，但不夠敏感和準確，有許多地區將HBA可疑切值集中在小于8%-12%。α地中海貧血篩查陽性標準：HB bart’s＞2%即為α地中海貧血篩查陽性。β地中海貧血篩查陽性標準：選擇綜合分析法，根據患者血紅蛋白組分HbF＞90%、HbA2含量＞1%、HbA含量＜10%，HbA2/HbA比值對β地中海貧血陽性進行定義。

2 結果

2.1 HB bart’s陽性情況。通過對1842例新生兒臍帶血進行電泳分析，測得HB bart’s的陽性例數為177例，占總新生兒的9.61%，見表1。

表 1 HB bart’s 陽性情況

2.2 HBA區帶分布情況。疑似α地中海貧血有177例（9.61%），疑似β地中海貧血有115例（6.24%），其中HB bart’s帶小于10%的為174例，占陽性比例的98.31%（174/177），見表2。

表2 HB barts帶分布的情況（%）

3 討論

新生兒地中海貧血屬于罕見的遺傳病，一般按珠蛋白四個肽鏈的類型分為α、β、γ、δ四種類型，其中α和β地中海貧血較為常見，臨床上早期篩查是治療該病的關鍵。血紅蛋白分析是地中海貧血的主要篩查手段，可以對患者的血紅蛋白成分進行分離量化和鑒定[4]。通過電泳結果得出相應的診斷。本研究采用全自動毛細管電泳對新生兒臍帶血進行分析、篩查，進而探討了全自動毛細管電泳技術在地中海貧血進行篩查方面的臨床價值。研究結果顯示：在1842名新生兒臍帶血標本中，疑似α地中海貧血有177例（9.61%），疑似β地中海貧血有115例（6.24%），HB bart’s有177例，占9.61%，而小于10%的有174例，占98.31%（174/177），由此結果可知，本地區靜止型和輕型為主要的α地中海貧血，大部分地中海貧血患者缺乏明顯的臨床表現，若未及時有效的得到篩查與確診，將會在很大程度上影響其下一代的優生優育。

地中海貧血是一種由于珠蛋白障礙所導致的溶血性貧血疾病，在我國只能通過基因檢測對該病進行明確診斷[5]。由于基因檢測投入資金大，且操作較為繁瑣，難以在基層得到推廣。全自動毛細管電泳結果清晰明了，操作簡單，資金投入較少，更適合推廣用于地中海貧血篩查，同時可協助鑒別各種異常血紅蛋白病，以此對地中海貧血進行治療與預后評估。全自動毛細管電泳儀由于其全自動性能，避免了人工操作的繁瑣，可有效節省時間、人力和物力，得到了大多數臨床工作者的認可，逐漸被各個醫院引入。全自動毛細管電泳技術的靈敏度與特異性較高，是篩查地中海貧血的較好方法，可有效對HB bart’s及各相關區帶進行檢測，為臨床診斷地中海貧血提供可靠依據。此外，此方法有耗材少、重現性好等優點[6]。但是本研究中有以下幾點需要重視：①對于檢查已經出現血紅蛋白區異常的患兒，需要結合基因檢測結果再進行確診；②由于血紅蛋白穩定性較差，在相隔較長時間的情況下會發生降解，故采集的標本需要在8 h內完成處理，如未及時檢測需2℃-8℃保存標本，避免溶血；③對于一些血常規McV、MCH降低的患者，如果血紅蛋白分析結果無異常，需要首先對其它相關疾病進行排除，再進行診斷確診。

綜上所述，全自動毛細管電泳技術具有著較高的敏感度與準確率，且操作方便簡單，值得在基層推廣。