血清視錐蛋白樣蛋白1和CXC型趨化因子配體16及抗心磷脂抗體水平與急性腦梗死患者病情及預(yù)后的關(guān)系研究

陳圣君，李波，陳國(guó)柱，楊丹

急性腦梗死主要因腦部動(dòng)脈粥樣硬化和血栓造成局部腦組織區(qū)域血液供應(yīng)障礙，導(dǎo)致腦組織急性缺血缺氧性病變壞死，進(jìn)而產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的神經(jīng)功能缺失表現(xiàn)［1］。據(jù)統(tǒng)計(jì)，急性腦梗死發(fā)病率約占臨床腦血管疾病的80%，是人類(lèi)常見(jiàn)死亡原因之一，嚴(yán)重威脅人們的生命健康與生活質(zhì)量［2］。研究提示，對(duì)急性腦梗死患者實(shí)施超早期及急性治療是減緩腦組織損傷的有效措施，而及時(shí)診斷與準(zhǔn)確評(píng)估患者病情是早期干預(yù)的前提，對(duì)患者的康復(fù)及預(yù)后至關(guān)重要［3］。因此，為急性腦梗死臨床診斷尋求科學(xué)靈敏的血清學(xué)指標(biāo)具有重要研究?jī)r(jià)值。視錐蛋白樣蛋白1（VILIP-1）可與鈣離子結(jié)合，參與維持腦部神經(jīng)功能正常運(yùn)行，已有研究表明，VILIP-1指標(biāo)可用于評(píng)估老年早期腦萎縮程度［4］。CXC型趨化因子配體16（CXCL16）屬于趨化因子CXC家族，當(dāng)其表達(dá)量高于參考范圍時(shí)，能夠激活機(jī)體免疫反應(yīng)并加速動(dòng)脈粥樣硬化形成［5］。另外，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，腦血管缺血性疾病的發(fā)生通常伴隨抗心磷脂抗體（ACA）水平的升高［6］，由此認(rèn)為該指標(biāo)可在一定程度上反映血管內(nèi)皮損傷程度。基于此，本研究探討了血清VILIP-1、CXCL16及ACA水平與急性腦梗死患者病情及預(yù)后的相關(guān)性，以期為臨床急性腦梗死的早期診斷提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月—2020年8月杭州市富陽(yáng)區(qū)第一人民醫(yī)院收治的急性腦梗死患者（急性腦梗死組，n=116），以及同期在本院健康體檢者（對(duì)照組，n=60）作為研究對(duì)象。急性腦梗死組患者根據(jù)神經(jīng)功能損傷程度分為輕、中、重度損傷亞組（n=36、48、32），根據(jù)顱腦電子計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）檢查的腦梗死面積分為大、中、小面積梗死亞組（n=30、55、31），根據(jù)改良Rankin量表（mRS）分為預(yù)后良好、預(yù)后不良亞組（n=70、46）。

對(duì)照組中男32例、女28例，年齡35～75歲，平均年齡（64.5±10.8）歲，體質(zhì)指數(shù)（BMI）18～27 kg/m2，平均BMI（23.6±2.4）kg/m2；急性腦梗死組中男66例、女50例，年齡38～77歲，平均年齡（65.7±11.5）歲，BMI 18～28 kg/m2，平均 BMI（23.8±2.6）kg/m2，合并高血壓68例、糖尿病40例、高脂血癥34例、飲酒史39例。兩組性別、年齡、BMI比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.203，t=0.678，t=0.496，P均>0.05）。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2018》［7］中有關(guān)急性腦梗死患者的診斷標(biāo)準(zhǔn)；初次發(fā)病，既往無(wú)急性腦梗死史；發(fā)病至入院間隔時(shí)間<24 h；經(jīng)CT、MRI等影像學(xué)檢查確診；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并惡性腫瘤、全身性感染疾病、自身免疫性疾病；腦部曾有外科手術(shù)史；心肝腎等重要器官功能?chē)?yán)重?fù)p傷；腦出血；近期使用過(guò)抗凝藥物。

1.3 檢測(cè)方法 抽取研究對(duì)象外周靜脈血5 ml，以3 000 r/min離心15 min（離心半徑為13.5 cm）后收集上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)血清VILIP-1、ACA水平，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海西唐生物科技有限公司；采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清CXCL16水平，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京冬歌博業(yè)生物科技有限公司。所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 分組標(biāo)準(zhǔn) 梗死面積：采用CT測(cè)定腦梗死面積，腦梗死灶最大層面直徑<1.5 cm為小面積梗死，1.5～5.0 cm為中面積梗死，>5.0 cm為大面積梗死。

神經(jīng)功能損傷程度：根據(jù)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）評(píng)分評(píng)價(jià)急性腦梗死組患者神經(jīng)功能損傷程度［8］，NIHSS評(píng)分0～15分為輕度損傷，16～30分為中度損傷，31～45分為重度損傷。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較 急性腦梗死組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0.5），見(jiàn)表1。

表1 兩組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA between acute cerebral infarction patients and healthy examinees

表1 兩組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA between acute cerebral infarction patients and healthy examinees

注：VILIP-1=視錐蛋白樣蛋白1，CXCL16=CXC型趨化因子配體16，ACA=抗心磷脂抗體

ACA（mg/L）對(duì)照組 60 1.25±0.33 1.45±0.42 0.33±0.10急性腦梗死組 116 8.53±2.84 2.47±0.83 1.17±0.38 t值 -19.760 -8.937 -16.803 P值 <0.001 <0.001 <0.001組別 例數(shù) VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.2 輕、中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較 輕、中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。其中中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于輕度損傷亞組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于中度損傷亞組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

表2 輕、中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in mild，moderate and severe neurological impairment subgroups

表2 輕、中、重度損傷亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in mild，moderate and severe neurological impairment subgroups

注：與輕度損傷亞組比較，aP<0.05；與中度損傷亞組比較，bP<0.05

ACA（mg/L）組別 例數(shù) VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）輕度損傷亞組 36 6.27±1.73 1.90±0.54 0.84±0.27中度損傷亞組 48 8.55±2.28a 2.46±0.65a 1.26±0.29a重度損傷亞組 32 11.03±2.51ab 3.12±0.87ab 1.42±0.36ab F值 39.951 26.733 34.258 P值 <0.001 <0.001 <0.001

2.3 大、中、小面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較 大、中、小面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。其中中、大面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于小面積梗死亞組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；大面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于中面積梗死亞組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3。

表3 大、中、小面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in small，medium and large infarction subgroups

表3 大、中、小面積梗死亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in small，medium and large infarction subgroups

注：與小面積梗死亞組比較，aP<0.05；與中面積梗死亞組比較，bP<0.05

ACA（mg/L）小面積梗死亞組 31 6.68±1.82 1.96±0.54 0.92±0.36中面積梗死亞組 55 8.19±2.49a 2.36±0.70a 1.19±0.34a大面積梗死亞組 30 11.05±2.58ab 3.19±0.80ab 1.40±0.35ab F值 27.172 25.471 14.376 P值 <0.001 <0.001 <0.001組別 例數(shù) VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.4 預(yù)后良好、預(yù)后不良亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較 預(yù)后不良亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于預(yù)后良好亞組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表4。

表4 預(yù)后良好、預(yù)后不良亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in good and poor prognosis subgroups

表4 預(yù)后良好、預(yù)后不良亞組血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum levels of VILIP-1，CXCL16 and ACA in good and poor prognosis subgroups

ACA（mg/L）預(yù)后良好亞組 70 7.21±2.29 2.11±0.62 1.02±0.34預(yù)后不良亞組 46 10.53±2.42 3.01±0.81 1.40±0.33 t值 7.468 6.805 5.856 P值 <0.001 <0.001 <0.001組別 例數(shù) VILIP-1（μg/L）CXCL16（μg/L）

2.5 血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測(cè)急性腦梗死預(yù)后分析 繪制血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測(cè)急性腦梗死預(yù)后的ROC曲線，結(jié)果顯示，血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測(cè)急性腦梗死預(yù)后的AUC分別為0.848、0.820、0.784（表5、圖1）。

圖1 血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測(cè)急性腦梗死預(yù)后的ROC曲線Figure 1 ROC curve analysis of serum VILIP-1，CXCL16 and ACA in predicting the prognosis of acute cerebral infarction

表5 血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測(cè)急性腦梗死預(yù)后的AUC、靈敏度、特異度Table 5 The AUC，sensitivity and specificity of serum VILIP-1，CXCL16 and ACA in predicting the prognosis of acute cerebral infarction

3 討論

急性腦梗死具有起病急、發(fā)病率高、致殘率高、病死率高等特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，也給患者家庭帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān)。因此，尋找準(zhǔn)確且有效的檢測(cè)指標(biāo)，及時(shí)干預(yù)治療對(duì)于急性腦梗死的臨床防治工作意義重大。ACA是一種以血小板和內(nèi)皮細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的心磷脂為靶抗原的自身抗體，可與內(nèi)皮細(xì)胞上的磷脂結(jié)合蛋白相互結(jié)合，使得細(xì)胞膜磷脂成分減少，前列腺素合成量降低，同時(shí)介導(dǎo)花生四烯酸大量釋放，引起血管內(nèi)皮損傷，且隨著局部血管收縮，血小板聚合效果增強(qiáng)，影響機(jī)體的抗凝作用，進(jìn)而導(dǎo)致血栓形成風(fēng)險(xiǎn)增加［10-11］。本研究結(jié)果顯示，急性腦梗死組血清ACA水平高于對(duì)照組，提示ACA指標(biāo)在腦梗死發(fā)病過(guò)程發(fā)揮了一定的作用。急性腦梗死可由動(dòng)脈硬化發(fā)展而來(lái)，患者發(fā)病過(guò)程中內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷導(dǎo)致細(xì)胞膜上的磷脂成分暴露，并刺激機(jī)體產(chǎn)生ACA，進(jìn)一步誘發(fā)血栓形成，從而引發(fā)惡性循環(huán)［12-13］。

VILIP-1屬于小分子胞質(zhì)蛋白，主要表達(dá)于腦部神經(jīng)元，具有較高的神經(jīng)系統(tǒng)特異性；其可通過(guò)結(jié)合鈣離子并調(diào)控鈣平衡發(fā)揮相關(guān)生物學(xué)作用。本研究結(jié)果顯示，急性腦梗死組血清VILIP-1水平高于對(duì)照組，表明VILIP-1指標(biāo)一定程度上可評(píng)估腦梗死發(fā)病情況。已有研究表明，VILIP-1能夠驅(qū)動(dòng)腦脊液中的tau蛋白，使其聚集并對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生毒性，導(dǎo)致微管蛋白失效，從而引起神經(jīng)功能衰退［14-15］。由此可見(jiàn)，VILIP-1水平與腦損傷疾病進(jìn)展均有一定的相關(guān)性，可作為腦部損傷的敏感標(biāo)志物。而急性腦梗死患者腦組織因缺血缺氧，致使腦部神經(jīng)元受損，進(jìn)而使胞內(nèi)的VILIP-1大量釋放到細(xì)胞外，并進(jìn)入外周血，因此血清VILIP-1水平呈升高表現(xiàn)［16］。

本研究結(jié)果顯示，急性腦梗死組血清CXCL16水平高于對(duì)照組。有關(guān)研究結(jié)果表明，炎性反應(yīng)是腦梗死發(fā)生后進(jìn)一步誘發(fā)腦損傷進(jìn)展的關(guān)鍵病理過(guò)程，是導(dǎo)致血管內(nèi)皮與神經(jīng)功能損傷惡化的重要因素［17］。CXCL16屬于趨化因子，可在細(xì)胞區(qū)及淋巴結(jié)中表達(dá)，通過(guò)參與炎性反應(yīng)和新生血管形成維持機(jī)體免疫系統(tǒng)的自我穩(wěn)定；而當(dāng)組織發(fā)生病變時(shí)，CXCL16作為血管源性因子在誘導(dǎo)血管生成的同時(shí)也易導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定性增加，引發(fā)出血及破裂［18-19］。XING等［20］研究顯示，CXCL16水平與急性冠脈綜合征病情及炎癥嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，對(duì)腦損傷疾病進(jìn)展有促進(jìn)作用。發(fā)生腦梗死后，激活的膠質(zhì)細(xì)胞將釋放腫瘤壞死因子、白介素等炎性因子，隨著促炎信號(hào)的增強(qiáng)，內(nèi)皮細(xì)胞趨化因子及其受體水平上調(diào)，趨化功能逐漸加強(qiáng)，導(dǎo)致CXCL16從細(xì)胞表面脫落而參與淋巴細(xì)胞群的遷移，血清CXCL16表達(dá)量增加。

NIHSS評(píng)分是評(píng)價(jià)腦血管疾病后神經(jīng)功能損傷程度的重要標(biāo)準(zhǔn)，可綜合評(píng)估腦梗死患者的腦損傷嚴(yán)重程度；此外，可通過(guò)腦部影像學(xué)檢查評(píng)判患者腦梗死面積，梗死面積越大意味著患者動(dòng)脈供血區(qū)腦組織壞死和軟化情況越嚴(yán)重。本研究將急性腦梗死患者按NIHSS評(píng)分、梗死面積及預(yù)后情況分亞組并進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平隨著急性腦梗死患者NIHSS評(píng)分的升高、梗死面積的增大呈逐漸上升趨勢(shì)，提示血清VILIP-1、CXCL16、ACA參與神經(jīng)功能損傷過(guò)程，是評(píng)估腦梗死患者病情嚴(yán)重程度的敏感指標(biāo)。腦梗死面積指腦組織壞死、軟化區(qū)域大小，其與神經(jīng)功能損傷是急性腦梗死發(fā)生發(fā)展過(guò)程中兩個(gè)同時(shí)存在且相互影響的病理生理特征。隨著腦梗死斑塊的擴(kuò)大，大量ACA被刺激形成，促使血小板聚合，且可在一定程度上推動(dòng)局部炎性反應(yīng)發(fā)生。此外，隨著腦梗死病情不斷發(fā)展，患者腦組織神經(jīng)元發(fā)生變性甚至凋亡，即神經(jīng)元損傷，使得其中的VILIP-1因子表達(dá)失常并進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，引發(fā)血清VILIP-1水平上升；且神經(jīng)元損傷可促進(jìn)促炎性信號(hào)釋放，從而導(dǎo)致趨化因子CXCL16發(fā)生高表達(dá)。另外，本研究結(jié)果顯示，預(yù)后不良的急性腦梗死患者血清VILIP-1、CXCL16、ACA水平高于預(yù)后良好者，且血清VILIP-1、CXCL16、ACA預(yù)測(cè)急性腦梗死預(yù)后情況的AUC分別為0.848、0.820、0.784，說(shuō)明VILIP-1、CXCL16及ACA指標(biāo)對(duì)于腦梗死患者預(yù)后情況具有較好的診斷作用及預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，急性腦梗死患者機(jī)體血清VILIP-1、CXCL16及ACA水平較健康人群明顯上升，且各指標(biāo)的表達(dá)與腦梗死損傷程度分型及臨床預(yù)后密切相關(guān)，可作為預(yù)測(cè)急性腦梗死預(yù)后情況的有效指標(biāo)。

作者貢獻(xiàn)：陳圣君進(jìn)行文章構(gòu)思與設(shè)計(jì)、統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果分析、撰寫(xiě)論文；李波、陳國(guó)柱進(jìn)行研究實(shí)施、資料收集整理、質(zhì)量控制與文章修訂；楊丹進(jìn)行文章審校，并對(duì)文章整體負(fù)責(zé)。

本文無(wú)利益沖突。