人類免疫缺陷病毒短轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)物連接因子1對(duì)浸潤(rùn)性乳腺癌患者新輔助化療療效預(yù)測(cè)的臨床價(jià)值分析

木亞林，岳愷，李明

南陽市中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科三病區(qū)，河南 南陽 4730000

乳腺癌發(fā)病率居女性惡性腫瘤首位，乳腺癌細(xì)胞間連接松散容易脫落，易隨血液或淋巴液轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重危害女性身心健康。新輔助化療可縮小腫瘤大小、殺滅不可見轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞、直接反映患者化療敏感性，從而提高手術(shù)率及清除率、改善預(yù)后，已成為浸潤(rùn)性乳腺癌的常規(guī)療法。因此，預(yù)測(cè)新輔助化療療效對(duì)治療方案選擇、提高生存率臨床意義重大。人類免疫缺陷病毒短轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)物連接因子1（factor that binds to the inducer of short transcripts of human immunodeficiency virus-1，F(xiàn)BI-1）具有原癌基因活性，為腫瘤相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄抑制因子，已被證實(shí)參與肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、肝癌等多種腫瘤增殖分化、轉(zhuǎn)移及血管生成。臨床對(duì)FBI-1表達(dá)研究多集中于對(duì)腫瘤發(fā)生發(fā)展、細(xì)胞作用機(jī)制及增殖/凋亡的影響等，但對(duì)其與浸潤(rùn)性乳腺癌新輔助化療療效關(guān)系的報(bào)道少見。基于此，本研究檢測(cè)了FBI-1在70例行新輔助化療的浸潤(rùn)性乳腺癌患者治療前腫瘤組織中的表達(dá)水平，探討其對(duì)新輔助化療療效的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年1月至2019年12月南陽市中心醫(yī)院收治的經(jīng)空芯針穿刺活檢（core needle biopsy，CNB）確診為浸潤(rùn)性乳腺癌患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前經(jīng)CNB檢查確診為浸潤(rùn)性乳腺癌；②接受新輔助化療，且均以紫杉醇類+蒽環(huán)類為化療方案，新輔助化療后行手術(shù)治療；③術(shù)前功能狀態(tài)（Karnofsky performance status，KPS）評(píng)分≥70分；④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有放化療、免疫治療、靶向治療、內(nèi)分泌治療史；②伴其他部位惡性腫瘤或腫瘤細(xì)胞發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。根據(jù)納入、排除標(biāo)準(zhǔn)，共納入70例浸潤(rùn)性乳腺癌患者，收集其乳腺癌組織標(biāo)本。

1.2 方法

①收集患者一般資料，如年齡、腫瘤直徑、臨床分期、組織學(xué)分級(jí)、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）、人表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）、Ki-67等情況。②免疫組織化學(xué)染色：FBI-1抗體購(gòu)自Abcam公司，嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作，多聚甲醛固定腫瘤組織，石蠟包埋切為4 μm切片，采用SP法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，檢測(cè)組織FBI-1表達(dá)情況。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

①以影像學(xué)檢查（磁共振成像、超聲）結(jié)果依據(jù)實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（response evaluation criteria in solid tumor，RECIST）評(píng)價(jià)新輔助化療臨床療效：以可見目標(biāo)病灶完全消失，無新病灶出現(xiàn)為臨床完全緩解（cCR）；以基線目標(biāo)病灶直徑總和較治療前縮小≥30%，無新病灶出現(xiàn)為臨床部分緩解（cPR）；以基線目標(biāo)病灶直徑總和較治療前縮小＜30%或增加＜20%，無新病灶出現(xiàn)為臨床穩(wěn)定（cSD）；以基線目標(biāo)病灶直徑總和較治療前增加≥20%或有新病灶出現(xiàn)為臨床進(jìn)展（cPD）。以cCR+cPR為臨床療效顯著，cSD+cPD為臨床療效非顯著。②采用MP分級(jí)系統(tǒng)對(duì)化療后腫瘤組織標(biāo)本進(jìn)行新輔助化療病理學(xué)療效評(píng)價(jià)：以浸潤(rùn)腫瘤組織數(shù)量不變?yōu)镸P1，以浸潤(rùn)腫瘤組織數(shù)量較治療前減少＜30%為MP2，以浸潤(rùn)腫瘤組織數(shù)量較治療前減少30%～90%為MP3，以浸潤(rùn)腫瘤組織數(shù)量較治療前減少＞90%為MP4，以切片未見浸潤(rùn)性腫瘤細(xì)胞（允許導(dǎo)管內(nèi)腫瘤成分殘存）為MP5。以MP4+MP5為病理學(xué)療效顯著，以MP1+MP2+MP3為病理學(xué)療效非顯著。

1.4 FBI-1免疫組織化學(xué)判讀標(biāo)準(zhǔn)

FBI-1細(xì)胞核染色呈棕黃色顆粒，以細(xì)胞染色呈棕黃色/棕褐色且強(qiáng)度高于背景為陽性細(xì)胞。雙人雙盲于200倍鏡下隨機(jī)觀察切片的10個(gè)視野判讀并記錄陽性細(xì)胞、總細(xì)胞數(shù)，陽性細(xì)胞百分比取各視野下陽性細(xì)胞數(shù)與總細(xì)胞數(shù)比值的平均值。以陽性細(xì)胞百分比＜10%為陰性（-），以陽性細(xì)胞百分比10%～24%為弱陽性（+），以陽性細(xì)胞百分比25%～49%為陽性（2+），以陽性細(xì)胞百分比≥50%為強(qiáng)陽性（3+）。以陽性（2+）和強(qiáng)陽性（3+）為高表達(dá)，以陰性（-）和弱陽性（+）為低表達(dá)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 新輔助化療前后FBI-1表達(dá)與臨床療效、病理學(xué)療效

新輔助化療前，70例浸潤(rùn)性乳腺癌患者中，49例（70.00%）為FBI-1高表達(dá)，21例（30.00%）為FBI-1低表達(dá)；新輔助化療后，有31例患者FBI-1表達(dá)由高轉(zhuǎn)低，最終18例（25.71%）患者為FBI-1高表達(dá)，52例（74.29%）為FBI-1低表達(dá)，F(xiàn)BI-1高表達(dá)患者明顯減少（P＜0.01）。治療后，臨床療效：13例cCR，32例 cPR，17例 cSD，8例 cPD，共 45例（64.29%）臨床療效顯著；病理學(xué)療效：4例MP1，8例MP2，15例MP3，31例MP4，12例MP5，共43例（61.43%）病理學(xué)療效顯著。

2.2 浸潤(rùn)性乳腺癌患者療效影響因素的單因素分析

不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及PR、Ki-67、FBI-1表達(dá)情況的浸潤(rùn)性乳腺癌患者臨床療效比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ=5.240、12.106、5.588、5.528、6.000，P＜0.05）；不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及PR、Ki-67、FBI-1表達(dá)情況的浸潤(rùn)性乳腺癌患者病理學(xué)療效比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ=10.767、8.923、4.110、11.538、7.468，P＜0.05）；不同年齡、腫瘤直徑及ER表達(dá)情況浸潤(rùn)性乳腺癌患者的臨床療效及病理學(xué)療效比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表1）

表1 浸潤(rùn)性乳腺癌患者療效影響因素的單因素分析（n=70）

2.3 不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的浸潤(rùn)性乳腺癌患者FBI-1表達(dá)情況的比較

臨床分期為Ⅲ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移2～3個(gè)的浸潤(rùn)性乳腺癌患者腫瘤組織中FBI-1高表達(dá)率分別明顯高于臨床分期為Ⅱ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移0～1個(gè)的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。（表2）

表2 不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的浸潤(rùn)性乳腺癌患者FBI-1表達(dá)情況的比較（n=70）

2.4 浸潤(rùn)性乳腺癌患者療效影響因素的Logistic多因素回歸分析

以新輔助化療后臨床療效/病理學(xué)療效為因變量，以單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素如臨床分期（Ⅱ期=0，Ⅲ期=1）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（0～1個(gè)=0，2～3個(gè)=1）、PR（陰性=0，陽性=1）、Ki-67（＜25%=0，≥25%=1）、FBI-1（高表達(dá)=0，低表達(dá)=1）為自變量行Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，F(xiàn)BI-1及Ki-67均是浸潤(rùn)性乳腺癌患者臨床療效/病理學(xué)療效的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子（P＜0.05）。（表3、表4）

表3 浸潤(rùn)性乳腺癌臨床療效影響因素的Logistic多因素回歸分析

表4 浸潤(rùn)性乳腺癌病理學(xué)療效影響因素的Logistic多因素回歸分析

3 討論

乳腺癌早期癥狀較輕、不典型，患者確診時(shí)常處于中晚期，發(fā)展為浸潤(rùn)性乳腺癌，此時(shí)腫瘤體積較大、邊界模糊、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率較高，降低手術(shù)可行性，且術(shù)后易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移。新輔助治療可縮小腫瘤體積，降低腫瘤分期，利于腫瘤完全切除，行保乳治療。但因個(gè)體差異，部分患者對(duì)化療不敏感，行新輔助化療則可能延誤病情，因此，尋找乳腺癌新輔助化療療效有效預(yù)測(cè)指標(biāo)以評(píng)估療效，對(duì)患者及時(shí)調(diào)整后續(xù)治療方案、改善預(yù)后臨床意義重大。

FBI-1屬POK蛋白，作為原癌基因轉(zhuǎn)錄抑制因子位于各原癌基因、腫瘤抑制基因上游，調(diào)控多種腫瘤細(xì)胞增殖分化、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為，被稱為腫瘤總開關(guān)。已有研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌腫瘤組織中FBI-1高表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等呈正相關(guān)；FBI-1高表達(dá)會(huì)下調(diào)可變讀框基因（alterative reading frame，ARF），通過鼠雙微基因2（murine double minute 2，MDM2）途徑導(dǎo)致p53失活；FBI-1也可促進(jìn)survivin表達(dá)加速乳腺癌進(jìn)展；下調(diào)FBI-1表達(dá)可增強(qiáng)p35 mRNA與p21 mRNA表達(dá)，抑制核因子κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）信號(hào)通路從而阻滯乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖并促進(jìn)凋亡，提示FBI-1與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，可能作為乳腺癌治療的潛在靶點(diǎn)，其表達(dá)水平可能預(yù)測(cè)治療效果。

本研究發(fā)現(xiàn)，浸潤(rùn)性乳腺癌臨床療效與病理學(xué)療效均與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、PR、Ki-67、FBI-1表達(dá)有關(guān)，且新輔助治療后，F(xiàn)BI-1高表達(dá)患者明顯減少（70.00% vs 25.71%，P＜0.01），提示新輔助化療可有效下調(diào)FBI-1表達(dá)，且以上指標(biāo)均可能有療效預(yù)測(cè)價(jià)值，與毛岸云等研究結(jié)果一致。進(jìn)一步將FBI-1表達(dá)情況與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)臨床分期為Ⅲ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移2～3個(gè)的浸潤(rùn)性乳腺癌患者腫瘤組織中FBI-1高表達(dá)率分別明顯高于臨床分期為Ⅱ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移0～1個(gè)的患者，與Kannan等研究結(jié)果一致。與FBI-1高表達(dá)相比，F(xiàn)BI-1低表達(dá)時(shí)臨床療效顯著率、病理學(xué)療效顯著率均更高，提示FBI-1表達(dá)水平與新輔助化療療效密切相關(guān)，F(xiàn)BI-1高表達(dá)者可能對(duì)化療藥物不敏感，降低了新輔助化療療效，需要聯(lián)合其他治療手段增強(qiáng)新輔助治療療效。本研究多因素Logistic回歸分析顯示，F(xiàn)BI-1是浸潤(rùn)性乳腺癌患者臨床療效/病理學(xué)療效的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，表明FBI-1表達(dá)情況對(duì)評(píng)估乳腺癌新輔助化療療效具有重要預(yù)測(cè)價(jià)值。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)Ki-67也是乳腺癌新輔助化療療效的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，這與劉杰娜等研究結(jié)果一致。

綜上所述，乳腺癌患者新輔助化療療效與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及PR、FBI-1、Ki-67表達(dá)情況有關(guān)，其中FBI-1為臨床療效/病理學(xué)療效的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。