環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)用于結(jié)核病診斷的價值評估

林晶晶 夏 露 劉旭暉 魏劍浩 席秀紅 黃 威 李 濤 盧水華

（復(fù)旦大學(xué)附屬公共衛(wèi)生臨床中心結(jié)核科 上海 201508）

結(jié)核病（tuberculosis，TB）是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis，Mtb）導(dǎo)致的慢性傳染性疾病。早期、快速、準確地診斷TB是全球公共衛(wèi)生領(lǐng)域的重大挑戰(zhàn)。TB的傳統(tǒng)病原學(xué)檢測多依賴于涂片法和培養(yǎng)法，但是由于涂片在標(biāo)本中含有5 000～10 000條抗酸桿菌/mL時才會報陽［1］，靈敏度僅為30%～50%［1-2］；培養(yǎng)作為TB診斷的金標(biāo)準，雖然靈敏度更高，但是檢測耗時（4～8周）［2］、實驗室要求高［1］、容易污染［3］。核酸檢測技術(shù)的出現(xiàn)在一定程度上彌補了傳統(tǒng)實驗室檢測的缺點，其主要包括 TB-PCR 法 、Xpert MTB/RIF（Xpert）、Xpert MTB/RIF Ultra（Ultra）、環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（loopmediated isothermal amplification，LAMP）等。

LAMP在2016年被WHO推薦用于肺結(jié)核（pulmonary tuberculosis，PTB）檢測［4］，其原理是針對兩種靶基因（gyr B、IS6110）上的6個區(qū)段設(shè)計4個不同的引物，利用鏈置換反應(yīng)在一定溫度下進行高效特異性擴增反應(yīng)。這種核酸檢測技術(shù)操作簡單，耗時短，肉眼可見檢測結(jié)果，適宜在檢測條件有限的區(qū)域推廣。國外研究表明LAMP在檢測PTB患者痰標(biāo)本時的靈敏度為86.0%～99.0%，特異度為94.0%～98.4%［5-6］；而在中國研究相對較少，靈敏度為96.19%～100%［7-8］，這與國外數(shù)據(jù)相近，且有研究認為對于涂陰痰標(biāo)本的檢測和診斷，LAMP法優(yōu)于Xpert［9］，以上研究均僅以培養(yǎng)作為診斷標(biāo)準。雖然已有研究用于評估LAMP法在肺外結(jié)核病（extra pulmonary tuberculosis，EPTB）中的診斷價值，但是明顯少于痰標(biāo)本的研究，且結(jié)果差異較大，國內(nèi)相關(guān)的臨床應(yīng)用評價則更少。

本研究全面評估LAMP在TB（PTB和EPTB）診斷中的應(yīng)用價值，同時將其與傳統(tǒng)TB診斷檢測技術(shù)和Xpert進行比較。

資料和方法

研究對象本研究以2018年8月至2019年10月在上海市公共衛(wèi)生臨床中心結(jié)核科住院治療的疑似活動性TB患者為研究對象。……