長期機采血小板捐獻者PMP、超敏C 反應蛋白、血小板參數與細菌培養結果分析

魏曉梅，王 淼，張曉偉，王曉偉，班志超，張 晶，張 曼，張 輝

（1.保定市中心血站，河北 保定 071000；2.保定市第二中心醫院，河北 保定 071000；3.保定市第一中心醫院，河北 保定 071000；4.保定市婦幼保健院，河北 保定 071000）

使用血細胞分離機采集高純度、高濃度血小板是目前采供血機構普遍采用的成分獻血方式。因其特殊的血液體外循環采集-回輸方式，導致很多人對捐獻機采血小板產生畏懼心理，害怕因耗材消毒不徹底、采集時間較長、針頭穿刺等原因發生細菌感染。目前不少文獻對捐獻機采血小板后的健康指標進行過研究[1-3]，但長期捐獻機采血小板是否會導致獻血者發生細菌感染鮮有報道。為此，本研究通過對兩組捐獻者血液中PMP、C 反應蛋白、血小板參數和細菌培養的結果進行分析，探討長期捐獻機采血小板是否會引起細菌感染。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017 年6 月～2018 年6 月捐獻機采血小板者65 例作為觀察組，其中男34 例，女31 例，年齡24～39 歲，平均年齡（36.52±5.58）歲，體重71～80 kg，平均體重（73.8±6.23）kg。觀察期間捐獻血小板次數為10～15 次，每次間隔20 天以上。另選擇同期首次捐獻機采血小板者58 例作為對照組，其中男31 例，女27 例，年齡25～41 歲，平均年齡（37.26±3.14）歲，體重70～83kg，平均體重（75.20±4.33）kg。納入標準：患者自愿獻血。排除標準：既往有各系統器官病史、精神疾病史以及失訪與依從性差的獻血者。所有捐獻者均知情同意，體檢及血液檢測均符合國家標準，兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 標本采集 兩組捐獻者均于采集血小板前無菌操作取血樣。分別取5 ml 置于EDTA 抗凝管中并混勻，用于PMP、超敏C 反應蛋白（hs-CRP）和血小板參數測定；另外取血樣5 ml，置入無菌血培養瓶，用于血液細菌培養檢測。

1.3 PMP 測定[4]將血樣在室溫下置于醫用離心機（BY-400C 型，北京白洋醫療器械有限公司）以1000r/m 離心10 min，制成富血小板血漿（PRP）。采用CD61-Percp 單克隆抗體識別PMP。PRP 和CD61-Percp 分別取5 μl 注入流式管并混勻，避光色孵育15 min 后用磷酸鹽緩沖液（PBS）1ml 懸浮細胞，同時注入標準微球（0.82 μm，美國Sigma 公司）1 μl（1∶400 稀釋）進行定位對照，然后用流式細胞儀（Cytomics FC500，美國Beckmam Coulter 公司）進行檢測。以MXP cytometer 軟件獲取樣本并分析結果。

1.4 超敏C 反應蛋白（hs-CRP）測定 將血樣在4 ℃條件下以3000r/min 離心10min，取出上清置于EP管中，采用免疫比濁法用全自動生化分析儀（美國Beckmam Coulter 公司AU-680 型）進行測定[5]。

1.5 血小板參數測定 采用XS-800i 型全自動血細胞分析儀（日本希森美康公司）檢測平均血小板體積（MPV）、血小板分布寬度（PDW）和血小板計數（Plt）。

1.6 細菌培養[6]采用美國BD 公司全自動血培養儀對血培養標本進行培養，除外標本污染菌感染，5 d內檢測出細菌生長，表示為陽性。

1.7 統計學方法 應用SPSS 16.0 軟件進行統計學處理，計量資料以（）表示，組間比較采用t檢驗，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組PMP 和hs-CRP 檢測結果比較 兩組PMP和hs-CRP 檢測結果比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組PMP 和hs-CRP 檢測結果比較（）

表1 兩組PMP 和hs-CRP 檢測結果比較（）

2.2 兩組血小板參數檢測結果比較 觀察組MPV、PDW 高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩組Plt 水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2 兩組血小板參數結果比較（）

表2 兩組血小板參數結果比較（）

2.3 兩組細菌培養結果比較 兩組標本細菌培養均未發現細菌菌株。

3 討論

有文獻報道[7]，血小板是一種炎癥細胞，具有早期識別和監測細菌感染的功能，當機體收到刺激物攻擊發生感染時，血小板發生活化，血小板α-顆粒脫落并分泌PMP，參與血小板對微生物的識別與殺傷。細菌感染時hs-CRP 會增加[5]，可作為早期診斷細菌感染的敏感指標。另外，血小板減少與感染疾病密切相關[8]，因血小板對細菌毒素比較敏感，通常在血流感染早期就有較明顯的反應[9]，主要表現為血小板數目減少，產生大量巨噬細胞，加重炎性反應。

本研究為探討長期頻繁捐獻機采血小板是否會引發血液細菌感染，選取在血液細菌感染的病理生理過程中比較有意義的PMP、hs-CRP、血小板參數和細菌培養作為檢測指標。結果顯示，長期頻繁捐獻機采血小板者的PMP、hs-CRP 并無明顯升高，與首次捐獻的正常健康人比較，差異無統計學意義（P＞0.05），提示其因細菌感染導致炎癥反應的發生率極低，MPV、PDW 參數高于對照組，提示多次捐獻機采血小板對促進造血功能可能有一定影響，但對Plt影響不大。兩組標本均未發現細菌菌株，說明長期頻繁捐獻機采血小板不會引起細菌感染，但對促進造血功能可能產生一定影響。

綜上所述，捐獻機采血小板無細菌感染的并發癥風險，可以舉辦獻血招募活動，促進臨床合理用血和成分輸血工作的順利開展。