展暉,侯夏寶,趙冰
新鄉市中心醫院胸部腫瘤外科,河南 新鄉 453000
隨著人們生活水平的提高和飲食習慣的改變,中國食管癌的發病率和病死率均較高。在中國,鱗狀細胞癌是食管癌的常見類型,早期癥狀不典型,不易被發現,一旦確診常已發展為晚期,患者5年生存率低于10%。因此,進一步探究食管癌的發病機制能夠提高食管癌的早期診斷率,降低病死率,改善預后。八聚體結合轉錄因子4(octamer binding transcription factor 4,Oct4)是POU轉錄因子家族中的重要成員,定位于人類染色體6p21.3,能夠通過結合于目的基因的Oct結構域,抑制或激活下游靶基因。Oct4對于維持胚胎干細胞的多潛能性及自我更新具有重要作用。研究發現,Oct4在多種腫瘤組織中呈高表達,包括食管癌,但具體作用機制未知,因此,本研究對Oct4在食管鱗狀細胞癌細胞侵襲、遷移中的作用及相關機制進行探討,現報道如下。
食管鱗狀細胞癌細胞Eca109購于中國科學院細胞庫。兔抗基質金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基質金屬蛋白酶 9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、上皮鈣黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、Twist及GAPDH多克隆抗體均購于美國Cell Signal Technology公司;Opti-MEM培養基、辣根過氧化物酶標記的山羊抗兔免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)(H+L)、CCK-8試劑盒、二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)試劑盒均購于南京凱基生物科技發展有限公司;胎牛血清、DMEM培養基、胰蛋白酶均購于美國Gbico公司;Oct4對照和Oct4 shRNA均購于上海吉瑪生物制藥技術有限公司;Lipofectamine3000轉染試劑盒、Transwell小室均購于美國Corning公司。TE2000熒光倒置顯微鏡購于日本Nikon公司;迷你雙垂直電泳儀、迷你轉印電泳儀均購于北京六一儀器廠;……