劉海俠 劉森
摘要:傳染性法氏囊病也稱為“甘保羅病”,是由一種雙RNA病毒(傳染性法氏囊病病毒,IBDV)感染引起的,是一種高度接觸性傳染病。從患禽法氏囊中最容易分離到該病毒,但也可從其他器官分離到。感染可呈亞臨床型和臨床型。通過病史、癥狀和剖檢可初診,確診可進行血清學診斷。該病尚無治療方法,養禽場需做好衛生防疫管理。
關鍵詞:雞;傳染性法氏囊病;臨床表現;診斷;預防
中圖分類號:$858.31 文獻標識碼:B 文章編號:2095-9737(2020)06-0127-02
1病原與傳播
IBDV隨患禽糞便被排出,并通過污染物在舍間傳播。該病毒十分穩定,從雞舍中很難被根除,病毒野毒株的毒力差異較大。在歐洲首次發現了可造成高發病率和高死亡率的超強毒株。在東半球都有這類病毒的傳播,1999年在南美檢測到該類病毒。美國在2009年檢測到該類病毒。在我國,該病仍然是養雞業的主要傳染病之一。近幾年來,經過科研部門及廣大獸醫工作者的共同努力,使該病在一定程度上得到了有效控制。
采集發病早期雞的樣本,接種8~11日齡無抗體雞胚,可分離到IBDV。絨毛尿囊膜接種比尿囊腔接種更敏感。分離IBDV也可采用源自法氏囊的細胞培養物和已建立的禽源和哺乳動物源細胞系,可在雞胚成纖維細胞分離到一些毒株。IBDV細胞適應株能夠產生細胞病變,可用于血清學定量試驗。已確認IBDV有兩種血清型,二者之間的抗原差異很大。血清型Ⅱ型能感染雞和火雞,但不會造成臨床發病或免疫抑制。已經鑒定出IBDV變異株與標準株存在著主要抗原的差異。
2臨床表現
傳染性法氏囊病是一種高度接觸性傳染病,感染結果取決于雞的日齡、品種以及病毒毒力。感染可呈亞臨床型和臨床型。3周齡之前的感染通常呈亞臨床型。臨床型感染最常見于3~6周齡雞,但18周齡的雞也曾出現過嚴重感染。早期的亞臨床感染可造成嚴重經濟損失,因此也是最重要的疾病表現形式。該病可破壞法氏囊、胸腺和脾臟中的未成熟淋巴細胞,從而出現嚴重的、長期性免疫抑制。體液免疫(B細胞)應答受到的影響最嚴重;細胞介導(T細胞)的免疫應答受影響的程度較小。早期感染IBDV引起免疫抑制的雞,對疫苗接種不能夠產生良好的免疫應答,易發生由正常的非致病性的病毒和細菌引起的感染。IBDV感染??稍斐沙R姴〖又亍W儺惗局旮腥居浊菘梢饋喤R床感染,而早期感染,可造成嚴重的長期性免疫抑制和法氏囊萎縮。在臨床感染時,常于潛伏期3~4天后突然發病。雞表現有嚴重的虛脫、共濟失調、水樣下痢、羽毛臟亂、肛門周圍污穢、啄肛和泄殖腔炎癥。死亡率可達20%以上。在1周內即可康復,肉雞增重延緩3~5天。有母源抗體存在時可改變臨床病程。
3病理變化
大體剖檢可見法氏囊腫大、水腫,呈淡黃色,偶爾出血。胸部、股部和腿部的肌肉常見充血和出血。IBDV感染后的康復雞,由于法氏囊濾泡發生破壞且不能再生,而使法氏囊萎縮、變小。
4血清學診斷
血清學診斷方法有瓊脂擴散試驗(AGP)、熒光抗體技術、酶聯免疫吸附測定(ELISA)、中和試驗等。現主要介紹應用熒光抗體技術檢測IBDV。
(1)材料的準備。載玻片和蓋玻片(若干)、冰凍切片機、熒光標記的抗IBDV抗體、丙酮和甘油(足量)。
(2)試驗操作。步驟1:制片。檢測法氏囊一般采用觸片或冰凍切片,觸片按常規方法進行。冰凍切片將病雞的法氏囊切成約3cm×3cm的小塊,置冷臺上,以6%明膠做支持物,迅速冷凍。立即用冰凍切片機切片,溫度在-16~-20℃之間。切片厚約5um,丙酮固定,準備染色。標本如需保存,應在-20℃以下密封保存。步驟2:染色。首先將熒光抗體用0.005M、pH值為7.2的PBS稀釋,于標本片上滴加熒光抗體稀釋液,然后置濕盒中,37℃感作30min取出。接著先以pH值為7.2的PBS沖洗,繼以自來水沖洗5min左右,后以蒸餾水沖洗,自然干燥或風扇吹干。最后滴加緩沖甘油封片(無熒光甘油9份,pH值為7.2的PBS 1份)。步驟3:鏡檢。以熒光顯微鏡于暗室中觀察。
(3)結果判定。若胞漿內不出現顆粒狀或彌散狀特異熒光判為陰性,用“一”表示。若胞漿內出現顆粒狀或彌散狀特異熒光判為陽性:“+”表示1%~25%的細胞出現熒光;“++”表示25%~50%的細胞出現熒光;“+++”表示50%~75%的細胞出現熒光;熒光強度用“++++”表示75%以上的細胞出現熒光。
5預防與控制
該病尚無治療方法。對污染雞場在空舍后進行嚴格的消毒,效果有限。可使用多種不同的低致病性的雞胚苗或細胞苗,在1~21日齡時進行點眼、飲水或皮下注射。母源抗體對疫苗的免疫應答有干擾,使用毒力稍強的疫苗株可減少較高水平抗體的影響。對于肉雞群(以及一些商品蛋雞),將育雛早期階段的雛雞母源抗體維持在較高水平,可減少早期感染以及隨后出現的免疫抑制。
種雞群在生長期,應進行一次或多次免疫接種,首次可使用活苗免疫,開產前用油乳劑滅活苗再次免疫??墒褂秒u胚、法氏囊組織或細胞培養制成的滅活苗。與活苗相比,滅活苗產生的抗體水平更高、更均勻,免疫期也更長。應使用病毒中和試驗或ELISA等血清學定量檢測方法,定期監測種雞的抗體水平。如果母雞的抗體水平下降,則應再次免疫接種,使其后代維持足夠的免疫力。