不同采摘時間天胡荽揮發油成分GC-MS分析

熊 峻，佘金明，劉宏偉*，王 虹，龔力民

(1.常德職業技術學院，湖南 常德 415000；2.湖南中醫藥大學 藥學院，湖南 長沙 410000)

天胡荽為傘形科天胡荽屬植物天胡荽HydrocotylesibthorpioidesLam的全草，具有清熱利濕、解毒消腫等功效，主要用于治療黃疸、痢疾、水腫、淋癥、目翳、喉腫、癰腫瘡毒、帶狀皰疹、跌打損傷等[1]。目前對天胡荽化學成分揮發油、黃酮類等物質的提取和含量測定較多[2-8]，而對于不同采收時間天胡荽揮發油的組分分析尚未見報道。為了更好地開發湖南的天胡荽資源，本實驗采用水蒸氣蒸餾法提取不同采收時間天胡荽的揮發油，通過GC-MS對其成分進行分析鑒定，定量定性分析不同采收時間天胡荽揮發油的含量及組分變化，探討天胡荽揮發油組分的季節性差異，以期為湖南天胡荽資源的進一步開發利用提供依據。

1 材料與方法

1.1 藥材、試劑與儀器

實驗用天胡荽樣品共6批分別于2019年3月12日(編號20190312)、4月15日(編號20190415)、5月14日(編號20190514)、6月12日(編號20190612)、7月11日(編號20190711)、8月10日(編號20190810)采自湖南省常德市穿紫河沿岸，經常德職業技術學院藥學系佘金明教授鑒定無誤。

氣質聯用儀為GC-MS QP2010(日本島津公司)，彈性石英毛細管柱DB-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm，日本島津公司)，GC-MS Solution色譜工作站(日本島津公司)。萬分之一電子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)，乙酸乙酯(湖南匯虹試劑有限公司)，無水硫酸鈉(湖南匯虹試劑有限公司)，水蒸氣蒸餾簡易裝置。

1.2 實驗方法

1.2.1 揮發油提取 將6批不同時間采收的天胡荽半陰干品剪碎，各精密稱取50 g，分別置于1 000 mL圓底燒瓶中，加入500 mL蒸餾水，上接揮發油提取器和冷凝管，回流提取8 h。用適量乙酸乙酯洗脫揮發油，充分搖勻靜止后，取油層，用無水硫酸鈉干燥，用乙酸乙酯定容至4 mL，用0.45 μm微孔濾膜過濾，得供試品。

1.2.2 氣相色譜-質譜條件 設置程序，程序升溫：起始溫度40 ℃，保持6 min，以10 ℃/min升溫到150 ℃保持1 min，再以5 ℃/min升溫到240 ℃保持11 min至完成分析；氣化室溫度為250 ℃；載氣為氦氣，流速為1.0 mL/min；進樣量為1 μL，分流比為15∶1；電離方式為EI源，70 eV；離子源溫度為200 ℃；溶劑延遲3 min；質量掃描范圍35～500 amu；SCAN掃描。質譜檢索標準庫：美國NIST質譜數據庫，人工圖譜解析，采用峰面積歸一化法定量分析各組分相對百分含量。

2 結果與分析

2.1 揮發油總量比較

按“1.2.1”所述方法分別提取6批天胡荽的揮發油，所得的揮發油含量均約為0.15 mL，表明不同時間采收的天胡荽揮發油含量無顯著差異。

2.2 不同采收期揮發油組分分析

注：1.醋酸正丙酯；2.欖香烯；3.(E)-β-法呢烯；4.氧化石竹烯；5.α-紅沒藥醇；6.新植二烯；7.n-棕櫚酸；8.鐮葉芹醇；9.葉綠醇。

按“1.2.2”所述方法分別獲得6批天胡荽揮發油成分總離子流色譜，如圖1所示。對色譜圖中匹配度>85%的成分進行分析鑒定，共鑒定出60個化合物。3月、4月、5月、6月、7月、8月樣品中鑒定出的揮發油成分分別為27個、29個、22個、29個、29個和27個。見表1。

表1 不同采摘時間天胡荽揮發油成分和相對面積

續表1

結果表明，3-8月樣品中共有揮發油成分9個，分別為醋酸正丙酯、欖香烯、(E)-β-法呢烯、氧化石竹烯、α-紅沒藥醇、新植二烯、n-棕櫚酸、鐮葉芹醇、葉綠醇。這9個共有揮發油成分占3-8月樣品的總比率分別為83.41%、85.10%、95.26%、92.98%、91.88%、88.09%。由此可見，6批不同采摘時間天胡荽共有揮發油成分總含量大致相同，其余含量較低成分有所差異。鐮葉芹醇是含量最高的成分，在3-8月的樣品中占揮發油成分總量依次為44.68%、68.46%、85.19%、83.40%、84.58%、81.08%，其中5-8月相對穩定；葉綠醇的相對含量在5月最高；β-法呢烯的相對含量在3月高達30.82%，而其他月份均不超過1%；另外6種共有成分相對含量均較低。主成分鐮葉芹醇具有鎮靜、鎮痛、抗癌、抗細菌、抗真菌和神經細胞保護等藥理作用[9]，由此推斷，不同采摘時間天胡荽的功效會有所不同。

2.3 不同采收期揮發油成分種類分析比較

對3-8月樣品中的揮發油成分進行分類，見表2。結果表明3-8月樣品中均含有脂肪酸、酯類、烯烴、醇類、醚類，其中醇類是3-8月樣品中相對峰面積最大的成分(3月至8月樣品中醇類的相對峰面積依次是 50.26%、74.34%、91.80%、88.08%、89.18%、85.00%)，烯烴次之(3-8月樣品中烯烴的相對峰面積依次是40.18%、19.43%、1.99%、3.95%、4.60%、8.80%)，同時烯烴也是所含成分數量最多的一類，這與之前已報道的黔產天胡荽揮發油種類規律較一致[2]。這兩類主要揮發油成分占3-8月樣品相對峰面積依次為90.44%、93.77%、93.79%、92.04%、93.78%、93.80%。對不同采摘時間天胡荽中的揮發油成分進行分類可見，兩類主要揮發油成分醇類和烯烴占3月至8月樣品的相對峰面積均在90%～94%之間，較為穩定。

表2 不同采摘時間天胡荽揮發油成分種類和相對峰面積

3 討論

不同采摘時間的天胡荽樣本揮發油成分含量表現出一定差異性。天胡荽中含量最大的揮發油成分為鐮葉芹醇，其含量由3月的44.68%上升為5月的85.19%，5-8月含量沒有明顯的時間性變化規律，但其含量變化在整個揮發油組分中已經趨于相對穩定，這與天胡荽的花、果期處于4-9月較為一致。

天胡荽揮發油成分以醇類和烯烴類為主，醇類含量由3月50.26%升至5月91.80%，6月、7月、8月依次有少許下降，烯烴含量由3月的40.18%降至5月的1.99%，6月、7月、8月又依次有少許上升，而3-8月這兩類成分的總量穩定集中在90%～94%之間，說明不同采摘時間天胡荽揮發油成分的變化主要是醇類和烯烴類組分的變化。

天胡荽揮發油成分隨采摘時間的變化對于評價天胡荽揮發油整體功效及驗證其鎮靜、鎮痛、抗癌、抗細菌、抗真菌和神經細胞保護等可能具有重要的研究意義。因此，可根據天胡荽揮發油的組分變化，對其藥理藥用價值進行進一步開發利用。