甲狀腺病變的液基細胞學(xué)診斷病理分析

田曉琴，林艷麗，張睿，王麗婷，徐顯輝，邱威明，馬多，林鷺平

1.廈門市醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院病理科，福建廈門 361021；2.廈門市醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院內(nèi)分泌科，福建廈門 361021；3.廈門市醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院超聲影像科，福建廈門 361021

甲狀腺病變在臨床非常見，主要高發(fā)群體為成年人，具有較高發(fā)病率，且大部分會形成惡性結(jié)節(jié)，因此早發(fā)現(xiàn)、早治療非常關(guān)鍵。隨著高分辨率超聲技術(shù)的進展，以及甲狀腺體檢的普及，臨床對甲狀腺結(jié)節(jié)的檢出率逐年上升，但是惡性陽性率的檢出率卻十分低下[1]。臨床對于對甲狀腺結(jié)節(jié)良、惡性的判斷一直非常重視，對該病癥的診斷方式有很多種，但如何提升診斷準確性一直是臨床面對的難題，其中臨床認為最安全、便捷的診斷方式為細針吸取細胞學(xué)檢查，該診斷方式能夠避免患者進行不必要的手術(shù)，減少患者痛苦，具有創(chuàng)傷小、敏感性高、準確性高的特征。甲狀腺病變的惡性陽性率診斷是按照組織細胞的惡性形態(tài)進行病理診斷得出，因此對甲狀腺細針穿刺制片質(zhì)量的提升非常必要，其直接關(guān)系到診斷準確率[2]。該文采用該院于2018年2月—2019年3月這一時間段內(nèi)接收的甲狀腺病變患者共計100例作為研究對象，針對液基細胞學(xué)對甲狀腺病變病理診斷的作用進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

隨機選取該院接收的甲狀腺病變患者100例作為研究對象，所有患者均進行細針穿刺細胞學(xué)診斷。100例患者中，男52例，女48例；年齡最小者12歲，最大者78歲，平均(41.12±2.93)歲；病程5 d~31年，平均（17.27±1.98）年；全部患者的甲狀腺區(qū)域都存在體積各異的結(jié)節(jié)，少量患者可觸及腫大淋巴結(jié)，腫物直徑為0.6~11.9 cm；甲狀腺左葉腫塊35例，甲狀腺右葉腫塊30例，甲狀腺雙葉和峽部腫塊35例?；颊咴诖┐虣z查后1個月內(nèi)全部進行組織學(xué)切片檢查。納入標準：所有患者均持有臨床醫(yī)生開具的穿刺細胞學(xué)檢查申請單和臨床資料；患者的甲狀腺腫塊抽吸物具備進行傳統(tǒng)制片以及液基細胞制片的條件；患者的經(jīng)濟能力可以接受液基細胞學(xué)檢查費用；該實驗經(jīng)過醫(yī)學(xué)倫理委員會批準；全部患者自愿接受該實驗，并簽署同意協(xié)議書。排除標準：不愿意接受該研究的患者；存在重大疾病史的患者；存在其余惡性腫瘤疾病的患者。

1.2 方法

患者保持居中坐位或仰臥位，頸部微微向后傾斜，完全展露甲狀腺，對患者進行問診、觸診后，選取穿刺位置。首先進行局部消毒處理后，將穿刺位置進行固定，將5~20 mL一次性注射器連接22G針頭，之后進行穿刺，穿刺方式可通過超聲引導(dǎo)進行，也可以盲穿方式進行。

超聲引導(dǎo)下細針抽吸細胞學(xué)檢查方法：以甲狀腺檢查條件為準，對超聲診斷儀、高頻線陣探頭參數(shù)進行設(shè)定，橫切和縱切對甲狀腺和頸部淋巴結(jié)進行全面檢查，并將結(jié)節(jié)指標和血流情況進行記錄，對可疑病灶進行穿刺，按照病灶情況調(diào)整深度、增益和聚焦位置，保持圖像清晰，穿刺位置以微小鈣化、囊實性結(jié)節(jié)實性處或囊壁為準，在超聲引導(dǎo)下對穿刺方向和角度進行監(jiān)視。對患者進行局麻操作，刺入甲狀腺內(nèi)或甲狀腺結(jié)節(jié)內(nèi)持續(xù)性負壓穿刺，反復(fù)進退針20次后，將組織吸取出進行涂片操作[3]。

涂片分兩種方式，一種是傳統(tǒng)涂片，涂片2~7張，用乙醇進行濕片固定；另一種是液基細胞學(xué)制片，再次穿刺后進行薄層液基細胞學(xué)涂片；將兩組制片放在95%乙醇內(nèi)固定放置20 min后進行染色（常規(guī)或巴氏）、封片、顯微鏡下觀察。液基細胞學(xué)制片：把液基保存液放置在試管內(nèi)，進行梯度離心操作，次數(shù)為2次。第1次注入梯度離心液5 mL，離心時間10 min，轉(zhuǎn)速為1 080 r/min，吸取上清液后注入5 mL緩沖液。第2次離心時，時長10 min，轉(zhuǎn)速2 000 r/min，吸取上清液后注入1 mL緩沖液，放在震蕩器上進行混合震蕩30 s，之后把混合液放在全自動沉降式液基薄層細胞制片機內(nèi)，對細胞進行轉(zhuǎn)移、沉降、貼附和染色等操作，最后完成細胞薄片[4]。

1.3 觀察指標

對比兩種制片方式診斷結(jié)果。病理組織學(xué)分類以甲狀腺病變分類標準為參考，共計包括5個類型，分別為良性病變、惡性病變、可疑惡性、涂片不滿意、濾泡性腫瘤。其中良性病變包括甲狀腺腫、亞急性甲狀腺炎和橋本甲狀腺炎3個方面；惡性病變包括淋巴瘤、髓樣癌和甲狀腺乳頭狀癌3個方面；可疑惡性是指存在惡性可能，但無法確認；涂片不滿意是指不能進行診斷，涂片中能見到的、可以觀察的濾泡細胞團少于6個，且每團含有的濾泡細胞少于10個或超過20個濾泡細胞；甲狀腺癌的惡性陽性率為癌病例數(shù)占病例總數(shù)的百分比。

1.4 統(tǒng)計方法

通過SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件統(tǒng)計數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以頻數(shù)及百分比表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

液基細胞學(xué)制片診斷結(jié)果顯示，良性、惡性、可疑惡性、制片不滿意、濾泡性腫瘤的例數(shù)分別為86例、11例、1例、1例和1例；傳統(tǒng)方法制片診斷結(jié)果顯示，良性、惡性、可疑惡性、制片不滿意、濾泡性腫瘤的例數(shù)分別為81例、3例、5例、8例和3例；液基細胞學(xué)制片不滿意占據(jù)1%（1/100），傳統(tǒng)方法制片不滿意占據(jù)8%（8/100），兩種制片方式制片不滿意占據(jù)百分率相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.701，P=0.017）。液基細胞學(xué)制片診斷下惡性陽性率為11.0%（11/100），傳統(tǒng)方法制片診斷下惡性陽性率為3%（3/100），兩種制片方式惡性陽性率相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.916，P=0.027），見表1。

表1 液基細胞學(xué)制片診斷結(jié)果及傳統(tǒng)方法制片診斷結(jié)果

3 討論

甲狀腺腫塊也叫甲狀腺結(jié)節(jié)，在臨床是一種常見病癥。臨床經(jīng)驗表明，細針穿刺檢查甲狀腺病變性質(zhì)的效果顯著優(yōu)于放射性核素影像以及超聲波檢查，所以在臨床甲狀腺病變的診斷方面，以細針穿刺為主，但是進行病理診斷時，必須要在標本和制片質(zhì)量達標的前提下進行。因為細針穿刺細胞學(xué)存在一定缺陷，要根據(jù)細胞形態(tài)的改變?yōu)橐罁?jù)進行穿刺，若穿刺的結(jié)節(jié)過小、病灶太多，病變部位比較特殊，細胞量過少，病變組織整體構(gòu)造不足，病變組織以及周圍組織間結(jié)構(gòu)關(guān)系缺乏等。在這些背景條件下，都不能進行有效穿刺，所以細胞學(xué)診斷和組織學(xué)病理診斷并不相同。相關(guān)研究表明，細針穿刺細胞學(xué)和組織病理學(xué)檢查診斷具有較高符合率，對于細胞的形狀排列特征等能夠進行準確診斷，但是在濾泡性腫瘤診斷方面，準確率較低，必須顯現(xiàn)腫瘤包膜或其下血管浸潤處才能提升診斷準確率，對于可疑惡性結(jié)節(jié)進行穿刺時，特別是囊實性結(jié)節(jié)，應(yīng)該以超聲引導(dǎo)穿刺方式進行，可以避免漏診情況。但是對于淋巴細胞甲狀腺炎進行制片時，要防止將血液中的淋巴細胞當做甲狀腺炎的診斷標準，當淋巴細胞與中性粒細胞比例和外周血涂片接近時，要慎重診斷[5-6]。

液基細胞學(xué)涂片技術(shù)將標本的采集和處理方式進行了優(yōu)化，因此涂片質(zhì)量有所提升，已經(jīng)在臨床被廣泛應(yīng)用在婦科疾病領(lǐng)域，用于對尿液、體液和呼吸道的標本進行檢測，隨著技術(shù)的不斷提升，也逐漸被應(yīng)用在細針抽吸細胞學(xué)診斷領(lǐng)域當中。和傳統(tǒng)細胞學(xué)涂片相比，液基細胞學(xué)涂片背景更清晰，更干凈，膠質(zhì)更少，且以濃染的水滴狀顯現(xiàn)，細胞核雖然小但細節(jié)更易觀察。甲狀腺組織血供豐富且含有濾泡膠質(zhì)，因此傳統(tǒng)涂片中細胞會被血液、膠質(zhì)遮蓋，對制片質(zhì)量造成影響，直接影響診斷結(jié)果[7-8]。液基細胞學(xué)檢查應(yīng)用在甲狀腺細針穿刺當中，可以減少血液、膠質(zhì)的干擾，將有限的細胞進行聚集，制作成均勻的液基薄片，能夠改善穿刺細胞丟失情況，從而提升制片質(zhì)量，進而提升甲狀腺病變細胞學(xué)診斷準確性。甲狀腺乳頭狀癌的細胞學(xué)特征在液基細胞學(xué)涂片以及傳統(tǒng)細胞學(xué)涂片方面存在一定差異，而液基細胞學(xué)涂片中的粉狀染色質(zhì)和甲狀腺乳頭狀癌診斷密切相關(guān)，更利于診斷，表明在甲狀腺病變診斷中，利用液基細胞學(xué)涂片技術(shù)便于制片的深入制作，進行特殊染色和輔助技術(shù)[9-11]。

該文研究中，涂片特征包括細胞學(xué)形態(tài)和標本質(zhì)量。細胞學(xué)形態(tài)包括細胞學(xué)面積、背景、細胞量、細胞排列、細胞大小和細胞核6個方面。標本質(zhì)量包括濾泡上皮組織碎片、膠質(zhì)、血液成分遮蓋、人為細胞變形和退變4個方面。液基細胞學(xué)制片的細胞學(xué)面積是直徑大小為13 mm的圓形薄片，而傳統(tǒng)涂片的面積為超過2/3面積大小的玻片；液基細胞學(xué)制片的細胞學(xué)背景非常清晰，且血細胞、膠質(zhì)和雜質(zhì)非常少；傳統(tǒng)涂片的細胞學(xué)背景不但血細胞和膠質(zhì)非常多，而且互相交叉，非?；靵y；液基細胞學(xué)制片的細胞量非常多，并且比較聚集；傳統(tǒng)涂片的細胞量或多或少，十分散亂；液基細胞學(xué)制片的細胞排列以單層平鋪形式顯現(xiàn)，且形狀為薄片和腺團狀；傳統(tǒng)涂片的細胞排列多層交叉，以團塊狀呈現(xiàn)；液基細胞學(xué)制片下的細胞比較?。欢鴤鹘y(tǒng)涂片的細胞比較大；液基細胞學(xué)制片的細胞核比較清晰，但是傳統(tǒng)涂片的細胞核不夠清晰；液基涂片的濾泡上皮組織碎片結(jié)構(gòu)大多數(shù)可見，且十分清楚，但是傳統(tǒng)涂片的濾泡上皮組織碎片卻大多數(shù)不可見，且不夠清楚；液基涂片的膠質(zhì)比較少，且呈現(xiàn)出粉紅色的圓形小團形狀，而傳統(tǒng)涂片的膠質(zhì)比較多，常和血液融合，形狀不固定；液基涂片的血液成分遮蓋基本沒有，但是傳統(tǒng)涂片大部分都被血液成分遮蓋；液基涂片的人為細胞基本沒有出現(xiàn)變形和退變現(xiàn)象，但是傳統(tǒng)涂片的人為細胞變形和退變現(xiàn)象卻時有發(fā)生。通過對比傳統(tǒng)涂片方法和液基細胞學(xué)進行制片兩種形式，發(fā)現(xiàn)液基細胞學(xué)制片不滿意例數(shù)少于傳統(tǒng)方法制片，表明液基細胞學(xué)制片質(zhì)量遠遠優(yōu)于傳統(tǒng)制片；在惡性陽性率方面，液基細胞學(xué)制片診斷惡性陽性例數(shù)也多于傳統(tǒng)方法制片。楊汶士[12]研究中表明，液基細胞學(xué)制片診斷準確率是92.60%，高于傳統(tǒng)涂片制片診斷準確率是86.42%（P＜0.05），體現(xiàn)出液基細胞學(xué)制片方法存在較高診斷準確性。該研究中液基細胞學(xué)制片診斷下惡性陽性率為11.0%，傳統(tǒng)方法制片診斷下惡性陽性率為3.0%，液基細胞學(xué)制片診斷方式中惡性陽性的檢出率更高（P＜0.05），表明相對于傳統(tǒng)方法，液基細胞學(xué)制片檢查方式更具優(yōu)越性。

綜上所述，在甲狀腺癌惡性陽性率檢測方面，液基細胞學(xué)技術(shù)與傳統(tǒng)方法制片方式均能對其進行診斷，但液基細胞學(xué)技術(shù)應(yīng)用于甲狀腺細針穿刺其診斷惡性陽性檢出數(shù)據(jù)更高，可為臨床提供更為準確的數(shù)據(jù)參考。