王 青 王金娜 何 雪 劉 靜 賀紅艷
(西安醫學院醫學技術學院,陜西 西安 710021)
尿液蛋白質的定性檢測是尿液常規檢測必做項目之一,能夠有效反映腎臟的功能狀態,可作為泌尿系統疾病的篩選指標[1]。血漿中小相對分子量(<40 000)蛋白能順利通過腎小球的濾過膜并被重吸收,由于其血漿中濃度較低,最終僅有少量蛋白出現在尿液中。白蛋白等中相對分子量的蛋白在血漿中濃度較高,絕大部分血漿白蛋白在通過濾過膜后都被腎小管重吸收,高相對分子量(>90 000)蛋白很難通過正常的腎小球濾過膜。一般常規方法無法檢出[2]。隨著醫療水平和人民健康意識的增強,人們對檢測結果的準確性,可靠性要求更高[3]。如何合理選擇檢測方法是檢驗工作者必須認真思考的問題。該實驗同時使用三種方法檢測同一尿液標本,比較三種方法結果的差異,并從原理進行探討分析。
連續7 d隨機收集住院病人尿液標本500例,并于2 h內檢驗完成。
尿液分析儀,酒精燈,5%醋酸溶液,10%磺基水楊酸。
(1)干化學法。確保儀器狀態良好、質控結果在控后,嚴格按照試紙條和儀器使用說明進行操作,儀器自動打印結果。
(2)磺基水楊酸法。留取離心后上清尿液2 mL于小試管中,滴加10%磺柳酸試劑1~2滴,觀察尿液渾濁度變化、有無沉淀生成,判讀并記錄結果。
(3)加熱乙酸法。向玻璃試管加入尿液8 mL約占試管的2/3,試管夾持試管底部,試管呈60°傾斜,管口朝外,將尿液上端部分置于火焰上方加熱煮沸,以小滴管加入2~3滴醋酸溶液后,觀察有無渾濁,繼續加熱至沸,判讀并記錄結果。
對比干化學法、加熱乙酸法,磺基水楊酸法三種方法的陽性率,計數資料以百分率表示。并將磺基水楊酸法作為參考方法,計算干化學法和加熱乙酸法的靈敏度、特異度。
對500例尿標本同時用三種蛋白定性方法進行檢測。磺基水楊酸法蛋白陽性117例,陽性率23.40%;干化學法蛋白陽性161例,陽性率32.20%,加熱乙酸法蛋白陽性111例,陽性率22.20 %。見表1。干化學法的假陽性率、真陽性率高于加熱乙酸法,假陰性率、真陰性率低于加熱乙酸法。見表2、表3。

表1 三種蛋白檢測方法陽性率比較

表2 磺基水楊酸法(設為參考方法),干化學法、加熱乙酸法檢驗結果比較

表3 干化學法、加熱乙酸法評價指標的比較
尿液干化學法方便快捷,成本低,是臨床實驗室最常用的篩選方法[4]。但由于檢測原理的局限,影響因素較多,如pH過高、陰道分泌物的污染、色素、部分鹽類或標本含有較多細胞成分時,干化學法檢測可引起假陽性。加熱乙酸法中加入乙酸可使尿液pH下降到蛋白質等電點,從而促進蛋白質變性沉淀,并可消除尿液中某些磷酸鹽受熱析出結晶,進而避免混濁的干擾,結果準確,可作為蛋白質定性實驗的確證實驗,但當尿呈強堿性時,加熱乙酸法呈假陰性反應。磺基水楊酸法操作便捷,敏感度較高。易受干擾因素影響,造成假性結果。
本實驗對比了三種尿蛋白定性檢測方法檢測結果的差異,發現干化學法的假陽性率(誤診率)、真陽性率(靈敏度)高于加熱乙酸法,假陰性率、真陰性率低于加熱乙酸法,假陰性率(漏診率)、真陰性率(特異度)低于加熱乙酸法。林榮萬[5]等研究尿蛋白三種檢驗方法比較結果顯示,干化學法陽性率最高,為31.33%,且靈敏度較高,但誤診率較高,加熱
乙酸法特異度最高,三種方法各有優缺點,應綜合分析,慎重選擇檢測方法,與本研究結果相符。
綜上所述,三種方法各有優缺點,相輔相成,在臨床工作中應全面分析,合理選擇,特別是要注重干擾因素的影響,從而降低方法學所帶來的假陽性率和假陰性率。