晚期糖基化終產(chǎn)物在老年心房顫動患者血清中的表達及意義

李 瑩，紀玉強，蔡 琴，李晨輝

(西安市第一醫(yī)院心內科，陜西 西安 710002)

晚糖基化終產(chǎn)物(Advanced glycation end products， AGEs)是蛋白質、脂質、核酸在非酶糖基化反應下，自發(fā)地與葡萄糖及其他還原糖反應產(chǎn)生穩(wěn)定的具有活性的一類聚合物。AGEs有多種受體，其中晚期糖基化終產(chǎn)物受體(Receptor for advanced glycation endproducts， RAGE)是AGEs最具特征性、且是目前研究最廣泛、最深入的AGEs受體。AGEs與RAGE結合后誘導產(chǎn)生多種損傷因子如白介素-1a(Interleukin- 1a， IL-1a)、核轉錄因子NF-κB、白介素-6(Interleukin-6，IL-6)、腫瘤壞死因子-a(Tumor necrosis factor-α， TNF-α)等，誘導炎性反應和氧化應激，產(chǎn)生致病效應[1]。體內AGEs有多種不同的形式，目前已知的有羧甲基賴氨酸(Carboxymethyllsine，CML)、羧乙基賴氨酸、交聯(lián)素等。羧甲基賴氨酸是目前研究最多且易于檢測的一種晚期糖基化終產(chǎn)物。有研究發(fā)現(xiàn)，AGEs與RAGE結合后，增加心肌細胞的凋亡進而損傷心肌細胞[2]。心房顫動在老年人群中是非常常見的一種心律失常，且在老年人群中患病率明顯增高。心房顫動可引起腦栓塞、心力衰竭等并發(fā)癥嚴重威脅老年人生活質量。AGEs隨著年齡的增長會慢慢增多。有研究發(fā)現(xiàn)，心房顫動患者血清AGEs水平升高[3-4]。而有關老年心房顫動與晚期糖基化終產(chǎn)物的研究較少，本研究旨在通過檢測老年心房顫動患者血清CML水平及TNF-α、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)水平變化，探討其相關臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年6月至2018年1月在我院心血管內科住院的老年持續(xù)性心房顫動患者50例(年齡≥65歲)，其中男26例，女24例，年齡69～89歲，平均(79.91±5.55)歲。對照組為同期住院的年齡≥65歲非心房顫動患者30例，其中男12例，女18例。年齡66～89歲，平均(79.80±4.775)歲。持續(xù)性心房顫動診斷按照 2016 年《歐洲心房顫動管理及治療指南》中關于持續(xù)性房顫的相關診斷標準。排除標準：糖尿病、其他嚴重心律失常、惡性腫瘤、合并感染病史、慢性炎癥疾病、嚴重肝腎功能不全、自身免疫性疾病、甲狀腺功能異常者。兩組患者在性別、吸煙、飲酒、冠心病史、高血壓病史、體重指數(shù)(Body mass index，BMI)方面比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 所有研究對象均需采集詳細病史，行體格檢查及進行血液生化檢驗查血常規(guī)、電解質、肝腎功、血脂、血糖、心肌酶、高敏肌鈣蛋白T、甲狀腺功能、血漿超敏C反應蛋白(High-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)、氨基末端腦鈉肽前體(N-terminal pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP)等，并行心臟超聲檢查。研究對象晨時空腹12 h，從肘前靜脈抽取肘靜脈血。分裝放入2 ml的離心管中靜置待血液凝固后，再轉移到離心機中以3500 r/min離心15 min。取上血清液置于-80 ℃冰箱中冷凍保存待用。用 ELISA 法檢測血清 CML、SOD、TNF-αCML、試劑盒為上海酶聯(lián)生物科技有限公司產(chǎn)品，SOD試劑盒和TNF-α試劑盒均為武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司產(chǎn)品，具體操作方法參照 ELISA試劑盒說明檢測)。

2 結 果

2.1 兩組患者血清CML、TNF-α、SOD濃度比較 老年心房顫動組血清CML、TNF-α濃度均高于對照組，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，老年心房顫動組血清SOD濃度低于對照組，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患者血清CML、TNF-α、SOD濃度比較

2.2 兩組患者心功能檢測指標比較 老年心房顫動組左心房內徑、左心室射血分數(shù)(LVEF)較對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者心功能檢測指標比較

2.3 老年心房顫動組血清CML水平與左心房內徑及LVEF相關性分析 CML與左心房內徑之間未通過顯著性檢驗，兩者之間無明顯相關性。CML與LVEF之間未通過顯著性檢驗，兩者之間無明顯相關性。見表3。

表3 老年心房顫動組血清CML水平與左心房內徑 及LVEF相關性分析

3 討 論

心房顫動是臨床上較為常見的一種心律失常。心房顫動隨著年齡的增長患病率增加，65歲以上人群其患病率約5%，80歲以上人群，房顫的患病率可達10%[5]我國已經(jīng)進入深度老齡化社會，老年心房顫動患者逐年增多。眾所周知，心房顫動可引起嚴重的并發(fā)癥，如腦栓塞、心力衰竭和其他惡性心律失常等，使住院率、致殘率和病死率增加，使患者的生活質量明顯下降。尤其在老年人群中更為嚴重，嚴重威脅老年人健康及加重社會負擔。所以心房顫動一直為心臟學領域的研究熱點和難點。如何防治老年心房顫動成為我們有待攻克的一項重要課題。

研究表明，房顫發(fā)生和持續(xù)的核心環(huán)節(jié)是心房電重構和結構重構，電重構和結構重構相互影響，共同構成房顫的電生理-解剖學基礎。越來越多的證據(jù)表明氧化應激可能導致心房重塑和心電重構，這在房顫的發(fā)生機制中有重要作用[6]。且近年眾多研究發(fā)現(xiàn)炎癥反應及氧化應激對于房顫的產(chǎn)生和維持起著重要的作用[7]。TNF-α、腦鈉肽等炎性因子參與了心房顫動的發(fā)病機制。亦有研究發(fā)現(xiàn)，高水平的炎性因子可能參與了心臟結構重構，以維持房顫發(fā)生[8-9]。AGEs與其受體RAGE結合后，可激活多種細胞信號轉導途徑如激活p21和p38MAPK等轉導徑路，誘導產(chǎn)生多種損傷因子如核轉錄因子NF-κB、IL-1a、IL-6、TNF-α等，誘導炎性反應和氧化應激，產(chǎn)生致病效應[1]。那么，AGEs是否也可導致心房重塑和心電重構誘導房顫的發(fā)生呢？以及AGEs是否在心房顫動的發(fā)作及維持中扮演重要的作用呢？有關實驗研究顯示，AGEs可與其受體RAGE作用誘導心肌成纖維細胞的老化，能刺激心肌成纖維細胞增殖[10]。AGEs主要是通過與細胞表面的RAGE相結合，激活胞內信號通路進而引發(fā)心肌老化[10]。而心肌老化主要表現(xiàn)為心肌纖維化[11]。且有研究發(fā)現(xiàn)，心房顫動患者血清AGEs水平升高[3-4]。而且有研究顯示血清AGEs水平與左心房直徑呈正相關[12]。

AGEs隨著年齡的增長會慢慢增多[1]。機體組織中過多的AGEs與受體結合后可改變蛋白質、脂類、核酸的結構，改變其功能，造成細胞、組織的損傷。有實驗證實，伴隨老年個體內AGEs物質增多，氧化應激產(chǎn)物也隨之增多，且應激激素和炎性反應物質亦增多[13]。而內源性的抗氧化應激系統(tǒng)在維持正常心肌細胞的功能中有重要作用[14-15]。有研究顯示，AGEs能降低SOD的活性，促進氧化應激，損傷細胞及組織。氧化應激狀態(tài)下AGEs合成增多，而AGEs與受體RAGE結合后又進一步促進炎癥反應和氧化應激過程，這樣形成了一個惡性循環(huán)過程，加重了對細胞和組織損傷。

基于以上理論及相關研究結果，均為我們研究AGEs與老年心房顫動提供了重要依據(jù)及線索。我們考慮是否老年心房顫動患者體內存在高AGEs水平，且高AGEs通過誘導炎性反應和氧化應激，促使房顫的發(fā)生。本實驗通過檢測老年心房顫動患者血清CML水平，發(fā)現(xiàn)老年心房顫動患者血清CML水平較對照組明顯升高，且兩組間具有統(tǒng)計學差異。且檢測老年心房顫動組炎性指標TNF-α水平亦均較對照組升高，且兩組間具有統(tǒng)計學差異。SOD是維持體內氧化系統(tǒng)平衡的抗氧化酶，SOD高低可間接反映機體清除氧自由基的能力[17]。為了探明AGEs與心房顫動與細胞內氧化應激有關，本實驗通過檢測SOD 水平，以反應細胞氧化應激水平。結果顯示對照組中SOD水平明顯低于對照組，且兩組間有統(tǒng)計學差異，提示老年心房顫動組氧化應激水平較對照強，可能與AGEs增多，通過AGEs-RAGE-氧化應激導致心肌細胞損傷有關。通過超聲檢查，老年房顫組左心房內徑較對照組增大，且LVEF較對照組減低，兩組結果均有統(tǒng)計學差異。

綜上所述，分析AGEs可能通過炎癥及氧化應激引起心房電重構和結構重構，參與房顫的發(fā)生及維持，具體機制與離子通道有待進一步研究及分析。本實驗發(fā)現(xiàn)左心房直徑隨著血清CML水平升高而升高，但兩者之間相關性不明顯，分析可能房顫患者左心房直徑增大受多種因素及相關疾病影響有關，有待我們進一步研究及分析。