假蒟提取物對小鼠胃腸運動的實驗研究

黃永毅 凌秀孟 蒙玥 陳敬怡 李波 梁綠萍

【摘要】 目的 觀察假蒟提取物對小鼠胃排空和小腸推進的影響，并分析假蒟對胃腸運動的影響機制。

方法 采用碳末推進試驗法，以正常對照組為對照模型，觀察假蒟水提液高、中、低劑量（2 g/kg、1 g/kg、0.5 g/kg）對小鼠胃排空和小腸推進運動的影響。以阿托品、腎上腺素分別建立小鼠的胃腸運動抑制模型，以新斯的明建立胃腸運動亢進模型，用胃殘留率和小腸推進率為指標，觀察不同劑量的假蒟水提液對小鼠胃腸道作用的影響。

結果 與正常對照組相比，假蒟水提液的中、高劑量組對小鼠的胃排空有促進作用（P<0.05或0.01），高劑量組對小鼠的小腸推進率有促進作用（P<0.01）;假蒟的高劑量組可拮抗阿托品所致小鼠胃腸運動抑制，顯著降低小鼠胃殘留率，促進小鼠小腸的推進率（P<0.05）;假蒟中、高劑量組與腎上腺素模型組比較，胃殘留率增加，差異有統計學意義（P<0.05或0.01），小腸推進率無顯著變化（P>0.05）;假蒟中、高劑量組可拮抗新斯的明導致的胃腸運動亢進，顯著提高小鼠的胃殘留率，差異有統計學意義（P<0.01），小腸推進率下降，差異有統計學意義（P<0.05或0.01）。

結論 假蒟水提液對小鼠的胃腸運動有一定促進作用，在胃腸病理狀態下呈現出雙向調節的效果，其機制可能與膽堿能系統及腎上腺素能系統有關。

【關鍵詞】 假蒟;水提液;胃排空;小腸推進

中圖分類號：R285.5 ? 文獻標志碼：A ? DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.12.002

【Abstract】 Objective To observe the effects of extracts of Piper sarmentosum Roxb on gastric emptying and small intestinal propulsion in mice， and to analyze the mechanism of Piper sarmentosum Roxb extracts on gastrointestinal motility.

Methods Carbon powder propulsion test was used， normal control group was used as control model， and the effects of high， medium and low doses （2 g/kg， 1 g/kg and 0.5 g/kg） of water extracts of Piper sarmentosum Roxb on gastric emptying and small intestinal propulsion in mice were observed. Atropine and epinephrine were respectively used to establish the inhibition model of gastrointestinal motility in mice， and neostigmine was used to establish the hypermotility model of gastrointestinal motility. The effects of different doses of water extracts of Piper sarmentosum Roxb ?on gastrointestinal tracts in mice were observed by the indexes of gastric residue rate and intestinal propulsion rate.

Results Compared with the normal control group， the medium and high doses of Piper sarmentosum Roxb groups had promoting effect on gastric emptying of mice （P<0.05 or 0.01）， and the high dose group had significant promoting effect on the small intestine propulsion rate of mice（P<0.01）. The high dose group could antagonize the inhibition of gastrointestinal motility in mice caused by atropine， significantly reduce the rate of gastric residue in mice， and promote the propulsion rate of the small intestine of mice （P<0.05）; compared with the adrenaline model group， medium and high dose groups showed increased gastric residual rate， and the difference was statistically significant （P<0.05 or 0.01）， but the small intestine propulsion rate did not change significantly （P>0.05）; the medium and high dose groups could antagonize gastrointestinal hypermotility induced by neostigmine， the gastrointestinal hypermotility significantly increased in mice， and the difference was statistically significant （P<0.01）， the small intestine propulsion rate decreased， and the difference was statistically significant （P<0.05 or 0.01）.

Conclusion The water extract of Piper sarmentosum Roxb can promote gastrointestinal motility in mice， and exhibit a two-way regulation effect under gastrointestinal pathology， and the mechanism of which may be related to cholinergic system and adrenergic system.

【Key words】 Piper sarmentosum Roxb;water extract; gastric emptying; small intestinal propulsion

假蒟（Piper sarmentosum Roxb），又名蛤蒟、假蔞、假著、蓽茇子、巴巖香，為胡椒科假蒟屬植物，主產于廣西、福建、廣東等省區。具有祛風利濕、溫中散寒、止痛消腫等功效，常用于治療腎炎水腫、胃腹寒痛等疾病[1～2]。袁宏球等[3]報道，在假蒟葉中分離到的化合物對桿狀細菌和埃希氏菌屬有抑制作用，說明此類物質有潛在的抗菌價值，以及假蒟葉甲醇提取物中含有抑制真菌的活性次生物質。周斯儀等[4]報道，假蒟甲醇提取液有抗氧化活性，其中的黃酮、生物堿有抗菌活性，假蒟全株水提液有降低糖尿病大鼠血糖水平等作用。假蒟主要含糖、多糖、有機酸、苷類、揮發油、生物堿、黃酮、內酯、植物甾醇、香豆素、三萜類、油脂等成分[5]。目前未見有假蒟（莖葉部分）提取物對小鼠胃腸運動影響的相關報道，為進一步研究假蒟的藥效，本實驗以小鼠為研究對象，初步探討假蒟水提液對小鼠胃腸運動功能的影響，旨在為臨床應用提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 藥品與試劑

假蒟（廣西壯族自治區百色市市售藥材），經右江民族醫學院民族醫學教研室覃道光教授鑒定為假蒟莖葉;活性碳末（西隴化工股份有限公司，批號：170114）;羧甲基纖維素鈉（成都市新都區木蘭鎮工業開發區，批號：20170727）;鹽酸阿托品注射液（河南潤弘制藥有限股份公司，批號：1806302）;鹽酸腎上腺素注射液[遠大醫藥（中國）有限公司，批號：170609];甲氧氯普胺（山西云鵬制藥有限公司，批號：F170301）。新斯的明注射液（上海信誼金朱藥業公司，批號：1710503）

1.1.2 實驗動物

普通昆明種小鼠，雌雄各半，體重18～22 g，由右江民族醫學院實驗動物中心提供，許可證號：SYXK（桂）2017-0004。

1.1.3 儀器

電子天平（余姚市紀銘稱重校驗設備有限公司，型號：JM-B1003）

1.1.4 假蒟水提液的制備

稱取假蒟干燥莖葉200 g，加入5倍量水（1000 mL）常溫浸泡1 h，大火煮沸后慢火煎煮1 h，過濾留下濾液，取濾渣再加水1000 mL煮沸后慢火煎煮1 h，過濾棄濾渣，合并兩次濾液用紗布過濾，隔水蒸發濃縮，定容為2 g/mL，冰箱冷藏，用時恢復至室溫。

1.1.5 碳末混懸液的制備

稱取活性碳末5 g、羧甲基纖維素鈉2 g溶于100 mL雙蒸水中，攪拌均勻配制成碳末混懸液[6]，冰箱冷藏，用時恢復至室溫。

1.2 方法

1.2.1 假蒟水提液對正常小鼠胃排空和小腸推進的影響

小鼠隨機分成5個組：正常對照組，陽性藥（胃復安）組，假蒟水提液高、中、低劑量（2 g/kg、1 g/kg、0.5 g/kg）組，每組10只。各組都按10 mL/kg的容積灌胃給藥，正常對照組灌胃等容積的蒸餾水，陽性藥組每次灌胃甲氧氯普胺（胃復安）2.5 mg/kg，假蒟高、中、低劑量組每次分別灌胃假蒟水提液2 g/kg、1 g/kg、0.5 g/kg，各組每天灌胃2次，連續4 d。末次給藥前禁食不禁水12小時，給藥30 min后，每只小鼠灌胃5%碳末混懸液0.25 mL/10 g，20 min后用頸椎脫臼法處死小鼠。迅速剪開腹腔，取出胃，稱胃全重和胃凈重。計算胃內容物殘留率（%）=[（胃全重-胃凈重）/碳末混懸液質量]×100%[7]。以胃內容物殘留率為指標評價胃排空速度。同時取出小腸幽門至回盲部分離腸系膜，自然平鋪于桌面上，自由伸展后測量小腸總長度及碳末混懸液在小腸內推進的距離，用于計算小腸推進率，推進率（%）=小腸內碳末推進的距離（cm）/小腸總長度（cm）×100%[7]。

1.2.2 對阿托品致小鼠胃排空及小腸推進抑制的影響[8]

小鼠隨機分成5個組：正常對照組、阿托品模型組、陽性藥組、假蒟中劑量組、假蒟高劑量組，每組10只。各組都按10 mL/kg容積灌胃給藥，正常對照組和阿托品模型組灌胃等容積的蒸餾水，假蒟中、高劑量組給藥劑量同1.2.1;陽性藥組每次灌胃甲氧氯普胺（胃復安）2.5 mg/kg，各組都是每天灌胃2次，連續給藥4 d，末次給藥前禁食不禁水12小時，給藥30 min后，正常對照組腹腔注射等量生理鹽水，其余各組均給予腹腔注射硫酸阿托品0.3 mg/kg，15 min后，每只小鼠均灌以5%碳末懸液0.25 mL/10 g，20 min后用頸椎脫臼法處死小鼠，取胃和小腸，計算胃排空率和小腸推進率。方法同1.2.1。

1.2.3 對腎上腺素致小鼠胃排空及小腸推進抑制的影響[9]

小鼠隨機分成5個組：正常對照組、腎上腺素模型組、陽性藥組、假蒟中劑量組、假蒟高劑量組，每組10只。各組均按10 mL/kg容積灌胃給藥，正常對照組和腎上腺素模型組灌胃等容積蒸餾水，假蒟中、高劑量組給藥劑量同1.2.1;陽性藥組每次灌胃甲氧氯普胺（胃復安）2.5 mg/kg，各組都是每天灌胃2次，連續給藥4 d，末次給藥前禁食不禁水12小時，給藥30 min后，正常對照組腹腔注射等量生理鹽水，其余各組均腹腔注射鹽酸腎上腺素注射液0.3 mg/kg，15 min后，每只小鼠均灌以5%碳末懸液0.25 mL/10 g，20 min后用頸椎脫臼法處死小鼠，取胃和小腸，計算胃排空率和小腸推進率。方法同1.2.1。

1.2.4 對新斯的明致小鼠胃排空及小腸推進亢進的影響[9]

小鼠隨機分成5個組：正常對照組、新斯的明模型組、陽性（阿托品）組、假蒟中劑量組、假蒟高劑量組，每組10只。各組均按10 mL/kg容積灌胃給藥，正常對照組、新斯的明模型組、陽性藥（阿托品）組均灌胃等容積蒸餾水，假蒟中、高劑量組給藥劑量同1.2.1，各組都是每天灌胃2次，連續給藥4 d，末次給藥前禁食不禁水12小時，正常對照組灌胃等容積蒸餾水，其余各組均灌胃新斯的明2 mg/kg，陽性藥（阿托品）組還同步給予腹腔注射阿托品0.3 mg/kg，15 min后，每只小鼠均灌以5%碳末懸液0.25 mL/10 g，20 min后用頸椎脫臼法處死小鼠，取胃和小腸，計算胃排空率和小腸推進率。方法同1.2.1。

1.3 統計學方法

采用SPSS 26.0軟件對數據進行處理，計量資料呈正態分布，實驗數據以均數±標準差（±s）表示，用單因素方差分析，組間兩兩比較用LSD法，檢驗水準：α=0.05，雙側檢驗。

2 結 ?果

2.1 假蒟水提液對正常小鼠胃排空和小腸推進的影響

假蒟水提液中、高劑量組和胃復安組的小鼠胃殘留率均低于正常對照組，差異有統計學意義（P<0.05或0.01），提示假蒟中、高劑量組對小鼠胃排空有促進作用;胃復安組和假蒟高劑量組的小腸推進率高于正常對照組，差異有統計學意義（P<0.05或0.01）;提示假蒟高劑量組對小鼠小腸推進有促進作用;低劑量組小鼠的胃殘留率和小腸推進率與正常對照組比較均無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2 對阿托品致小鼠胃排空及小腸推進抑制的影響

阿托品模型組小鼠的胃殘留率高于正常對照組，小腸推進率低于正常對照組，差異有統計學意義（P<0.01），提示阿托品抑制小鼠胃腸運動;與阿托品模型組比較，假蒟中劑量組有降低胃殘留率和增加小腸推進率的趨勢，但差異無統計學意義（P>0.05）;假蒟高劑量組的胃殘留率降低，小腸推進率增加，差異有統計學意義（P<0.05），提示假蒟高劑量可拮抗阿托品導致的胃排空及小腸推進抑制;胃復安可拮抗阿托品所致的胃腸運動抑制（P<0.01）。見表2。

2.3 對腎上腺素致小鼠胃排空及小腸推進抑制的影響

腎上腺素模型組小鼠胃殘留率高于正常對照組，小腸推進率低于正常對照組，差異有統計學意義（P<0.01），提示腎上腺素有抑制小鼠的胃腸運動的作用;與腎上腺素模型組比較，假蒟中、高劑量組小鼠胃殘留率增加，差異有統計學意義（P<0.05或0.01），小腸推進率變化無統計學意義（P>0.05），提示假蒟中、高劑量在某些胃腸功能障礙狀態下，胃排空抑制情況會加重，但對小腸推進無明顯改變，胃復安可明顯拮抗腎上腺素所致的胃排空和小腸推進抑制（P<0.01）。見表3。

2.4 對新斯的明致小鼠胃排空及小腸推進亢進的影響

新斯的明模型組小鼠胃殘留率低于正常對照組，小腸推進率高于正常對照組，差異有統計學意義（P<0.01），提示新斯的明對小鼠的胃腸運動起到亢進作用。與新斯的明模型組比較，假蒟中、高劑量組小鼠胃殘留率增加，差異有統計學意義（P<0.01），小腸推進率下降，差異有統計學意義（P<0.05或0.01），提示假蒟中、高劑量可拮抗新斯的明所致胃排空和小腸推進亢進。阿托品可明顯拮抗新斯的明所致胃腸運動亢進（P<0.01）。見表4。

3 討 ?論

假蒟在壯藥中用于治療腹脹、腸炎腹瀉、腹痛、食欲不振[10]，本實驗在前期研究中觀察到一定濃度的假蒟水提液對正常小鼠的胃排空和小腸推進均有促進作用。在此基礎上，我們采用阿托品和腎上腺素建立小鼠的胃排空和小腸推進抑制模型，新斯的明建立胃腸運動亢進模型，進一步研究假蒟對胃腸運動病理模型狀態下的影響。

胃腸運動的調節主要由交感神經和副交感神經系統以及存在腸壁內的腸神經系統來控制，目前研究顯示，胃腸道上存在膽堿能的M受體以及腎上腺素的α受體、β受體[11]。神經系統中的各種遞質與相應受體結合后，表現出不同的生理作用[12]。

阿托品為非選擇性M膽堿能受體阻斷劑，通過阻斷乙酰膽堿跟M受體結合的作用，導致乙酰膽堿無法發揮興奮胃腸道平滑肌的作用，使平滑肌松弛，從而形成胃腸蠕動的障礙，其效果為降低蠕動的頻率及幅度，最終表現出抑制平滑肌的收縮[13～14]。腎上腺素是由腎上腺髓質分泌的一類激素，也是α和β受體激動藥，其通過興奮α和β受體，致使平滑肌收縮力降低[15]。新斯的明是抗膽堿酯酶藥，通過抑制膽堿酯酶的活性，表現出擬膽堿效果，有興奮胃腸道平滑肌，加強胃收縮和促進腸蠕動的作用[9]。

本實驗結果顯示，與正常對照組比較，阿托品和腎上腺素均能夠顯著提高小鼠胃內容物的殘留率及降低小腸推進率，新斯的明能夠顯著降低胃殘留率和提高小腸推進率，說明實驗小鼠使用造模藥后的癥狀符合用藥后的臨床表現。假蒟高劑量組能夠促進小鼠的胃排空和小腸推進，可改善阿托品對胃腸運動抑制作用，同時又抑制新斯的明致胃腸運動的亢進作用，說明假蒟有可能是通過影響膽堿能受體的途徑來發揮促胃腸運動作用的。在腎上腺素組的實驗結果顯示，假蒟中、高劑量組對腎上腺素抑制小鼠的胃排空有協同作用。這提示了在腎上腺素能系統引起的胃腸道功能障礙情況下服用假蒟可能會加重病情，要謹慎使用。在不同的病理狀態下，假蒟不同劑量引起不同的作用。我們推測假蒟對小鼠胃腸道的調節作用有可能與M膽堿能受體和腎上腺素能系統有關，也可能由于假蒟藥物的成分復雜，胃腸機能狀態存在差異，對草藥不同成分引起不同效果。

綜上所述，假蒟水提液對小鼠的胃腸運動有一定促進作用，在胃腸病理狀態下呈現出雙向調節的效果，其機制可能跟膽堿能系統及腎上腺素能系統有關。

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（收稿日期：2021-08-30 修回日期：2021-11-13）

（編輯：潘明志）