努爾麥麥提·麥麥提敏,姜水兵,郭良帥
(塔里木大學動物科學學院,新疆 阿拉爾 843300)
棘球蚴?。‥chinococcosis)俗稱包蟲病(Hydatidosis),是人畜體內寄生的棘球屬絳蟲幼蟲引起的一種嚴重危害人民健康和畜牧業發展的人畜共患寄生蟲病[1],我國將其列為二類動物疫?。?]。我國是世界上棘球蚴病流行嚴重的國家之一,主要流行囊型棘球蚴病與泡型棘球蚴病,由細粒棘球絳蟲和多房棘球絳蟲感染所致[3]。其中,細粒棘球絳蟲中絳期幼蟲細粒棘球蚴寄生在人和牛、羊等草食動物的肝、肺和其他器官,導致牛、羊等家畜和人的細粒棘球蚴??;成蟲細粒棘球絳蟲寄生在犬科動物的小腸內,引起犬科動物的細粒棘球絳蟲病。細粒棘球絳蟲對中間宿主的危害嚴重,引起寄生部位發生機械性壓迫,囊液毒素作用及其因溢出而導致過敏反應等臨床癥狀[4],對終末宿主的臨床癥狀不太明顯,主要受蟲體數量的影響。犬與羊、牛、人等中間宿主的關系密切,隨犬糞排出的孕節和蟲卵能夠污染人和動物的生活環境,增高人畜被蟲卵感染的風險,從而引起嚴重的公共衛生問題。因此,犬只的管理、驅蟲和定期檢測對包蟲病的預防與控制有重大意義。本次調查從喀什地區各縣(市)采集犬糞樣品共760份,檢測細粒棘球絳蟲犬糞抗原,旨在掌握喀什地區2019 年犬細粒棘球絳蟲的感染狀態,從而對本地區包蟲病的防控和研究工作提供參考。
樣品:分別從喀什地區各縣(市)采集新鮮(排糞24 h 內)犬糞樣品(10 g/份)共760 份,分別裝入20 mL 離心管,記錄標記,于-80 ℃冰箱冷凍7 d,室溫解凍,取1 g 犬糞樣品加入1 mL 工作濃度的稀釋液,混勻形成懸濁液,3 000 r/min 離心10 min,取上清備用。
試劑:細粒棘球絳蟲犬糞抗原ELISA 檢測試劑盒,重慶澳龍生物制品有限公司(生產批號:20190502)。
儀器:HBS-1096A 型酶標分析儀(南京德鐵實驗設備有限公司);H-1650-W 型臺式離心機(湖南湘儀實驗室儀器開發有限公司);DHP-9080 型恒溫培養箱(上海一恒科學儀器有限公司)。
(1)按照說明書要求配好試劑后,取出檢測板,記錄加樣順序。
(2)按順序依次加入2 孔陽性、2 孔陰性對照和待檢樣品,每孔加入100 μL,覆封板膜,置37 ℃的恒溫培養箱孵育30 min。
(3)孵育完后取出檢測板,棄去板內液體,每孔200 μL 洗滌液靜置1 min 后棄去板內液體,拍干。重復3次。
(4)每孔加入100 μL 工作濃度的單抗液,覆封板膜,放置37 ℃的恒溫培養箱孵育30 min。重復步驟(3)。
(5)每孔加入工作濃度的酶標抗體100 μL,覆封板膜,放置37 ℃的恒溫培養箱孵育30 min。重復步驟(3)。
(6)底物溶液A 與底物溶液B 等體積混合后每孔加入100 μL,避光顯色10 min。
(7)每孔加入50 μL 終止液,10 min 內在酶標儀上測定450 nm波長處的吸光度值。
同時滿足陽性對照OD450nm平均值≥0.60,且陽性對照OD450nm平均值>陰性對照OD450nm平均值的2.1倍,方可進行判定。當陰性不足0.15時按0.15計算。
陽性判定:樣品OD450nm值>陰性對照OD450nm平均值×2.1。
陰性判定:樣品OD450nm值≤陰性對照OD450nm平均值×2.1。
通過細粒棘球絳蟲犬糞抗原ELISA檢測試劑盒對喀什地區所采集的760 份犬糞樣品進行犬糞抗原ELISA 檢測,檢測結果顯示,共27 份犬糞樣品檢出陽性,總感染率為3.55%(27/760)。其中巴楚縣、塔什庫爾干縣、岳普湖縣、葉城縣犬糞抗原檢測呈陽性,陽性率為1.11%~8.33%,其余縣(市)未檢出陽性樣品。760份樣品中,從農區采集的389份樣品共檢測出8 份陽性樣品,陽性率為2.06%(8/389),從牧區(塔什庫爾干縣)采集的371 份樣品共檢測出19份陽性樣品,陽性率為5.12%(19/371)(表1)。

表1 喀什地區犬細粒棘球絳蟲的感染情況
新疆是我國包蟲病主要流行地區之一[5],伍衛平等[6]2012—2016 年對新疆、西藏等西部9 個?。ㄗ灾螀^)進行棘球蚴病抽樣調查,調查顯示人群總檢出率為0.51%,家畜檢出率為4.68%,犬檢出率為4.25%,初步明確了我國棘球蚴病流行區的范圍和流行程度。祖力胡馬力·尼拉木丁等[7]在2007—2010 期間對全疆犬進行檢測調查,結果顯示,全疆總感染率為28.0%,其中喀什地區的感染率為45.0%。努斯來提等[8]在2014 年進行了新疆14 地州棘球蚴病感染情況調查,結果顯示全疆范圍內犬的總感染率為9.84%,其中喀什地區犬的感染率為23.33%。趙江山等[9]在2012—2013 年進行的全疆不同生產方式條件下犬細粒棘球絳蟲感染情況調查,結果顯示農區感染率為1.98%,牧區感染率為3.75%。說明我國西部地區人、牛、羊等的包蟲病檢出率高,無論是人還是動物方面都應做好防控,保護人畜生命安全。
本次調查顯示,喀什地區犬細粒棘球絳蟲的總感染率為3.55%(27/760),感染程度較為嚴重,而且不同縣(市)、農區和牧區之間感染程度的差別較大。其中,巴楚縣感染率最高(8.33%),其次為塔什庫爾干縣(5.12%),岳普湖縣(5.00%)和葉城縣(1.11%),其余的縣(市)均未檢測出陽性樣品;陽性縣占喀什地區總縣(市)的36.36%(4/11);農區和牧區相比,牧區感染率(5.12%)高于農區(2.06%)。本次調查結果與祖力胡馬力·尼拉木丁等[7]、努斯來提等[8]對新疆地區犬進行的調查結果對比發現,曾經喀什地區犬細粒棘球絳蟲的感染率高于全疆的平均感染率,2019 年喀什地區犬細粒棘球絳蟲的感染率比往年有所下降,感染率隨年數的增長而降低,說明喀什地區包蟲病的防控工作比往年有所進步。本次調查的農區犬(2.06%)和牧區犬(5.02%)感染率與趙江山等[9]的調查結果對比發現,2 次調查結果都顯示牧區感染率高于農區,說明牧區包蟲病的防控工作更應該抓緊。
根據本次調查中犬只感染數量可以看出,犬的感染率比往年有所降低,而且部分地區達到了陽性率為零的水平。棘球蚴病被納入《國家中長期動物疫病防治規劃(2012—2020)》,在新疆地區實施包蟲病免疫及犬驅蟲以來,喀什地區犬細粒棘球絳蟲感染率轉變為下降態勢。各縣(市)應不斷加強防控工作,避免包蟲病流行率的再次增長。
包蟲病是給畜牧業發展和人體健康帶來嚴重危害的人獸共患寄生蟲病,在人畜方面都有很大的公共衛生意義。本次調查顯示喀什地區犬細粒棘球絳蟲的感染程度較為嚴峻,各縣之間及農區和牧區之間差別較大。該地區應加強免疫和驅蟲工作,加大宣傳力度,提高人民和相關工作人員的防范意識,從而降低人畜被棘球絳蟲感染的風險。