新型冠狀病毒及其臨床檢測方法分析

張玉基

摘要：本文中簡單分析了新型冠狀病毒疫情在我國的特點，并探討了相應(yīng)的臨床檢測方式和病毒防控方式，旨在為我國新冠病毒控制提供參考。

關(guān)鍵詞：新型冠狀病毒;臨床監(jiān)測;疫情防控;病情管理

新冠疫情在2019年年底在我國武漢爆發(fā)，并且快速在全球范圍內(nèi)流行，直至2021年這一疾病已經(jīng)擴散至全球。新型冠狀病毒主要通過呼吸道飛沫以及密切接觸進行傳播，這種疾病具有極強的傳染性，尤其是部分患者不會出現(xiàn)病情癥狀，但依舊具有較強的感染力，這也直接導致新冠疫情的控制難度明顯增加。新冠肺炎的確診以及檢測對于疫情防控的開展來說極為重要，快速檢測患者的疾病，并及早對患者進行隔離和治療，是疫情防控的關(guān)鍵點，新冠病毒的監(jiān)測以及核酸以及特異性抗體監(jiān)測涉及到的內(nèi)容較為復雜，需要針對新型冠狀病毒的病原學特點和我國目前所具有的檢測方式進展進行綜合評估，只有這樣才能夠保障我國現(xiàn)代化的新型冠狀病毒的監(jiān)測工作順利開展。

一、新型冠狀病毒的病原學特點

在2019年12月，一種由新型冠狀病毒所引發(fā)的肺炎，在武漢爆發(fā)并且正逢我國的春節(jié)，這一集并快速在我國形成傳播趨勢，并且新冠病毒具有極強的人傳人能力，疾病已經(jīng)被作為急性呼吸道傳染疾病并納入我國的傳染病防治法中，屬于乙類傳染病，并且在進行管控時選擇甲類傳染病的預防管控方案。新冠病毒不僅對于我國的醫(yī)療環(huán)境產(chǎn)生了極大的威脅，同時也在一定程度上波及了全球的公共衛(wèi)生安全，所以快速準確的對患者的疾病進行判斷并開展有效的防控工作，是現(xiàn)代相關(guān)管理人員需要重視的一項問題。新型冠狀病毒是發(fā)現(xiàn)的第7種β屬冠狀病毒，對其進行分析可以發(fā)現(xiàn)其具有包膜，并且顆粒呈現(xiàn)圓形或橢圓形，直徑大約為60～140nm。新型冠狀病毒的遺傳物質(zhì)為單股正鏈RNA，而其中的基因組大小大約為30KB，是目前已知基因組最大的一種RNA病毒。對其生物學行為進行研究可以發(fā)現(xiàn)這一疾病的轉(zhuǎn)錄模式與2012年出現(xiàn)的SARS-CoV具有較高的相似性。新型冠狀病毒中包含14個ORF，這一物質(zhì)對其中的27種蛋白質(zhì)進行編譯。在近年來的相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)這種疾病與蝙蝠冠狀病毒的同源性可以達到85%以上，而新型冠狀病毒在體外分離的環(huán)境下進行培養(yǎng)，在人呼吸道上皮細胞中可以在培養(yǎng)96小時后被發(fā)現(xiàn)，而在分離培養(yǎng)皿中大約發(fā)現(xiàn)時間為6天。新型冠狀病毒對于環(huán)境中的溫度以及紫外線有較高的敏感度，在56攝氏度的環(huán)境下對新型冠狀病毒進行處理，大約30分鐘即可被完全滅活，同時乙醚和75%乙醇以及含氯消毒劑均能夠有效滅活新型冠狀病毒。在相關(guān)研究中證實， ACE2作為受體蛋白與病毒一起被內(nèi)吞進入細胞，這也直接導致細胞表面的ACE2蛋白酶出現(xiàn)明顯減少，這也在一定程度上導致患者的血管緊張素以及腎素系統(tǒng)完全失衡。患者本身存在類似于糖尿病、高血壓的基礎(chǔ)疾病患者在發(fā)生感染后病情則更加嚴重。針對新冠肺炎患者進行研究，可以發(fā)現(xiàn)患者的下呼吸道病毒含量，相較于上呼吸道來說明顯更高。而在對患者進行病情檢驗時，患者的呼吸道病毒檢驗準確度相較于血液檢測來說明顯更高，所以在進行患者的病情取樣時，一般情況下建議選擇下呼吸道樣本，肺泡灌洗液和支氣管灌洗液，其次可選擇患者的呼吸道深部深部痰液以及患者口咽部位的粘液。在對患者進行診斷前取樣，應(yīng)當根據(jù)患者的接受度以及診斷需求來進行調(diào)整，所以目前我國在對普通民眾進行檢測時，選擇的是鼻咽拭子，而在對重癥患者進行診斷時，則主要采用下呼吸道標本來進行檢驗，以保障患者的診斷準確度。除此之外，部分患者的檢驗結(jié)果中發(fā)現(xiàn)糞便樣本與常用的因式子咽拭子樣本的診斷準確率基本相似，甚至檢驗準確率更高，需要相關(guān)工作人員引起高度重視。

二、檢測方法

1.實驗室的病毒分離以及鑒定

病毒培養(yǎng)以及分離鑒定是實驗室內(nèi)開展病原體檢測的新標準，研究人員在進行研究時通過獲取患者的支氣管肺泡灌洗液，將其分離的病毒接種制人上皮細胞后，大約在96小時后，可在人氣道上皮細胞的表層觀察到其細胞出現(xiàn)病變。在進行判斷是工作人員可以在透射電鏡的環(huán)境下，觀察到病毒顆粒所具備的冠狀病毒日冕的特殊結(jié)構(gòu)。在進行病情分析室分離，純化病毒能夠為今后的病毒生物學特征以及致病機理和疫苗研發(fā)奠定基礎(chǔ)，但由于不同病毒的培養(yǎng)時間以及培養(yǎng)技術(shù)有不同的要求，所以工作人員在進行管理時，應(yīng)當在三級安全的生物實驗室內(nèi)開展鑒定以及分離，所以這一技術(shù)也僅僅適合應(yīng)用于疫情期間的研究，而并不適用于新型冠狀病毒的快速診斷。

2.核酸檢測

核酸檢測涉及到的內(nèi)容較為復雜，而核酸檢測是目前我國對新冠肺炎進行診斷的最常用的一種方式。面對新型冠狀病毒所引發(fā)的本次疫情，在進行病毒的控制前，對病毒進行遺傳序列的基因組測序，則能夠幫助研究人員了解病毒所具有的遺傳學特征，同時還能夠幫助研究人員預測病毒可進行的進化以及變異，同時還能在一定程度上解釋病毒所具備的獨立來源，做好病毒的追蹤以及溯源分析，在進行檢測時通過對病毒的基因組進行測序，還能夠研發(fā)特異性的檢驗試劑盒，為疫苗研發(fā)工作提供基礎(chǔ)的理論支持。而在本次疫情爆發(fā)后，我國研究人員在一個月以內(nèi)就通過宏轉(zhuǎn)錄測序技術(shù)對病毒的基因組進行了有效的促敘，了解了病毒的發(fā)育樹特征，并且在測序完成后將測序結(jié)果直接上報給whoWHO，并且全世界范圍內(nèi)進行共享，對于各個國家的疫情防控提供了基礎(chǔ)的理論支持。研究人員通過第3代測序技術(shù)，在6～10小時內(nèi)完成了新型冠狀病毒以及其他病毒的檢測，不僅十分快速，并且準確度極高。高通量測序技術(shù)在應(yīng)用過程中所展現(xiàn)出的高度準確以及高度靈敏的特征，為相關(guān)工作人員開展檢驗工作打下了堅實的基礎(chǔ)。并且這一技術(shù)在應(yīng)用過程中還可通過鑒定的方式了解其他的致病病原體，但在檢驗過程中，高通量測序技術(shù)具有較高的檢驗成本，并且檢測時間較長，并且還需要專業(yè)的生物研究人員對最終的測試結(jié)果進行分析和解答，導致專業(yè)性要求較高，所以并不適合在疫情的高發(fā)時間段內(nèi)進行大規(guī)模的應(yīng)用，僅僅適合應(yīng)用于病毒的特征學研究中。

實時熒光定量PCR技術(shù)在應(yīng)用過程中同樣能夠獲得較為良好的效果。熒光探針法具有較高的特異性，在進行判斷時通過不同的診斷要求合理設(shè)計探針，則能夠區(qū)分常見的不同病原菌，對于多個靶標進行同時監(jiān)測，也能夠在一定程度上使檢測工作的準確度得到提升。除此之外，在進行檢測是時PCR技術(shù)還可進行進一步的優(yōu)化，例如將其分為一步法和兩步法，一步法，診斷相較于兩步法，診斷來說，不僅操作簡單并且也十分迅速，能夠有助于提高樣本的反應(yīng)濃度，并且減少開蓋次數(shù)，有助于避免樣本遭到周圍環(huán)境或空氣的污染。熒光定量PCR技術(shù)在應(yīng)用過程中，憑借其檢測快速以及成本較低的特征，被廣泛應(yīng)用于我國疫情期間的病情診斷中。這項檢測技術(shù)在應(yīng)用過程中容易受到多方面因素的影響，而出現(xiàn)假陰性的情況，所以在進行病情判斷時，應(yīng)當對其進行多次檢測，通過這種方式保障檢測結(jié)果的準確性和有效性。

三、監(jiān)測結(jié)果受影響以及疫情防控方法探討

新冠病毒核酸檢測在應(yīng)用過程中陽性檢出率大約為30%～50%，在檢測時應(yīng)用于檢測的樣本不合格或者樣品收集過早過晚，都有可能導致檢出結(jié)果受到影響，所以在進行樣本采集時，一般情況下建議選擇多個部位的樣本進行混合檢查或者同時檢查，尤其是在進行樣本采集時，一定要嚴格按照相應(yīng)的標準進行處理。相關(guān)研究人員針對鼻拭子、咽拭子以及痰液等樣本的檢測準確率進行對比可以發(fā)現(xiàn)支氣管肺泡灌洗液具有最高的診斷陽性率，其次則為痰液標本，鼻咽拭子經(jīng)對比分析未見明顯差異，所以在目前我國進行檢查時，所選擇的檢測方式為鼻咽拭子檢測方案。這一檢測技術(shù)能夠在最短的時間內(nèi)完成病原菌的檢測，并且還能為相關(guān)工作人員提供患者的病原感染菌特征，以確保患者的診斷準確度，降低外界因素對檢驗結(jié)果產(chǎn)生的影響。

病毒核酸檢測陽性是新型冠狀病毒的病原學診斷依據(jù)，目前臨床上在對患者的病情進行診斷時，主要采用上呼吸道鼻咽拭子作為核酸檢測樣本，而其他生物樣本在臨床上的診斷準確度較少。在研究結(jié)果中，痰液樣本診斷陽性率最高的原因可能是由于新型冠狀病毒經(jīng)呼吸道分泌物進入消化道所導致的，但也并不排除消化道粘膜屏障損傷，可能會導致患者陽性率增加的情況。在患者假陰性出院以及出院后患者的復陽性風險較高，故而醫(yī)務(wù)人員在對患者的病情進行判斷時，可根據(jù)患者的臨床癥狀作出相應(yīng)的診斷方式選擇必要時可以采用消化道檢測聯(lián)合痰液檢測的方式對患者進行判斷，能夠有助于改善患者的病情。而在對患者進行診斷時，所應(yīng)用的診斷方式會在一定程度上影響檢驗效率，故而醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當選擇一種最有效率的檢驗方案，以保障檢驗工作的有效性。

總結(jié)

新冠疫情在發(fā)生后對病毒進行檢驗，受到了相關(guān)工作人員的高度重視，而新型冠狀病毒的檢驗方式較多并且其優(yōu)勢和劣勢各不相同，在對患者進行檢測時，應(yīng)當提高檢驗方法的準確性，并盡量選擇全自動流水式的快速檢驗方式，只有這樣才能夠使現(xiàn)代化的檢驗工作更加順利的開展，方便普通民眾在社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)內(nèi)進行篩查，這樣能夠有助于提高新冠病毒的檢驗準確度，使檢測效率得到提升。

參考文獻

[1]李彩玉，陳夢媛，張師音，葛勝祥. 新型冠狀病毒核酸檢測假陰性原因分析及控制要點[J]. 廈門大學學報（自然科學版），2020，59（03）：310-316.

[2]王露瑩，陳品儒，鄭國灣，漆楠，楊科. 新型冠狀病毒檢測方法的研究進展[J]. 現(xiàn)代藥物與臨床，2020，35（03）：411-416.

[3]王達，董梁，卿松，閆中強. 新型冠狀病毒核酸檢測中的思維誤區(qū)[J]. 中華醫(yī)院感染學雜志，2020，30（08）：1167-1170.

[4]王旭東，施健，丁偉峰，鞠少卿，趙建華. 2019新型冠狀病毒核酸檢測的研究狀況與應(yīng)用探討[J]. 臨床檢驗雜志，2020，38（02）：81-84.