新吉富羅非魚人工催產試驗

王茂元，胡振禧，田田

（福建省淡水水產研究所，福建 福州 350002）

羅非魚原產于非洲，屬于鱸形目（Perciformes）、麗魚科（Cichlidae）、羅非魚屬，常見品種有尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）、奧利亞羅非魚（O.aureas）、莫桑比克羅非魚（O.mossambica）等。因其具有食性雜、生長快、抗病力強、繁殖力強、肉質好、群體產量高等優點，已經成為全世界廣泛養殖的淡水魚類之一，也是我國南方地區重要的出口創匯品種。羅非魚具有性成熟早、產卵周期短、一年多次營巢產卵、口腔孵育等特點，同時對繁殖條件要求不高，生產中羅非魚苗的獲得主要還是依靠其自然繁殖，很少有人對其進行人工催產繁育研究。隨著羅非魚產業的不斷發展壯大，為改善和提高其生產性能，一些學者利用家系選育、遠緣雜交、雌核發育、多倍體選育等方法對羅非魚進行品種選育時，就需要獲得大量的成熟卵子或受精卵。但羅非魚屬一年多次產卵型魚類，其個體間性腺發育不同步，卵子成熟過程短，進行人工繁殖比較困難，難以獲得大量成熟卵子進行人工授精，已經成為制約羅非魚遺傳育種的瓶頸問題，也影響羅非魚相關研究的深入開展。

目前，國內外關于使用催產激素誘導羅非魚性腺發育或進行人工催產繁育的研究報道較少，所使用的受試魚和激素的種類與劑量也不盡相同。該研究通過注射不同催產藥物組合與劑量，評估混合催產激素對新吉富羅非魚繁育的影響，為今后開展羅非魚全人工催產與繁殖奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用新吉富羅非魚親魚由福建省淡水水產研究所科研中試基地提供，該魚原引于上海海洋大學水產動物種質試驗站，均為1 齡魚，體重350-500 g/尾。催產藥物地歐酮（DOM）、絨毛膜促性腺激素（HCG）、促黃體素釋放激素A2（LRH-A2）、促黃體素釋放激素A3（LRH-A3）均購自寧波第二激素廠。

1.2 雌、雄親魚的判別與培育

雌性羅非魚腹部有3 個孔，即肛門、生殖孔和泌尿孔，泌尿孔在生殖突起的頂端，生殖孔位于肛門和泌尿孔之間，外形為“一”字形的狹長開口，且與生殖突垂直。雄性羅非魚只有2 個開孔，即肛門和尿殖孔。2019 年4 月選擇外部生物學特征明顯、無病無傷和體型健壯的親魚各100 尾，分別放養在水深1.0 m 和面積100 m2的水泥池中培育。培育期間水溫為20～28 ℃，pH 值6.7～7.9，微孔增氧，投喂粗蛋白含量為32%的羅非魚專用配合飼料，日投餌量為魚體質量的5%左右。

1.3 試驗方法

1.3.1 性成熟親魚的選擇 催產前1 d 通過活體檢視法，分別從親魚培育池選擇性腺發育良好雌、雄魚各60 尾，分別暫養在2.0 m×1.0 m×1.2 m 的網箱中。活體檢視方法為：性成熟較好的雌魚，腹部隆起且柔軟，性腺輪廓明顯，生殖孔顏色為粉紅色，輕輕擠壓腹部有卵子流出，且卵粒游離有彈性；雄性成熟的雄魚輕擠腹部有透明、稍黏稠的精液從尿殖孔射出。

1.3.2 催產藥物組合與注射 雌、雄羅非魚親魚采用一次性腹鰭基部注射法催產，雄魚注射劑量為雌魚的一半，注射劑量控制在1 mL/尾以內。試驗設試驗組和空白對照組，試驗組催產藥物分為3 個組合為：

①DOM6 mg/kg+LRH-A26 μg/kg+HCG 2000IU/kg；

②DOM9 mg/kg+LRH-A29 μg/kg+HCG 3000IU/kg；

③DOM 12 mg/kg+LRH-A212 μg/kg+HCG 4000 IU/kg。

空白對照組注射相同劑量的生理鹽水。催產后的親魚按照雌雄比例1∶1 放入1.0 m×1.0 m×1.0 m的網箱中，每個網箱2～3 對親魚，每個網箱放置一個微孔增氧進行24 h 不間斷增氧，催產時水溫為（28.6±0.5）℃。

1.3.3 人工授精 催產后24 h 檢查雌魚含卵數量，若已經含卵，則不用進行人工授精，若未含卵則進行人工授精，此時發情的雌魚生殖突會突出。人工授精采用干法受精法，將雌雄親魚撈起，用毛巾擦干，先將雌魚卵子擠入不銹鋼盆中，然后用同樣的方法擠入精液，用羽毛輕輕攪動，使得精卵充分混合。然后加入清水輕輕攪拌后靜置1 min，倒掉污水，再用清水清洗2～3 次，放入孵化器內進行孵化，孵化期間發現有壞死卵時進行剔除，定期換水，水溫27.3 ℃。

1.4 受精卵孵化

將受精卵轉移至45 cm×30 cm×35 cm 的魚缸內孵化，缸內設有40 目的15 cm×10 cm×12 cm 孵化網，微充氣，使受精卵翻滾懸浮。孵化期間若發現有死卵立即剔除，避免破壞水質，防止受精卵感染水霉。

2 結果

2.1 催產后親魚行為觀察

人工催產后，經過一段時間親魚開始發情，產卵前，親魚在網箱內開始相互追逐打斗，雄魚由于個體上的優勢，占據網箱下層水體，雌魚則在上層水體。即將產卵時，雌魚生殖突突起，在水層底部游動，并由有做窩行為，不停用嘴啃食網箱底部，在此期間，雄魚會主動與之嬉咬、追逐、打轉，直到雌魚產卵，雄魚排精，然后雌魚會隨即將卵吸入口中進行孵化，雌魚每隔數分鐘產卵一批。

2.2 催產結果

此次共催產親魚48 對，其中藥物組合①共催產16 對，產卵6 對，平均產卵率為37.5%，平均受精率為70.6%；藥物組合②共催產20 對，產卵13 對，平均產卵率為65.0%，平均受精率為93.4%；藥物組合③共催產12 對，死亡2 對，產卵6 對，平均產卵率為60.0%平均受精率為86.3%。在水溫為28.6±0.5 ℃時，催產效應時間20～26 h。

2.3 受精卵觀察與孵化

新吉富羅非魚卵為沉性卵、無黏性，形如鴨梨，充滿卵黃，尖的一端為動物極，鈍的一端為植物極。卵粒的大小隨著親魚的大小而略有差異，當受精卵吸水后，卵粒膨脹，卵膜透明，整粒卵飽滿而富有彈性。在水溫為（28.6±0.5）℃時，受精卵孵化時間為60～72 h，其在人工條件下孵化培育成活率較高，除個別畸形魚苗出膜2～3 d 后死亡外，正常魚苗基本都能存活。

3 討論

羅非魚為一年多次產卵魚類，且性腺發育不同步，在進行人工催產繁殖的時候不易選出成熟度合適的親魚，會直接影響人工繁殖的效果。因此，羅非魚親魚性腺的成熟度對催產試驗起重要作用。在繁殖季節，性腺成熟好的雌魚，順著卵巢方向稍用力擠壓，能擠出卵，且卵粒游離，飽滿有彈性。性成熟的雄魚輕擠腹部，會有透明、稍黏稠的液體從尿殖孔射出。經實踐證實，建議羅非魚人工催產繁育的時節選擇在年初越冬后第一次產卵期進行效果較好。

在生產中，為促使親魚能集中產卵，滿足生產性育苗的需求，可適當采取生理、生態學調控措施，其中用性激素及類似物進行促熟催產較普遍。不同劑量催產激素的催產效果也不同，劑量過低其催產效果不明顯，劑量過高則可能抑制催產效果甚至導致親魚死亡，該試驗中，催產藥物組合②的效果較好，產卵率和受精率較高，說明應當使用適量比例的多種催產激素組合人工催產羅非魚。