單寧酶固液發(fā)酵對(duì)比試驗(yàn)

劉會(huì) 周瑞琪 金偉

摘要 ? ?通過對(duì)比單寧酶的液體發(fā)酵和固體發(fā)酵發(fā)現(xiàn)，固體發(fā)酵方式潛力較大、成本低、產(chǎn)率高，且充分利用了農(nóng)林業(yè)廢棄物資源，有利于環(huán)境和能源的可持續(xù)發(fā)展。

關(guān)鍵詞 ? ?單寧酶;固體發(fā)酵;液體發(fā)酵;農(nóng)林廢棄物

中圖分類號(hào) ? ?TQ925 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ? ?A

文章編號(hào) ? 1007-5739（2020）15-0228-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）

Abstract ? ?By comparing the liquid fermentation and solid fermentation of tanninase， it was found that solid fermentation had great potential， low cost and high yield， and made full use of agricultural and forestry waste resources， which was conducive to the sustainable development of the environment and energy.

Key words ? ?tannase; solid fermentation; liquid fermentation; agricultural and forestry waste

單寧酶可用于處理茶飲料“冷后渾”、啤酒沉淀、果汁果酒變質(zhì)等問題，廣泛應(yīng)用于食品、飲料、制革、化妝、醫(yī)藥等行業(yè)[1-2]，近年來還用于醫(yī)藥中間體——沒食子酸和相關(guān)精細(xì)化學(xué)品的制備[3-4]。

單寧酶的發(fā)酵生產(chǎn)有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵2種方式。液體發(fā)酵是傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵方法，具有均一性好、工藝易控制等優(yōu)點(diǎn);固體發(fā)酵也有其特有的優(yōu)勢(shì)，比如培養(yǎng)基成本低、設(shè)備和技術(shù)較簡(jiǎn)單、能耗低等。本文對(duì)2種發(fā)酵生產(chǎn)單寧酶的工藝進(jìn)行全面的比較，以期為現(xiàn)代發(fā)酵工藝研究提供參考。

1 ? ?材料與方法

1.1 ? ?試驗(yàn)材料

供試菌株：黑曲霉TmF3，由中科院強(qiáng)磁場(chǎng)與離子束物理生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室誘變獲得。

產(chǎn)孢培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基。

種子培養(yǎng)基：葡萄糖12 g/L，CaCO3 10 g/L，用改良Mandels營(yíng)養(yǎng)鹽液配制[5]。

液體發(fā)酵培養(yǎng)基：秈米粉25 g/L，單寧酸10 g/L，CaCO3 2.5 g/L，（NH4）2SO4 5.0 g/L，KH2PO4 1.5 g/L，MgSO4 0.15 g/L。

固體發(fā)酵培養(yǎng)基：250 mL三角瓶中加入稻殼4.4 g、麩皮0.5 g和五倍子粉1.0 g，液固比2∶1，營(yíng)養(yǎng)鹽溶液組成為（NH4）2SO4 21 g/L，MgSO4·7H2O 1.0 g/L，NaCl 1.0 g/L。

1.2 ? ?試驗(yàn)方法

1.2.1 ? ?孢子懸浮液配制。從產(chǎn)孢培養(yǎng)基上刮取黑曲霉孢子制成孢子懸液。

1.2.2 ? ?液體發(fā)酵。取1 mL孢子懸液（約含5.3×107個(gè)孢子）接種于含40 mL種子培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，30 ℃、200 r/min培養(yǎng)12 h。取2 mL種子液接種于含50 mL液體發(fā)酵培養(yǎng)基的250 mL三角瓶中，30 ℃、180 r/min培養(yǎng)80 h。……