10 226例女性人乳頭瘤病毒基因篩查結果分析

趙小紅，牟 虹

(1.重慶市九龍坡區人民醫院，重慶 400051；2.重慶市東南醫院，重慶 401336)

宮頸癌是全世界女性中第四大常見的癌癥和中國女性第二大常見的婦科癌癥[1]，且發病率和死亡率趨于年輕化[2]。據2015年的文獻報道，2012年全球因宮頸癌而死亡的人數約為26.6萬，占女性所有癌癥總和的7.5%[3]。由于宮頸癌的篩查未能在全國范圍內全部進行，因此該病的患病率仍高居不下。在全球范圍內，中國每年宮頸癌新發病例數占全世界的11.9%，死亡率占全世界的11.1%[4]。宮頸癌與人乳頭瘤病毒(HPV)感染之間的關系已被廣泛研究，在過去的幾十年中，HPV感染在宮頸癌的發展中起著重要作用[3-4]。HPV陽性被證明是宮頸癌的病因和宮頸癌的癌前病變發生的重要原因。根據HPV與宮頸癌和癌前病變的關聯，HPV基因型通常分為高風險(HR)和低風險(LR)基因型[5]。超過15種HR-HPV基因型與宮頸癌的發展有關，其中HPV 16、18、31、33、35、45、52、58與90%的浸潤性宮頸癌有關，而HPV 16、18與70%的浸潤性宮頸癌相關[6]，包括HPV 6、11、42、43、44在內的LR-HPV基因型與增生性病變相關[5]。HPV的基因型分布顯示出地理差異性，不同地域的氣候、人文和生活習慣的差異性導致HPV發病率不同。考慮HPV感染在子宮頸癌和其他相關疾病發展中的重要作用，強烈建議進行HPV篩查，因為與基于細胞學的篩查宮頸癌相比，HPV篩查更敏感、更具成本效益[7]，為了能更好地得到本地區HPV的基因分布，盡早發現高危人群；同時為進一步對本地區婦女接種HPV疫苗，提供基線數據。本研究對近5年育齡婦女進行了HPV篩查，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1月至2019年11月到重慶市九龍坡區人民醫院婦科門診進行健康體檢的育齡婦女進行HPV檢測。入選標準：(1)有性生活史；(2)子宮完整；(3)檢測前1周內未用陰道藥物或未進行過陰道沖洗；(4)檢測時處于非孕狀態；(5)當地居民；(6)愿意接受HPV檢測。

1.2儀器與試劑 使用HHM-2 凱普核酸分子快速雜交儀和HPV基因分型檢測試劑盒對入選的研究對象進行HPV的檢測和分型，儀器和試劑均購自凱普生物科技有限公司。

1.3檢測方法 標本采集及DNA提取、擴增及雜交檢測嚴格按照儀器及實際說明書操作。雜交檢測結果有效須同時滿足以下條件：藍紫色圓點提示檢測結果為陽性；每個實驗均需檢測Biotin點，該點為反映酶與顯色液反應的對照點，正常檢測狀態下應為藍紫色。內對照點(IC)為質控模板DNA探針，若實驗結果中無IC點出現，但HPV分型陽性點顯色，則認為分型結果正確。膜條HPV分型分布圖用于判斷陽性點的具體HPV型別。若有1個或1個以上的型別陽性，則結果提示為單一或混合HPV感染。

1.4統計學處理 采用SPSS21.0軟件進行統計分析，計數資料以例數或百分比表示，組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1基本人口學特征及HPV年齡分布 5年間共納入10 226例育齡婦女進行HPV檢測，年齡18～65歲，平均(36.0±12.5)歲。納入的研究對象中HPV陽性3 078例，HPV攜帶率為30.10%。5個年齡組的攜帶率比較，差異有統計學意義(χ2=177.82，P<0.001)，以大于30～40歲性活躍人群的HPV攜帶率為最高，達12.77%，其次為大于20～30歲和大于40～50歲，分別為8.48%和7.70%，見表1。

2.2HPV基因型分布 在檢測的21種基因型中，以高危型的HPV 16、52、58為主，分別為21.28%、14.55%、13.71%。低危型中以HPV 11為多見(3.35%)。單種基因型陽性率為24.41%(2 496/10 226)，2種及以上基因型陽性率為5.69%(582/10 226)，高危基因型占總陽性率的92.99%(2 321/2 496)，低危基因型占總陽性率的7.01%(175/2 496)，見表2。

表1 研究人群HPV年齡分布

表2 HPV的21種基因型分布情況

3 討 論

HPV是最常見的經性傳播獲得定植/感染的病毒之一，可引起育齡婦女的無癥狀感染，也可引起子宮頸惡性疾病等[8]。研究人員對宮頸脫落細胞樣本的檢測結果顯示，HPV DNA的陽性率很高。 HPV在宮頸癌前病變的檢出率為60.23%，而宮頸癌患者脫落細胞HPV的陽性率達100.00%[9]。因此，對于有癌前病變或有其他高危因素如多個性伴侶人群進行HPV的篩查，確定高危人群所涉及的HPV基因型，以便及時采取措施預防宮頸癌的發生最為重要。國家對育齡婦女進行免費兩癌篩查(乳腺癌和子宮頸癌)是廣大育齡婦女的福音，也讓政府部門有更翔實的大數據去了解本地區育齡婦女HPV基因型的分布狀態。

本研究結果顯示，本地區育齡婦女HPV陽性率為30.10%，其中17種高危型的總陽性率為27.99%，與2015年WANG等[10]的研究結果相似(全國平均高危型HPV的總陽性率為21.07%，重慶為26.20%)。然而有研究顯示，在37個城市之間，陽性率差別比較大，最高為海口，感染率高達31.94%，而天津和北京HPV的感染率則為12.5%和7.0%[13-14]，遠低于本研究和其他地區報告的感染率[10-12]，表明地域性、性開放保護意識、社會經濟性的差異也可能是造成HPV感染差異性的重要原因之一，說明加強婦女的性知識和相關婦科知識宣教很有必要。

HPV 16是世界范圍內報道的能檢測到的最普遍的基因型，其次是HPV 42、58、31、18、56[15]。世界范圍內HPV 16的發病率是其他任何高危類型的2倍，而HPV 16、18約占全球宮頸癌HPV總陽性率的70.9%[12]。本研究結果顯示，HPV 16、18的陽性檢出率分別為21.28%、10.72%。據報道，HPV 16與鱗狀細胞癌和腺癌的發病相關，而HPV 18是腺癌發病的危險因素，一項納入了45個基于PCR研究設計文獻的meta分析結果顯示，在浸潤性宮頸癌患者中檢出的HPV 16頻率遠高于宮頸上皮內瘤樣變者[16]，表明HPV 16、18陽性在宮頸癌病變中具有重要地位。本研究結果表明，4種高風險的HPV類型16、52、58、18是重慶地區最流行的，與我國其他地區的研究結果相似[17-18]。有報道顯示，HPV 52、58在患有HPV感染和宮頸癌的亞洲人群中更為普遍[19-20]，上海的報道顯示，HPV 52和58比HPV 16和18基因型更為流行[11]；另有報道，與其他地區相比，在患有癌前病變和宮頸癌的女性中，HPV 52、58在南方更為普遍[21-22]。表明根據HPV基因篩查的結果，結合流行的不同地區，HPV流行的基因型別的早識別對宮頸癌的預防和控制治療有著重要的指導作用。本研究結果表明，HPV 2種及以上基因型的感染率為5.69%，研究顯示，可根據人群感染的HPV基因型或是否存在2種及以上的感染來預測宮頸癌的嚴重程度或確定后續的治療方案。如檢測到的個體HPV基因型為HPV 16，則該個體患宮頸癌的風險較高，對有2種及以上基因型別的感染者而言，風險更高。本研究HPV陽性人群中，4價HPV疫苗的覆蓋率為38.43%，而9價HPV疫苗的覆蓋率高達76.01%，在本研究人群中，HPV 52、58的高流行率證實了9價HPV疫苗可以為中國和其他亞洲人群的婦女提供更高水平的保護。

綜上所述，本地區婦女HPV陽性率較高，高危型HPV也分布于各個年齡段的女性群體中。目前，4價疫苗和9價疫苗已投入使用，可為本地區婦女提供更好的保護，能有效預防HPV的感染，而降低宮頸癌的發病率。因此，對HPV進行常規篩查可為宮頸癌的早期預防、早期發現和早期治療提供重要的臨床依據。