辣木葉提取物對蛋鴨抗氧化、脂質代謝及免疫功能的影響

饒體宇 ， 吳伯梅 ， 鮮思美 *， 張 友 ， 包濤濤 ， 楊倩

（1.貴州大學動物科學學院，貴州貴陽 550025；2.貴州省動物疫病研究所，貴州貴陽 550025）

辣木（Moringa oleifera Lam）原產于印度，為辣木科辣木屬速生喬木樹種（劉嬌，2019）。其葉營養價值豐富，食用安全，內含黃酮類、多酚類、有機酸類等多種功能性成分 （Gopalakrishnan等，2016），2012年被我國衛生部門公布為新資源食品 （張彤，2015；長春，2007）。辣木葉提取物主要的活性成分是辣木葉黃酮（FMOL）。研究表明，FMOL具有抗氧化（Siddhuraju 等，2003）、抗菌（王遠等，2017）、增強機體免疫力（張幸怡等，2016）等功能。另外，FMOL在調節機體脂質代謝方面也具有積極作用（孫朦等，2018）。目前關于辣木葉提取物對蛋鴨脂質代謝、抗氧化性能及免疫功能的影響鮮有報道。因此，本研究以25周齡金定蛋鴨為試驗動物，在飼糧中添加不同水平的辣木葉提取物，研究其對蛋鴨抗氧化、脂質代謝及免疫相關指標含量的影響，為辣木葉提取物在蛋鴨健康養殖中的應用提供一定的理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 辣木葉提取物購自蘭州沃特萊斯生物科技有限公司，有效成分辣木黃酮含量為20%。

1.2 試驗設計及飼養管理 試驗選用同一鴨舍內體況良好、產蛋量相近的25周齡金定蛋鴨480只，隨機分成4組，每組5個重復，每個重復24只。對照組飼喂基礎飼糧 （不含辣木葉提取物）；試驗組分別飼喂在基礎飼糧中添加1、1.5 g/kg和2 g/kg的辣木葉提取物 （有效成分辣木黃酮含量分別為200、300 mg/kg和400 mg/kg）的試驗飼糧。基礎飼糧及營養水平見表1。

表1 基礎飼糧組成及營養水平（風干基礎）

試驗期間，每天9：00和17：00各喂飼料一次。采用大棚旱養模式，自由采食、飲水。每天光照15 h，清糞一次。試驗分為預飼期7 d和正飼期56 d，共 63 d。

1.3 測定指標與方法

1.3.1 抗氧化指標測定 飼養試驗結束前12 h禁食，自由飲水。每個重復隨機抽取3只蛋鴨，翅靜脈采血2 mL，3000 r/min離心10 min，分離血清于-20℃保存備用。另隨機抽取3枚鴨蛋，分離蛋黃，將新鮮蛋黃置于平皿中，用玻棒攪拌均勻后抽取2 mL于離心管中，－20℃保存備用。血清和蛋黃中丙二醛 （MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性均采用上海科興商貿有限公司生產的ELISA試劑盒進行測定（產品批號均為：LOT NO.:1905N）。

1.3.2 脂質代謝指標測定 樣本采集方法同1.3.1，用ELISA試劑盒分別測定血清和蛋黃中甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量。

1.3.3 免疫指標測定 血清樣本的采集方法同1.3.1；另外，每個重復隨機抽取3份新鮮十二指腸樣本，每份樣本稱取1 g左右，用預冷的PBS（pH為 7.2～7.4，濃度為 0.01 mol/L）按 1：9的比例在冰浴上勻漿，5000 r/min離心15 min取上清液待檢，采用上海科興商貿有限公司生產的ELISA試劑盒進行測定（產品批號：LOT NO.1904N）。

1.4 統計分析方法 試驗數據采用SPSS 24軟件進行單因素方差分析（one-way ANOVA），Duncan氏法進行多重比較，結果以“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果

2.1 辣木葉提取物對蛋鴨血清及蛋黃抗氧化指標的影響 由表2可知，與對照組相比，各試驗組的血清MDA含量無顯著變化（P＞0.05），2 g/kg組蛋黃MDA含量顯著降低，降低了16.6%（P＜0.05）；與對照組相比，1.5、2 g/kg組血清和蛋黃中SOD活性顯著提高，1.5 g/kg組血清和蛋黃SOD分別提高17.3%和 30.2%（P ＜ 0.05），2 g/kg組血清和蛋黃SOD分別提高31.1%和43.9%（P＜0.05），在改善血清和蛋黃SOD活性方面2 g/kg組效果較好；與對照組相比，1、1.5 g/kg組血清和蛋黃中GSH-Px活性無顯著變化 （P＞0.05），2 g/kg組蛋鴨血清和蛋黃GSH-Px活性顯著提高，分別提高14.2%和15.5%（P ＜ 0.05）。

表2 辣木葉提取物對蛋鴨血清及蛋黃抗氧化指標的影響

2.2 辣木葉提取物對蛋鴨血清及蛋黃脂質代謝指標的影響 由表3可知，與對照組相比，飼糧中添加辣木葉提取物對血清中TG、TC和LDL-C含量均無顯著影響 （P＞0.05），1.5、2 g/kg組的血清HDL-C含量顯著升高17.1%和26.1%（P＜0.05）。與對照組相比，各試驗組TG含量無顯著差異（P＞0.05）；2 g/kg組蛋黃TC含量顯著降低14.3%（P＜ 0.05）；1.5、2 g/kg組蛋黃 HDL-C 含量分別升高9.2%和 20.9%（P＞0.05），LDL-C含量分別降低9.8%和15.9%（P＜0.05）。

表3 辣木葉提取物對蛋鴨血清及蛋黃脂質代謝指標的影響

2.3 辣木葉提取物對蛋鴨免疫指標的影響 由表4可知，與對照組相比，飼糧中添加1.5、2 g/kg的辣木葉提取物可顯著提高蛋鴨血清IgA和十二指腸sIgA含量，血清IgA含量分別提高了40.2%和47.5%（P＜0.05），十二指腸sIgA含量分別提高了 41.8%和 65.6%（P＜0.05）；2 g/kg組的血清IgG、IgM含量顯著高于空白對照組，分別提高16.5%和35.4%（P＜0.05）。

表4 辣木葉提取物對蛋鴨免疫指標的影響

3 討論

3.1 辣木葉提取物對蛋鴨血清及蛋黃抗氧化指標的影響 MDA是自由基作用于脂質后產生的過氧化反應終產物，在一定程度上反映了脂質過氧化強度和膜系統損害程度 （劉嬌，2019）；SOD和GSH-Px是機體內重要的抗氧化酶，SOD能夠將高活性的O2-催化為低活性的過氧化氫，而GSH-Px能分解體內的過氧化物，SOD和GSH-Px相互作用，進而保護細胞膜功能與結構的完整性（張艷梅等，2019）。研究表明，黃酮類化合物可抑制自由基對機體的氧化損傷，發揮抗氧化作用（謝相悅等，2018）。岳秀潔等（2016）、王遠等（2017）在體外抗氧化試驗中研究發現，辣木葉黃酮對1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基具有較好的清除能力，孫朦等（2018）、陳瑞嬌等（2007）也證實了辣木黃酮能夠顯著降低小鼠MDA含量和提高SOD活性。本試驗結果表明，飼糧中添加2 g/kg的辣木葉提取物可顯著降低蛋黃中MDA含量，說明辣木葉提取物能在一定程度上減少蛋鴨體內的脂質過氧化；1.5、2 g/kg組血清和蛋黃中SOD活性顯著提高；2 g/kg組蛋鴨血清和蛋黃中GSH-Px活性顯著提高，說明辣木葉提取物可通過提高蛋鴨體內抗氧化酶活性來發揮抗氧化活性。

3.2 辣木葉提取物對蛋鴨血清及蛋黃脂質代謝的影響 有研究表明，HDL-C降低和LDL-C升高都是導致心血管疾病的獨立因素，HDL能夠將存在于肝外組織的膽固醇轉運到肝臟進行再循環或被分解代謝，有效介導膽固醇的逆向轉運（韓獻華等，2016），而較高的LDL-C則是心血管疾病的主要危險因素（陳銀華等，2018）。賀家勇等（2018）研究表明，12、24 mg/kg的玫瑰黃酮能夠顯著降低TC、TG水平，且能顯著升高HDL-C水平；孫朦等（2018）研究表明，飼糧中添加高、中劑量的辣木黃酮飼喂高脂血癥小鼠，能極顯著降低血清中TC、TG、LDH-C含量并極顯著提高HDL-C含量，謝貴林等（2015）研究發現，100 μmol/L 的雪菊黃酮能夠通過抑制HMG-COA活性來降低肝細胞中總膽固醇含量，Pankaj等（2010）研究證明，辣木葉提取物能夠降低HMG-CoA還原酶的活性。本試驗結果表明，飼糧中添加2 g/kg辣木葉提取物能顯著降低蛋黃TC、LDL-C和顯著提高HDL-C含量，分析其原因，可能是由于辣木黃酮能降低HMG-CoA還原酶活性，進而減少肝臟中膽固醇的合成，并通過提高HDL-C的含量，促進肝外組織的膽固醇逆向轉運到肝臟進行再循環或被分解，進而降低了鴨蛋中TC含量。

3.3 辣木葉提取物對蛋鴨免疫指標的影響IgG、IgA和IgM是體液免疫應答中發揮免疫功能的重要免疫分子，楊汝才（2019）等在飼糧中添加0.2%和0.4%的辣木黃酮飼喂蛋雛鴨，結果發現0.4%組蛋雛鴨血清中IgA含量顯著提高 （P＜0.05），張幸怡等（2016）在飼糧中添加0.9～1.8 g/kg的辣木葉提取物發現，血液中IgA和IgG的含量顯著提高。而sIgA是黏膜免疫的主要效應因子（王定越等，2012），在免疫防御系統中占有非常重要的作用，其抗病能力隨sIgA分泌量的增加而增加（謝全喜等，2013）。研究表明，sIgA能干擾病原生物附著于宿主細胞，從而減少病原體的傳播及感染（李偉等，2008），金鐘（2014）用中劑量的沙棘葉黃酮飼喂小鼠，結果發現，小鼠腸道黏膜中sIgA的含量顯著提高，本試驗結果表明，飼糧中添加2 g/kg的辣木葉提取物可顯著提高蛋鴨血清中IgG、IgA、IgM和十二指腸中sIgA含量，這可能是因為辣木葉提取物中的黃酮類化合物具有抗菌、消炎、清除自由基等作用，提高了抗體的合成能力，從而增強了機體的特異性免疫功能（王志剛等，2019）。

4 結論

飼糧中添加辣木葉提取物可在一定程度上提高蛋鴨的抗氧化能力，降低蛋黃中膽固醇含量，促進血清中IgG、IgA、IgM和十二指腸中sIgA的分泌，本試驗條件下，2 g/kg組效果最好。