免疫組化指標Her-2聯合腫瘤標志物檢測在胃癌診斷中的應用價值

李隆昌，王大鵬

鄭州大學附屬腫瘤醫院，河南 鄭州 450008

胃癌屬于多發消化系統惡性腫瘤，治療方法較多，包括手術、放療、化療等。但多數胃癌患者發病早期癥狀不典型，極易被患者與醫生忽視，導致出現典型癥狀確診時已處于中晚期，喪失最佳手術時機，需經放化療治療，總體效果不佳[1]。故臨床采取積極措施，提升胃癌早期診斷準確性，指導治療方案制定，改善預后，具有重要臨床意義。目前認為，腫瘤標志物在胃癌診斷中發揮重要作用，可鑒別診斷腫瘤組織與正常組織，且能判斷是否存在腫瘤[2]。但部分血清腫瘤標志物單獨檢測時靈敏度較低，影響胃癌早期診斷準確性。近年來，有學者開始關注特異性免疫組化指標在胃癌診斷中的應用，發現人表皮生長因子受體2(Her-2)與胃癌發生、發展有一定關系[3]。但臨床就該問題研究尚不多。本研究重點分析了胃癌中血清腫瘤標志物與Her-2表達聯合診斷價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料隨機抽樣法選取2018年3月至2019年3月本院58例胃癌患者為研究對象。納入標準：①符合《胃癌規范化診療指南》[4]中原發性胃癌診斷標準；②經手術病理檢查確診，術前未行放療、化療、免疫治療等；③臨床資料完整。排除標準：①合并內分泌系統疾病、免疫系統疾病、血液系統疾病等可能對腫瘤標志物檢測產生干擾的疾病；②未行Her-2、腫瘤標志物檢測。本組患者中，男30例，女28例；年齡31～76歲，平均(55.48±8.17)歲；TNM分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期23例，Ⅲ期17例，Ⅳ期4例；淋巴結轉移：有36例，無22例。

1.2 方法

1.2.1 血清腫瘤標志物檢測 術前，抽取6mL清晨空腹靜脈血，1500r/min離心，持續15mnin，取上清液。以酶聯免疫吸附法檢測腫瘤標志物，包括癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CЕA)、糖鏈抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、糖鏈抗原72-4(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)、糖鏈抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)，試劑盒均購自北京中杉生物技術有限公司。CЕA、CA125、C A72-4、C A19-9陽性標準分別為＞5n g/m L、＞35U/ mL、＞6.9U/mL、＞35U/mL。

1.2.2 Her-2表達檢測 經胃鏡取胃黏膜標本，以3.7%中性甲醛溶液固定。常規脫水，石蠟包埋，連續切片，厚度4μm。采用免疫組化法檢測胃癌組織中Her-2表達，試劑盒購自北京中杉生物技術有限公司。經Max Vision兩步法染色，加入DAB溶液顯色，持續1～2min。蘇木精襯染，脫水，透明、中性樹膠封固。陰性對照采用PBS液代替一抗進行。依據細胞膜是否存在棕黃色顆粒樣沉淀判斷，以無染色或＜10%細胞存在細胞膜著色，為0；≥10%細胞存在輕微膜著色，為+；≥10%細胞的膜著色較弱，為++；≥10%細胞存在中到強度膜著色，為+++。低表達為(0)、(+)，即Her-2陰性；過度表達為(++)、(+++)，即Her-2陽性。

1.3 觀察指標①比較血清腫瘤標志物、Her-2表達與臨床病理特征關系；②比較CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2單獨與聯合檢測靈敏度。

1.4 統計學分析以SPSS20.0軟件分析。本研究中計數資料以χ2檢驗。P＜0.05為差異顯著。

2 結果

2.1 血清腫瘤標志物、Her-2表達與臨床病理特征關系不同臨床分期、淋巴結轉移的胃癌患者CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2表達陽性率差異有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 血清腫瘤標志物、Her-2表達與臨床病理特征關系比較(例)

2.2 血清腫瘤標志物、Her-2診斷胃癌的靈敏度CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2聯合檢測靈敏度高于各項單獨檢測(P＜0.05)，見表2。

3 討論

現階段，胃癌已發展成為嚴重威脅人們身心健康、生活質量的重要疾病之一，且病死率較高。目前認為，臨床提升胃癌患者治療效果、改善預后的關鍵為早期篩查、診斷。但傳統胃鏡檢查較難滿足臨床分期評估要求；CT、MRI等影像學手段雖可提升臨床分期評估準確率，但在診斷早期胃癌中存在一定局限。研究發現腫瘤發生、發展中腫瘤標志物發揮重要作用，且可進行診斷鑒別，常見的有CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9等[5]。其中，CЕA為含較多糖類的蛋白質。但早期胃癌診斷中單純CЕA檢測應用受限，靈敏度較低，僅為22%[6]。本次研究中，CЕA檢測靈敏度為22.41%，與此相符。此外，Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移患者CЕA陽性率更高，推測CЕA表達與胃癌患者臨床分期、淋巴結轉移有一定相關性，分析CЕA可促使細胞排列出現錯亂，導致癌細胞位置改變，而一旦癌細胞脫落，可能引發浸潤轉移。CA125是自上皮性卵巢癌抗原中檢測出來的一種糖蛋白，可被單克隆抗體OC125結合。研究發現，胃癌中約90%患者血清CA125與病程發展、轉移有一定相關性[7]。CA72-4屬于高分子黏蛋白，在人胚胎組織、部分惡性腫瘤組織中存在高表達，但在正常分化組織中表達較低。CA19-9屬于糖類腫瘤標志物，在肝、胃、胰等細胞中廣泛分布，早期可用于篩查、診斷胰腺癌。本次研究發現，CA125、CA72-4、CA19-9對胃癌診斷靈敏度分別為10.34%、20.69%、12.07%，且不同臨床分期、淋巴結轉移患者CA125、CA72-4、CA19-9陽性率存在差異，故推測這些指標也在胃癌診斷中有一定的價值。

表2 血清腫瘤標志物、Her-2診斷胃癌的靈敏度分析(%)

此外，研究發現，胃癌血管形成、侵襲及轉移過程中，Her/erbB家族信號通路也發揮重要作用，影響腫瘤細胞增殖分化、遷移、黏附等過程[8]。而Her-2是Her/erbB家族重要成員之一，在正常成年人組織中表達較低，而一旦機體處于病理狀態，Her-2可出現過表達，抑制腫瘤細胞凋亡，且能促進腫瘤心血管再生，促使腫瘤細胞侵襲力增加[9]。研究證實，胃癌患者中，相較于非癌組織，癌組織存在Her-2基因擴增、蛋白質過表達現象[10]。本研究中，Her-2表達靈敏度為58.62%，且不同臨床分期、淋巴結轉移患者Her-2表達陽性率存在差異。故推測Her-2與血清腫瘤標志物異常升高在胃癌早期輔助診斷中發揮重要作用，有利于評估臨床分期，判斷淋巴結轉移及預后。此外，本研究還發現，CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2聯合檢測靈敏度高達91.38%，明顯優于各項單獨檢測，這說明Her-2、血清腫瘤標志物聯合檢測可提升胃癌早期診斷靈敏度，在診斷中應用價值更高。

綜上所述，Her-2、血清腫瘤標志物(CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9)聯合檢測可提升胃癌早期診斷靈敏度。